Name: single-cell suction recordings from mouse cone photoreceptors
Uploaded: 2010-01-05T20:00:00
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실명과 어이 02687을 (워싱턴 대학에서 안과 &amp; 비주얼 과학 계열) 방지하기 위해 연구에서 실명, NIH 그랜트 어이 019,312, 그리고 무제한 부여를 방지하기 위해 연구에서 경력 개발 상을 지원.

전극 만들기 <ol><li> micropipette의 풀러를 사용하여 기록 전극을 만들어 현미경으로 가열 필라멘트와 전극을 폴란드어. 마우스 콘 단일 셀 흡입 녹음, 전극 팁의 내부 직경 6-7 μm의 약입니다. </li><li> 참조 전극을 준비합니다. 증류수 1 %의 한천을 나가는거야. 온수 욕조에있는 한천 솔루션을 용융. 주사기를 사용하여 1 %의 한천과 유리 pipettes을 (L = 100mm, OD / ID = 1/0.75 ㎜) 입력합니다. 10 분 상온에서 한...

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	<li>Yau, K. W., Lamb, T. D., Baylor, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light-induced+fluctuations+in+membrane+current+of+single+toad+rod+outer+segments.">Light-induced fluctuations in membrane current of single toad rod outer segments.</a> Nature. 269, 78-80 (1977).</li><li>Nikonov, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoreceptors+of+Nrl+-/-+mice+coexpress+functional+S-+and+M-cone+opsins+having+distinct+inactivation+mechanisms.">Photoreceptors of Nrl -/- mice coexpress functional S- and M-cone opsins having distinct inactivation mechanisms.</a> J Gen Physiol. 125, 287-304 (2005).</li><li>Nikonov, S. S., Kholodenko, R., Lem, J., Pugh, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+features+of+the+S-+and+M-cone+photoreceptors+of+wild-type+mice+from+single-cell+recordings.">Physiological features of the S- and M-cone photoreceptors of wild-type mice from single-cell recordings.</a> J Gen Physiol. 127, 359-374 (2006).</li><li>Applebury, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+murine+cone+photoreceptor:+a+single+cone+type+expresses+both+S+and+M+opsins+with+retinal+spatial+patterning.">The murine cone photoreceptor: a single cone type expresses both S and M opsins with retinal spatial patterning.</a> Neuron. 27, 513-523 (2000).</li><li>Cornwall, M. C., Fein, A., MacNichol, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+mechanisms+that+underlie+bleaching+and+background+adaptation.">Cellular mechanisms that underlie bleaching and background adaptation.</a> J Gen Physiol. 96, 345-372 (1990).</li><li>Calvert, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phototransduction+in+transgenic+mice+after+targeted+deletion+of+the+rod+transducin+alpha+-subunit.">Phototransduction in transgenic mice after targeted deletion of the rod transducin alpha -subunit.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97, 13913-13918 (2000).</li></ol>

photoreceptor 세포에서 단일 세포 흡입 기록은 3 년 전 개발되었습니다. 이것은 세포막을 관통하지 않고 빛의 자극에 의​​해 유도된 횡단 막 전류 변화를 기록하는 데 있습니다. 때문에 높은 세포 - 세포 부착, 이건 수륙 양용 망막과 같은 마우스 망막에서 건강한 하나의 막대와 원뿔을 분리하기 어려운이며 그것은 낮은 비율 (3 %)과 작은 크기로 인해 각각의 원뿔을 찾을 수 어렵습니다. 내부 세그먼...

