Name: fabrication and operation of an oxygen insert for adherent cellular cultures
Uploaded: 2010-01-06T17:10:00
Duration: 11 min 56 s
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<p class="jove_content"> इस परियोजना को सार्वजनिक स्वास्थ्य के इलिनोइस विभाग और राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (DBI +०८,५२,४१६) द्वारा वित्त पोषित किया गया था. </p>

<p class="jove_content"> मानक photolithography SU 8, प्रतिकृति मोल्डिंग, और परिभाषित कताई और polydimethylsiloxane पूरी तरह से बनाया डिवाइस के द्वारा गढ़े है. गैस डिवाइस में पेश किया है microchannel स्तंभ और संस्कृति मीडिया के बीच एक एकाग्रता ढाल स्थापित, सिस्टम एक वांछित संतुलन ऑक्सीजन एकाग्रता की ओर ड्राइविंग. युक्ति को प्रभावी ढंग से एक अच्छी तरह से अंदर अस्थायी और स्थानिक oxygenation मिलाना, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से सेलुलर व्यवहार मिलाना उचित दिखाया गया है. oxygenation के स्थानिक patterning microchannel स्तंभ के आधार पर परिभाषित किया गया है, तो डिजाइन की एक किस्म photomask क्राफ्टिंग में लागू किया जा सकता है. इसके अतिरिक्त, वांछित गैस की अच्छी तरह से गैस चरण में जलसेक संतुलन समय और hypoxia की हद तक सुधार की उम्मीद है. एक microfluidic मिश्रण नेटवर्क डिवाइस के लिए अनुकूलित किया जा सकता है के लिए एक साधन प्रदान करने के लिए केवल कुछ स्टॉक गैस टैंक से उपन्यास गैस के मिश्रण का उत्पादन. अंत में, मीडिया के आदान प्रदान के लिए एक तंत्र डिवाइस के multiwell थाली, जो की कोशिकाओं को जवाब हो सकता है से हटाने के लिए की आवश्यकता को समाप्त होगा. </p><p class="jove_content"> युक्ति किसी में <em>इन विट्रो</em> या <em>पूर्व vivo</em> ऑक्सीजन एकाग्रता पर नियंत्रण की आवश्यकता <em>होती</em> है प्रयोग में आवेदन किया है. के रूप में ऑक्सीजन एक महत्वपूर्ण शारीरिक चर संकेत दे रास्ते की एक विशाल बहुमत को प्रभावित है, अनुसंधान के क्षेत्रों में है कि लाभ होगा शोधकर्ता की रचनात्मकता द्वारा सीमित है. कुछ क्षेत्रों है कि ऑक्सीजन एकाग्रता बढ़ाया अस्थायी नियंत्रण से लाभ होगा कैंसर मेटास्टेसिस, सो apnea, और कई अन्य लोगों के अलावा हृदय ischemia reperfusion चोट, शामिल हैं. उदाहरण के लिए, आंतरायिक hypoxia के अधिक आक्रामक कैंसर के साथ सहसंबद्ध किया गया है, metastastis जुड़े जीन की संख्या निरंतर hypoxia और normoxia के सापेक्ष upregulating. स्थानिक नियंत्रण भी महत्वपूर्ण है, के रूप में ऑक्सीजन gradients के विकास, जिगर zonation, दवा विषाक्तता, और स्टेम सेल आला में महत्वपूर्ण हैं. इस लेख में प्रस्तुत डिवाइस एक छोटे प्रयोगशाला पदचिह्न, अपेक्षाकृत सरल संचालन आवश्यकताओं, और ऑक्सीजन कोशिकाओं को जोखिम पर अभी तक अधिक से अधिक नियंत्रण के साथ एक प्रणाली प्रदान करके अनुसंधान के क्षेत्रों के एक संख्या में लाभ होगा. </p>

