Name: single-cell suction recordings from mouse cone photoreceptors
Uploaded: 2010-01-05T20:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors at JoVE.com

失明とEY 02687（ワシントン大学眼科視覚科学の部）防止のための研究から失明、NIHの助成金EY 019312、および無制限の助成金を防止するための研究からキャリア開発賞でサポートされています。

電極を作る<ol><li>マイクロピペットプラーを使用して、記録電極を作成し、顕微鏡下で加熱フィラメントと電極を磨く。マウスの錐体単一細胞吸引録音の場合、電極先端の内径は6-7μm程度である。 </li><li>参照電極を準備する。蒸留水で1％の寒天を量る。湯浴の寒天液を溶かす。シリンジを用いて1％の寒天をガラスピペットを（L = 100 mmの外径/ ID = 1/0.75 mm）を記入します。 10分間室温で寒天?...

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	<li>Yau, K. W., Lamb, T. D., Baylor, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light-induced+fluctuations+in+membrane+current+of+single+toad+rod+outer+segments.">Light-induced fluctuations in membrane current of single toad rod outer segments.</a> Nature. 269, 78-80 (1977).</li><li>Nikonov, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoreceptors+of+Nrl+-/-+mice+coexpress+functional+S-+and+M-cone+opsins+having+distinct+inactivation+mechanisms.">Photoreceptors of Nrl -/- mice coexpress functional S- and M-cone opsins having distinct inactivation mechanisms.</a> J Gen Physiol. 125, 287-304 (2005).</li><li>Nikonov, S. S., Kholodenko, R., Lem, J., Pugh, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+features+of+the+S-+and+M-cone+photoreceptors+of+wild-type+mice+from+single-cell+recordings.">Physiological features of the S- and M-cone photoreceptors of wild-type mice from single-cell recordings.</a> J Gen Physiol. 127, 359-374 (2006).</li><li>Applebury, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+murine+cone+photoreceptor:+a+single+cone+type+expresses+both+S+and+M+opsins+with+retinal+spatial+patterning.">The murine cone photoreceptor: a single cone type expresses both S and M opsins with retinal spatial patterning.</a> Neuron. 27, 513-523 (2000).</li><li>Cornwall, M. C., Fein, A., MacNichol, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+mechanisms+that+underlie+bleaching+and+background+adaptation.">Cellular mechanisms that underlie bleaching and background adaptation.</a> J Gen Physiol. 96, 345-372 (1990).</li><li>Calvert, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phototransduction+in+transgenic+mice+after+targeted+deletion+of+the+rod+transducin+alpha+-subunit.">Phototransduction in transgenic mice after targeted deletion of the rod transducin alpha -subunit.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97, 13913-13918 (2000).</li></ol>

視細胞から単一細胞吸引の記録は3年前に開発されました。それは細胞膜を貫通することなく、光刺激により誘発される膜貫通電流変化を記録することを可能にします。が高いために細胞間接着のために、それは両生類の網膜のようなマウスの網膜から健康なシングルロッドとコーンを分離することは困難であり、それは低い割合（3％）と小さいサイズのため、個々の錐体を見つけるのは難?...

single-cell suction recordings from mouse cone photoreceptors

網膜の桿体と錐体光受容体は、光検出のための責任があります。暗闇の中で、外側のセグメントにおける環状ヌクレオチド依存性（CNG）チャネルが開いていて、陽イオンが細胞を脱分極、膜を横切って内側に着実に流れるようになります。光露光では、CNGチャネル、ブロック内向きの陽イオン電流の流れ、および従って細胞過分極の結果の閉鎖をトリガします。光受容体の極性に基づいて、吸引の記録方式は、古典的パッチクランプ法とは異なり、原形質膜を貫通する必要がない、1970年代に開発された<sup&gt; 1</sup&gt;。細胞外液を満たしたしっかりフィットガラスピペットに外側のセグメントを描画するテスト - ストロボ調光時に個々の細胞の電流変化を記録することができます。しかし、この十分に確立された&quot;外側のセグメントイン（OS - IN）&quot;吸引録音ため、マウスの網膜の錐体の割合が低い（3％）とコーンの同定に関する問題点から、マウスのコーンの録音には適していません外側のセグメント。最近、内側セグメントの（IS -の）記録の設定は、録音のピペットに内側のセグメント/光受容体の核領域を描画するために開発された<sup&gt; 2,3</sup&gt;。このビデオでは、我々は単一細胞吸引電極を用いて個々のマウスのコーンphotoresponsesから録音する方法を示します。

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Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

我々は、吸引電極を用いてマウスのシングルコーンからフラッシュの応答を記録する方法を説明します。

マウスの錐体光受容体からの単一細胞サクション録音

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Patch Clamp Capacitance Recordings from the Calyx

がくからパッチクランプの静電容量の録音のための方法

We demonstrate the basic techniques for presynaptic patch clamp recording at the calyx of Held, a mammalian central nervous system nerve terminal. ...

Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila

アダルトショウジョウバエの脳から全細胞レコーディング

In this video, we demonstrate the procedure for isolating whole brains from adult Drosophila in preparation for recording from single neurons. We begin by ...

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

gentleMACS Dissociatorとマウス脾臓からの単細胞懸濁液の調製

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

gentleMACS Dissociatorを使用してマウスの肺組織からの単細胞懸濁液の標準化の準備

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

マウス神経組織から単細胞懸濁液の生成

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Single Cell Transcriptional Profiling of Adult Mouse Cardiomyocytes

成体マウスの心筋細胞の単一細胞転写プロファイリング

While numerous studies have examined gene expression changes from homogenates of heart tissue, this prevents studying the inherent stochastic variation ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

人工多能性幹細胞に由来するマウスの作製

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Isolation of Endothelial Cells from the Lumen of Mouse Carotid Arteries for Single-Cell Multi-Omics Experiments

シングルセルマルチオミクス実験のためのマウス頸動脈内腔からの内皮細胞の単離

Atherosclerosis is an inflammatory disease of the arterial regions exposed to disturbed blood flow (d-flow). D-flow regulates the expression of genes in ...

Isolation of Nuclei from Flash-Frozen Liver Tissue for Single-Cell Multiomics

シングルセルマルチオミクスのための瞬間凍結肝臓組織からの核の単離

The liver is a complex and heterogenous tissue responsible for carrying out many critical physiological functions, such as the maintenance of energy ...

Single-Cell Suspension Preparation from Nile Tilapia Intestine for Single-Cell Sequencing

シングルセルシーケンシングのためのナイルティラピア腸からのシングルセル懸濁液調製(英語)

Nile tilapia is one of the most commonly cultured freshwater fish species worldwide and is a widely used research model for aquaculture fish studies. The ...