single-cell suction recordings from mouse cone photoreceptors

망막에있는 막대와 원뿔 photoreceptors 빛을 감지 책임이 있습니다. 어둠에서 바깥쪽 구간에 주기적 염기 - 게이 티드 (CNG) 채널 오픈하고 양이온이 세포 depolarizing, 멤브레인 안쪽에 걸쳐 꾸준히 흐름을 수 있습니다. 라이트 노출은 CNG 채널, 블록 안쪽 양이온 전류 흐름, 따라서 세포 hyperpolarization 결과의 폐쇄를 실행시킵니다. photoreceptors의 극성에 따라 흡입 녹음 방법은 고전적인 패치 - 클램프 기법과는 달리, 플라즈마 막을 관통 필요하지 않습니다, 1970 년대에 개발되었습니다<sup&gt; 1</sup&gt;. 세포외 솔루션으로 가득한 단단히 맞는 유리 피펫에 외부 세그먼트를 그리기 테스트 - 플래시 노출에 따라 각각의 세포에서 현재 변경 내용을 녹음하실 수 있습니다. 그러나,이 잘 구축 &quot;객관적인 세그먼트 인 (OS 인)&quot;흡입 녹음 때문에 마우스 망막의 원뿔의 낮은 비율 (3 %)과 원추형을 식별의 어려움, 마우스 콘 레코딩에 적합하지 않습니다 외부 세그먼트. 최근 내부 세그먼트 기능 (IS -)를 녹화 설정은 녹화 피펫으로 내부 세그먼트 / photoreceptor의 핵 영역을 그리기 위해 개발된<sup&gt; 2,3</sup&gt;. 이 비디오에서는, 우리는 단일 셀 흡입 전극을 사용하여 개별 마우스 콘 photoresponses에서 기록하는 방법을 보여줍니다.

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Single-cell Suction Recordings from Mouse Cone Photoreceptors

우리는 흡입 전극을 사용하여 단일 마우스 콘에서 플래시 응답을 기록하는 방법을 보여줍니다.

마우스 콘 Photoreceptors에서 단일 셀 석션 레코딩

Rod and cone photoreceptors in the retina are responsible for light detection. In darkness, cyclic nucleotide-gated (CNG) channels in the outer segment ...

Research

JoVE Journal

Biology

Methods for Patch Clamp Capacitance Recordings from the Calyx

칼리에서 패치 클램프 커패시턴스 레코딩을위한 방법

We demonstrate the basic techniques for presynaptic patch clamp recording at the calyx of Held, a mammalian central nervous system nerve terminal. ...

연구

생물학

Whole Cell Recordings from Brain of Adult Drosophila

성인 Drosophila의 머리에서 전체 셀 레코딩

In this video, we demonstrate the procedure for isolating whole brains from adult Drosophila in preparation for recording from single neurons. We begin by ...

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

gentleMACS Dissociator과 마우스 비장에서 단일 셀 Suspensions의 준비

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator

gentleMACS Dissociator를 사용하여 마우스 폐 조직에서 단일 셀 Suspensions의 표준화 준비

The preparation of single-cell suspensions from tissues is an important prerequisite for many experiments in cellular research. The process of ...

Generation of Single-Cell Suspensions from Mouse Neural Tissue

마우스 신경 조직에서 단일 셀 Suspensions의 생성

Within the nervous system, hundreds of neuronal and glial cell types have been described. Each specific cell type in the brain or spinal cord has a ...

Single Cell Transcriptional Profiling of Adult Mouse Cardiomyocytes

성인 마우스 Cardiomyocytes의 단세포 Transcriptional 프로파일

While numerous studies have examined gene expression changes from homogenates of heart tissue, this prevents studying the inherent stochastic variation ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

유도 만능의 줄기 세포에서 파생 마우스의 생성

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Isolation of Endothelial Cells from the Lumen of Mouse Carotid Arteries for Single-Cell Multi-Omics Experiments

단일 세포 다중 오믹스 실험을 위한 마우스 경동맥 내강에서 내피 세포 분리

Atherosclerosis is an inflammatory disease of the arterial regions exposed to disturbed blood flow (d-flow). D-flow regulates the expression of genes in ...

Isolation of Nuclei from Flash-Frozen Liver Tissue for Single-Cell Multiomics

단일 세포 다중오믹스를 위한 급속 동결 간 조직으로부터 핵 분리

The liver is a complex and heterogenous tissue responsible for carrying out many critical physiological functions, such as the maintenance of energy ...

Single-Cell Suspension Preparation from Nile Tilapia Intestine for Single-Cell Sequencing

Nile tilapia is one of the most commonly cultured freshwater fish species worldwide and is a widely used research model for aquaculture fish studies. The ...