Name: presynaptically silent synapses studied with light microscopy
Uploaded: 2010-01-04T17:00:00
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이 작품은 워싱턴 대학에 NIH 보조금 DA018109과 MH78823, 그리고 NIH 신경 과학 청사진 코어 부여 P30NS057105에 의해 지원되었다.

문화 준비 <ol><li> 출생 후의 일 0-3 동물에게 1에서 쥐가 드나 마우스 hippocampal 세포의 세포 dissociated 문화를 준비합니다. 우리의 뉴런은에 숫자 0이 두께 coverslip에 보급 콜라겐 층을 준수 돌려 기본 astrocyte monolayer에 준수. cm2 당 약 500 세포의 밀도에 신경 플레이트. </li><li> 문화가 시냅스 개발과 성숙을 할 수 10~14일위한 성장을 허용합니다. 더 glial 성장을 체포하기 위해 antimitotic의 AraC과 함...

<ol>
	<li>Mennerick, S., Que, J., Benz, A., Zorumski, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Passive+and+synaptic+properties+of+hippocampal+neurons+grown+in+microcultures+and+in+mass+cultures.">Passive and synaptic properties of hippocampal neurons grown in microcultures and in mass cultures.</a> J. Neurophysiol. 73, 320-332 (1995).</li><li>Moulder, K. L., Jiang, X., Taylor, A. A., Olney, J. W., Mennerick, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+activity+depresses+synaptic+function+through+an+effect+on+vesicle+priming.">Physiological activity depresses synaptic function through an effect on vesicle priming.</a> J. Neurosci. 26, 6618-6626 (2006).</li><li>Moulder, K. L., Jiang, X., Chang, C., Taylor, A. A., Benz, A. M., Conti, A. C., Muglia, L. J., Mennerick, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+specific+role+for+Ca2+-dependent+adenylyl+cyclases+in+recovery+from+adaptive+presynaptic+silencing.">A specific role for Ca2+-dependent adenylyl cyclases in recovery from adaptive presynaptic silencing.</a> J. Neurosci. 28, 5159-5168 (2008).</li><li>Sara, Y., Mozhayeva, M. G., Liu, X., Kavalali, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+vesicle+recycling+supports+neurotransmission+during+sustained+stimulation+at+hippocampal+synapses.">Fast vesicle recycling supports neurotransmission during sustained stimulation at hippocampal synapses.</a> J. Neurosci. 22, 1608-1617 (2002).</li><li>Kay, A. R., Alfonso, A., Alford, S., Cline, H. T., Holgado, A. M., Sakmann, B., Snitsarev, V. A., Stricker, T. P., Takahashi, M., Wu, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+synaptic+activity+in+intact+brain+and+slices+with+FM1-43+in+C.+elegans,+lamprey,+and+rat.">Imaging synaptic activity in intact brain and slices with FM1-43 in C. elegans, lamprey, and rat.</a> Neuron. 24, 809-817 (1999).</li><li>Rosenmund, C., Sigler, A., Augustin, I., Reim, K., Brose, N., Rhee, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+control+of+vesicle+priming+and+short-term+plasticity+by+Munc13+isoforms.">Differential control of vesicle priming and short-term plasticity by Munc13 isoforms.</a> Neuron. 33, 411-424 (2002).</li><li>Altrock, W. D., tom Dieck, S., Sokolov, M., Meyer, A. C., Sigler, A., Brakebusch, C., Fassler, R., Richter, K., Boeckers, T. M., Potschka, H., Brandt, C., Loscher, W., Grimberg, D., Dresbach, T., Hempelmann, A., Hassan, H., Balschun, D., Frey, J. U., Brandstatter, J. H., Garner, C. C., Rosenmund, C., Gundelfinger, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+inactivation+of+a+fraction+of+excitatory+synapses+in+mice+deficient+for+the+active+zone+protein+bassoon.">Functional inactivation of a fraction of excitatory synapses in mice deficient for the active zone protein bassoon.</a> Neuron. 37, 787-800 (2003).</li><li>Ting, J. T., Kelley, B. G., Lambert, T. J., Cook, D. G., Sullivan, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+precursor+protein+overexpression+depresses+excitatory+transmission+through+both+presynaptic+and+postsynaptic+mechanisms.">Amyloid precursor protein overexpression depresses excitatory transmission through both presynaptic and postsynaptic mechanisms.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 104, 353-348 (2007).</li></ol>

