Name: retro-orbital injection in adult zebrafish
Uploaded: 2009-12-07T18:43:00
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이 작품은 하워드 휴즈 의학 연구소와 배아 조혈 연구에 대한 NIH에서 교부금에 의해 지원됩니다.

1 부. 사출 재료의 준비 <ol><li> TG (globin : GFP) 세포 : </li><li> 길 뒤에 찔린 물고기 헤파린 (1unit/ul)에 코팅 10ul 피펫 팁을 사용하여 성인 기증자 물고기 출혈. </li><li> 적혈구를 기음과 셀 버퍼에 분배 (0.9X PBS + 5% FBS + 1 %의 펜 / Strep). </li><li> 필터 셀 40uM 메쉬 이상의 정지 및 이전 르블랑 외 의해 설명한대로 hemocytometer를 사용하여 세포의 농도를 결정한다. </li><li> 스핀 다운 및 최종 사출 량이 5ul ...

<ol>
	<li>Steel, C. D., Stephens, A. L., Hahto, S. M., Singletary, S. J., Ciavarra, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+the+lateral+tail+vein+and+the+retro-orbital+venous+sinus+as+route+of+intravenous+drug+delivery+in+a+transgenic+mouse+model.">Comparison of the lateral tail vein and the retro-orbital venous sinus as route of intravenous drug delivery in a transgenic mouse model.</a> Lab Animal. 37, 26-32 (2008).</li><li>Pinkerton, W., Webber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+injecting+small+laboratory+animals+by+the+ophthalmic+plexus+route.">A method of injecting small laboratory animals by the ophthalmic plexus route.</a> Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 116, 959-961 (1964).</li><li>White, R. M., Sessa, A. S., Burke, C., Bowman, T., LeBlanc, J., Ceol, C., Bourque, C., Dovey, M., Goessling, W., Burns, C. E., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transparent+adult+zebrafish+as+a+tool+for+in+vivo+transplantation+analysis.">Transparent adult zebrafish as a tool for in vivo transplantation analysis.</a> Cell Stem Cell. 2, 183-189 (2008).</li><li>LeBlanc, J., Bowman, T. V., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+whole+kidney+marrow+in+adult+zebrafish.">Transplantation of whole kidney marrow in adult zebrafish.</a> J. Vis. Exp. , (2007).</li></ol>

성인 zebrafish에서 레트로 - 궤도 분사는 사망률의 가장 낮은 발병률과 혈류에 주입 물질의 전달 가장 높은 효율을 제공합니다. 때문에 분사 지점의 성격, 주사 감염과 혈액 손실 금액의 발생을 감소 신속하게 치유가 나타납니다. 사이트도 반복 예를 들어, 약물의 매일 주사를위한 짧은 시간 동안 주입 수 있습니다. 약물의 다량은 간단하게 포장되어과 관심의 약물을 포함하는 ...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Heparin sodium salt from porcine intestinal mucosa</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>2106</td>
<td>Preweighed vial of 300 USP units</td>
</tr>
<tr>
<td>Tricaine-S</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Western Chemical</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MS-222</td>
</tr>
<tr>
<td>Dulbecco&#x2019;s Phosphate Buffered Saline</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14190-144</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dextran, Texas Red&reg;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Molecular Probes Inc.</td>
<td>D1830</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>E3</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>5mM NaCl 
0.17 mM Kcl 
0.33 mM CaCl2 
0.33 mM MgSO2
</td>
</tr>
<tr>
<td>Microliter Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hamilton</td>
<td>80300</td>
<td>701N 10uL SYR (26s/2&#x201D;/2)</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