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>PDMS-Sylgard 184</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dow Corning</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Planar FOXY sensor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ocean Optics</td>
<td>FOXY-SGS-M</td>
<td>Coated microscope slide</td>
</tr>
<tr>
<td>Gas regulator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Omega</td>
<td>FL-1472-G</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gas</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Airgas</td>
<td>Custom mixes</td>
<td>All have 5% CO<sub>2</sub></td>
</tr>
<tr>
<td>SU-8 2150</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Microchem</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MDCK Growth Medium w/ L-Glutamine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>SAFC Biosciences</td>
<td>M3803</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ATCC</td>
<td>30-2020</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin-EDTA</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>T4049</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>L-Glutamine solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G7513</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

fabrication and operation of an oxygen insert for adherent cellular cultures 

<p class="jove_content">आक्सीजन कई सेलुलर रास्ते की एक महत्वपूर्ण न्यूनाधिक है, लेकिन मौजूदा उपकरणों की अनुमति<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; ऑक्सीजन मॉडुलन के लिए जैव चिकित्सा अनुसंधान की जरूरतों को पूरा करने में विफल. hypoxic कक्ष मानक संस्कृति वाहिकाओं में oxygenation को नियंत्रित करने के लिए एक सरल प्रणाली प्रदान करता है, लेकिन कोशिका की सतह पर ऑक्सीजन एकाग्रता पर सटीक अस्थायी और स्थानिक नियंत्रण का अभाव है, शारीरिक घटना के एक किस्म अध्ययन में अपने आवेदन को रोकने. Hypoxic कक्ष पर अन्य प्रणालियों में सुधार हुआ है, लेकिन विशेष ज्ञान और उनके संचालन के लिए उपकरणों की आवश्यकता होती है, औसत शोधकर्ता के लिए उन्हें डरा देता है. Multiwell प्लेटों के लिए एक microfabricated सम्मिलित करने के लिए और अधिक प्रभावी ढंग से बेहतर मॉडल शारीरिक पाया घटना को अस्थायी और स्थानिक ऑक्सीजन एकाग्रता को नियंत्रित करने के लिए विकसित किया गया है<em&gt; Vivo में</em&gt;. मंच polydimethylsiloxane डालने के होते हैं कि एक मानक multiwell थाली में घोंसले और एक गैस पारगम्य झिल्ली उद्देश्य के साथ एक निष्क्रिय microfluidic गैस नेटवर्क के रूप में कार्य करता है पक्षपाती कोशिकाओं को ऑक्सीजन प्रसव मिलाना. डिवाइस का उपयोग करने के लिए सरल है और गैस सिलेंडरों कि दबाव मंच में वांछित ऑक्सीजन एकाग्रता का परिचय प्रदान करने के लिए जुड़ा हुआ है. निर्माण मानक photolithography SU 8, प्रतिकृति मोल्डिंग, और परिभाषित PDMS एक सिलिकॉन वफ़र पर कताई का एक संयोजन शामिल है. डिवाइस के घटकों सतह हाथ से आयोजित एक प्लाज्मा प्रणाली का उपयोग कर उपचार के बाद बंधुआ हैं. मान्यकरण एक planar फ्लोरिसेंट ऑक्सीजन सेंसर के साथ पूरा किया है. संतुलन समय मिनट के आदेश पर है और ऑक्सीजन प्रोफाइल की एक विस्तृत विविधता चक्रीय इस अध्ययन में हासिल की प्रोफ़ाइल जैसे डिवाइस डिजाइन, और यहां तक ​​कि ऑक्सीजन gradients के आधार पर प्राप्त किया जा सकता है पाया उन नकल<em&gt; Vivo में</em&gt;. डिवाइस सेल संस्कृति के लिए निष्फल समारोह के नुकसान के बिना आम तरीकों का उपयोग किया जा सकता है. डिवाइस का अध्ययन करने के लिए प्रयोज्यता<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; घाव भरने प्रतिक्रिया का प्रदर्शन किया जाएगा.</p>

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Fabrication and Operation of an Oxygen Insert for Adherent Cellular Cultures

<p class="jove_content">और कि 6 अच्छी तरह से एक थाली में स्थानिक और लौकिक oxygenation से अधिक बढ़ाया नियंत्रण प्रदान करता है एक मंच पर जोड़ने के निर्माण की मान्यता. डिवाइस संस्कृति प्रणालियों के एक नंबर करने के लिए अनुकूल है और घाव भरने पर ऑक्सीजन के प्रभाव की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.</p>

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