의미 <ol><li> 일반적으로 시냅스는 측정 확률과 송신기를 출시하여 작동하는 생각되고 있습니다. 자신과 다른 사람이 작업은 기공을 갖는 신경 전달 물질의 수송과 다른 주요 presynaptic 마커 2, 6-8의 전체 보완에도 불구하고, 일부 시냅스가 신경 전달 물질을 방출하는 내화물하는 그것이 분명합니다. 우리는 뉴런의 기초 네트워크 활동이 비활성 시냅스의 인구를 유지하는 것이 중요합니다 ...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>FM1-43FX</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>F-35355</td>
<td>A red-shifted FM4-64FX is also available, but has not proven as amenable to assays of presynaptic silencing.</td>
</tr>
<tr>
<td>Advasep-7</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CyDex</td>
<td>AR-0A7-001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>vGluT-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Millipore</td>
<td>AB5905</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Alexa 647-conjugated anti-GP</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>A-21450</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fluoromount-G</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Southern Biotechnology Associates</td>
<td>0100-01</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

presynaptically silent synapses studied with light microscopy

시냅스 소성 가능성 underlies 학습과 기억 또한 neurotoxic되는 것을 달리 손상 모욕을 방지 적응력을 나타내는 5 신경계의 능력. 그것이 신경 전달 물질의 글루 탐 산염을 포함한 vesicles 발표 presynaptic 터미널의 능력의 디지털 전환 및 해제로 표현되기 때문에 우리는 부분적으로 흥미로운 presynaptic 소성의 형태를 공부하고 있습니다. 여기서 우리는 설치류의 해마에서 준비 dissociated 셀 문화에 presynaptic 터미널의 활동 상태를 시각화를위한 프로토콜을 보여줍니다. 이 메서드는 일반적으로 시냅스 vesicles 레이블을하는 데 사용되는 styryl 염료의 고칠수 형태 FM1 -​​ 43와 얼룩을 사용하여 활성 시냅스를 감지에 의존합니다. 이 얼룩 프로필은 기공을 갖는 글루 탐 산염 수송 1 (vGluT - 1)에 관계없이 정품 인증 상태의 라벨 모두 글루 탐 산염 시냅스를위한 얼룩에 대한 감독 항체와 같은 단말기의 immunostaining와 비교됩니다. 우리는 depolarizing 자극이 presynaptic 입을를 유도 것을 발견했습니다. 기준 조건 하에서 침묵 시냅스의 인구는 장시간 전기 입을 또는 CAMP 신호 통로의 활성화에 의해 활성화할 수 있습니다.

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Presynaptically Silent Synapses Studied with Light Microscopy

Glutamatergic 시냅스는 자동 모드로 활성 모드에서 전환할 수 있습니다. 우리는 쥐 뉴런의 dissociated 문화에 presynaptic 활동 상태를 보여주는 것은 적극적인 시냅스를 시각화하는 FM1 -​​ 43 염료의 고칠수 양식을 사용하여 모든 글루 탐 산염 시냅스를 시각화하는 vGluT - 1 항체와 immunostaining 시각이다.

라이트 현미경과 연구 Presynaptically 사일런트 시냅스

Synaptic plasticity likely underlies the nervous system's ability to learn and remember and may also represent an adaptability that prevents otherwise ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

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의 준비 Drosophila</em라이트 현미경을 위해> S2 세포

The ideal experimental system would be cheap and easy to maintain, amenable to a variety of techniques, and would be supported by an extensive literature ...

연구

생물학

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기계 자극에 라이브 세포 응답 통합 광학과 원자 힘 현미경에 의해 연구

To understand the mechanism by which living cells sense mechanical forces, and how they respond and adapt to their environment, a new technology able to ...

Direct Imaging of ER Calcium with Targeted-Esterase Induced Dye Loading (TED)

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대상 - 에스테르 가수 분해 효소와 ER 칼슘의 직접 이미징 유발 염료 로딩 (TED)

Visualization of calcium dynamics is important to understand the role of calcium in cell physiology. To examine calcium dynamics, synthetic fluorescent ...

Examination of Drosophila Larval Tracheal Terminal Cells by Light Microscopy

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의 검사<em&gt; 초파리</em가벼운 현미경으로&gt; 애벌레 기관 내 터미널 셀

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3D-FRAP 현미경을 이용한 miRNA의 gap junction 의존적 전달 분석

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