retro-orbital injection in adult zebrafish

전체 동물의 약물 치료 약리 화학 유전 연구에 대한 모델 시스템에 필수적인 도구입니다. 정맥 주사 (IV) 주사가 종종 관심의 대리인의 전달의 가장 효과적이고 비침 투 형태입니다. zebrafish에서 (<em&gt; Danio rerio</em&gt;), 약물의 IV 주입 길이 때문에 작은 혈관 직경의 도전을했습니다. 이것은 또한 hematopoeitic 줄기 세포 이식하는 동안 세포의 주입을위한 중요한 장애물을 입증했다. 역사적으로, 혈류로 주사는 심장을 통해 직접 수행했다. 심장이 자주 감염, 과다 출혈이나 치명적인 장기 손상하는 경향이 물고기를 떠나 주입하는 동안 구멍이다 그러나,이 내부 심장 절차는 매우 높은 사망률이 있습니다. 마우스로 우리의 경험에 그리기, 우리는 사출 사이트가 눈 뒤에과 복고풍 - 궤도 정맥 부비동에있는 zebrafish의 새로운 주사 절차를 개발했습니다. 이 역 - 궤도 (RO) 사출 기술은 성공적으로 성인 물고기에서 약물 주입뿐만 아니라 전체 신장 골수 세포의 이식 모두에 채용되었습니다. RO 주입은 전통적인 내부 심장 주사보다 훨씬 낮은 사망률이 있습니다. 복고풍 - orbitally 주입 물고기 적은 다음과 같은 주사를 출혈하는 경향이 있고 심장과 같은 주요 장기에 부상의 훨씬 더 낮은 위험에 처해질 수 있습니다. 또한, 정상적으로 수행하면, 주입된 세포 및 / 또는 약물 빠르게 화합물들이 틈새 시장을 집에서 쉽게 전체 생선과 신장의 세포를 그들의 효과를 발휘 수 있도록 혈류를 입력합니다. 성인 물고기의 혈류로 재료의 효율적인 전송을 허용하는 동안 따라서,이 새로운 사출 기술은 사망률을 최소화합니다. 여기 TG의 역전사 궤도 주입하여이 기술을 예시 (<em&gt; globin</em&gt; 성인에 GFP) 전지<em&gt; 캐스퍼</em&gt; 생선뿐만 아니라 적색 형광 색소의 주입 (dextran, 텍사스 레드<em&gt;</em&gt;) 성인에<em&gt; 캐스퍼</em&gt; 물고기. 그러면 모든 동물의 형광 현미경에 의해 성공적으로 주사를 시각화.

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Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

여기 우리는 성인 zebrafish에서 역전사 궤도 주사를하는 방법을 보여줍니다.

성인 Zebrafish에서 레트로 - 궤도 분사

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

Research

JoVE Journal

Biology

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

성인 Zebrafish의 전체 신장 마로우의 이식

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

연구

생물학

Zebrafish Brain Ventricle Injection

Zebrafish의 두뇌 뇌실 주입

Proper brain ventricle formation during embryonic brain development is required for normal brain function.  Brain ventricles are the highly conserved ...

Dissection of Organs from the Adult Zebrafish

성인 Zebrafish에서 기관의 해부

Over the last 20 years, the zebrafish has become a powerful model organism for understanding vertebrate development and disease.  Although experimental ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

성인 Zebrafish에 Intraperitoneal 사출

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

Dissection of the Adult Zebrafish Kidney

성인 Zebrafish의 신장의 해부

Researchers working in the burgeoning field of adult stem cell biology seek to understand the signals that regulate the behavior and function of stem ...

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

Heart Dissection in Larval, Juvenile and Adult Zebrafish, Danio rerio

애벌레의 심장 해부, 소년과 성인 Zebrafish, Danio rerio</em

Zebrafish have become a beneficial and practical model organism for the study of embryonic heart development (see recent reviews1-6), however, work ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

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Morpholinos의 생체내의 Electroporation에서 성인 Zebrafish의 망막에

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

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생성중 성인 Zebrafish 테일 핀으로 Morpholinos의 생체내 Electroporation에

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

성인 Zebrafish의 생물 화학 분석을위한 혈액 수집

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Gavaging Adult Zebrafish

성인 Zebrafish의를 Gavaging

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...