Name: single-cell suction recordings from mouse cone photoreceptors
Uploaded: 2010-01-05T20:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors at JoVE.com

بدعم من جائزة التطوير المهني من البحوث للوقاية من العمى ، المعاهد الوطنية للصحة منح EY 019312 ، ومنح غير مقيدة من البحوث للوقاية من العمى وEY 02687 (قسم علوم طب وجراحة العيون والبصرية في جامعة واشنطن).

صنع الأقطاب <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل أقطاب تسجيل باستخدام مجتذب micropipette وتلميع كهربائي مع خيوط التسخين تحت المجهر. لتسجيل الماوس مخروط الشفط وحيدة الخلية ، وقطرها الداخلي على الطرف الكهربائي حوالي ميكرومتر 6-7. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ?...

<ol>
	<li>Yau, K. W., Lamb, T. D., Baylor, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light-induced+fluctuations+in+membrane+current+of+single+toad+rod+outer+segments.">Light-induced fluctuations in membrane current of single toad rod outer segments.</a> Nature. 269, 78-80 (1977).</li><li>Nikonov, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoreceptors+of+Nrl+-/-+mice+coexpress+functional+S-+and+M-cone+opsins+having+distinct+inactivation+mechanisms.">Photoreceptors of Nrl -/- mice coexpress functional S- and M-cone opsins having distinct inactivation mechanisms.</a> J Gen Physiol. 125, 287-304 (2005).</li><li>Nikonov, S. S., Kholodenko, R., Lem, J., Pugh, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+features+of+the+S-+and+M-cone+photoreceptors+of+wild-type+mice+from+single-cell+recordings.">Physiological features of the S- and M-cone photoreceptors of wild-type mice from single-cell recordings.</a> J Gen Physiol. 127, 359-374 (2006).</li><li>Applebury, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+murine+cone+photoreceptor:+a+single+cone+type+expresses+both+S+and+M+opsins+with+retinal+spatial+patterning.">The murine cone photoreceptor: a single cone type expresses both S and M opsins with retinal spatial patterning.</a> Neuron. 27, 513-523 (2000).</li><li>Cornwall, M. C., Fein, A., MacNichol, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+mechanisms+that+underlie+bleaching+and+background+adaptation.">Cellular mechanisms that underlie bleaching and background adaptation.</a> J Gen Physiol. 96, 345-372 (1990).</li><li>Calvert, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phototransduction+in+transgenic+mice+after+targeted+deletion+of+the+rod+transducin+alpha+-subunit.">Phototransduction in transgenic mice after targeted deletion of the rod transducin alpha -subunit.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97, 13913-13918 (2000).</li></ol>

وقد وضعت وحيدة الخلية تسجيل الشفط من خلايا مستقبلة للضوء 3 عقود مضت. انها تمكننا من تسجيل عبر غشاء تغيير الحالي الناجم عن ضوء التحفيز دون اختراق غشاء الخلية. بسبب التصاق الخلية خلية عالية ، وأنه من الصعب عزل قضيب واحد صحي والمخروط من شبكية العين شبكية العين مثل الماوس ...

single-cell suction recordings from mouse cone photoreceptors

وقضيب مبصرات مخروط في شبكية العين هي المسؤولة عن الكشف عن الضوء. في الظلام ، ودوري النوكليوتيدات بوابات (CNG) القنوات في الجزء الخارجي مفتوحة وتسمح باستمرار تدفق الكاتيونات إلى الداخل عبر الغشاء ، depolarizing الخلية. التعرض للضوء مشغلات إغلاق قنوات الغاز الطبيعي المضغوط ، وكتل التدفق الداخل الموجبة الحالية ، وبالتالي يؤدي إلى فرط الاستقطاب الخلية. استنادا إلى قطبية مبصرات ، تم تطوير طريقة تسجيل الشفط في 1970s أنه ، خلافا للأسلوب الكلاسيكي التصحيح ، المشبك ، لا يتطلب اختراق غشاء البلازما<sup&gt; 1</sup&gt;. الرسم الجزء الخارجي إلى ماصة الزجاج بإحكام تركيب مليئة حل خارج الخلية يسمح بتسجيل التغيرات الحالية في الخلايا الفردية عند التعرض للتجارب فلاش. ومع ذلك ، هذا الراسخة &quot;، الجزء الخارجي في (OS في)&quot; تسجيل الشفط ليست مناسبة لتسجيلات مخروط الماوس ، وذلك بسبب انخفاض النسبة المئوية للالمخاريط في شبكية العين الماوس (3 ٪) ، والصعوبات في تحديد مخروط شرائح الخارجي. مؤخرا ، تم تطويره على قطعة داخلية ، في (IS - في) تسجيل التكوين أن يوجه الجزء الداخلي / المنطقة النووية لمبصرة في تسجيل ماصة<sup&gt; 2،3</sup&gt;. في هذا الفيديو ، وسوف نعرض كيفية تسجيل من الفردية photoresponses المخروط باستخدام الماوس وحيدة الخلية الكهربائي الشفط.

Watch this Scientific Journal Video about Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors at JoVE.com

Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

وسوف نظهر كيف يمكن تسجيل ردود فلاش من المخاريط ماوس واحدة باستخدام القطب الشفط.

تسجيلات شفط وحيدة الخلية المستقبلة من المخروط ماوس

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Patch Clamp Capacitance Recordings from the Calyx

أساليب لتصحيح تسجيلات السعة المشبك من كاليكس

We demonstrate the basic techniques for presynaptic patch clamp recording at the calyx of Held, a mammalian central nervous system nerve terminal. ...

Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila

تسجيلات كاملة من خلية دماغ ذبابة الفاكهة الكبار

In this video, we demonstrate the procedure for isolating whole brains from adult Drosophila in preparation for recording from single neurons. We begin by ...

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

إعداد وحيدة الخلية معلقات من الطحال ماوس مع Dissociator gentleMACS

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

إعداد موحدة وحيدة الخلية معلقات من أنسجة الرئة باستخدام الماوس Dissociator gentleMACS

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

جيل وحيدة الخلية معلقات من الأنسجة العصبية ماوس

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Single Cell Transcriptional Profiling of Adult Mouse Cardiomyocytes

التنميط واحدة من الخلايا العضلية الترانسكربتي ماوس الكبار

While numerous studies have examined gene expression changes from homogenates of heart tissue, this prevents studying the inherent stochastic variation ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

جيل من الفئران المستمدة من الخلايا الجذعية المحفزة المستحثة

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Isolation of Endothelial Cells from the Lumen of Mouse Carotid Arteries for Single-Cell Multi-Omics Experiments

عزل الخلايا البطانية عن تجويف الشرايين السباتية للفئران لإجراء تجارب متعددة الخلايا أحادية الخلية

Atherosclerosis is an inflammatory disease of the arterial regions exposed to disturbed blood flow (d-flow). D-flow regulates the expression of genes in ...

Isolation of Nuclei from Flash-Frozen Liver Tissue for Single-Cell Multiomics

عزل النوى من أنسجة الكبد المجمدة بالفلاش من أجل Multiomics أحادية الخلية

The liver is a complex and heterogenous tissue responsible for carrying out many critical physiological functions, such as the maintenance of energy ...

Single-Cell Suspension Preparation from Nile Tilapia Intestine for Single-Cell Sequencing

تحضير معلق أحادي الخلية من أمعاء البلطي النيلي لتسلسل الخلية الواحدة

Nile tilapia is one of the most commonly cultured freshwater fish species worldwide and is a widely used research model for aquaculture fish studies. The ...