Name: undecalcified bone preparation for histology, histomorphometry and fluorochrome analysis
Uploaded: 2010-01-08T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Undecalcified Bone Preparation for Histology, Histomorphometry and Fluorochrome Analysis at JoVE.com

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> فإن الكتاب أن نعترف بمساعدة السيدة سو كونيل لخبرتها في تضمين الراتنج ومقابر السيدة Stephania للخبرة مختبرها. فإن الكتاب أود أن أشكر الأستاذ الدكتور فرانك وKandziora Polboth ماري آن لنصائحهم. </p>

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يوضع النسيج في حاوية مغلقة تحتوي على الفوسفات بنسبة 10 ٪ مخزنة حل الفورمالين <sup>3.</sup> ضمان الحد الأدنى من التعرض للضوء ، وإذا كان التحليل هو ملون تألقي التي يتعين القيام بها ، كما fluorochromes خفيفة حساسة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد أي اتجاه من النسيج ستكو...

<ol>
	<li>Kerr, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Atlas of Functional Histology</em>. , 164-168 (2000).</li><li>Parfitt, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+histomorphometry:+standardization+of+nomenclature,+symbols,+and+units.+Report+of+the+ASBMR+Histomorphometry+Nomenclature+Committee.">Bone histomorphometry: standardization of nomenclature, symbols, and units. Report of the ASBMR Histomorphometry Nomenclature Committee.</a> <em style='font-style: italic'>J Bone Miner Res</em>. <b>2</b>, 595-610 (1987).</li><li>An, Y. H., Martin, K. l. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Handbook of histology methods for bone and cartilage</em>. , (2003).</li><li>Bancroft, J. D., Gamble, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Theory and Practice of Histological Techniques</em>. , 352-360 (2008).</li></ol>

<u>المذيبات :</u> <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التخزين المؤقت عادي 10 ٪ حمض الفورمالين ، والإيثانول ، والزيلين بيوتانول <br /> جميع الرتب الأنسجة ، حرر الكبريت. <br /> Grale العلمية بي تي واي المحدودة <br /> http://www.grale.com.au </li></ul> <u>قوالب :</u> <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قشر بعيدا ، والقوالب البلاستيكية <br /> Grale العلمية </li></ul> <u>الشرائح :</u> <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مجهر شرائح SUPERFROST PLUS <br /> ومب العلمية بي تي واي المحدودة <br /> <a href="http://www.lomb.com.au/">http://www.lomb.com.au</a> </li></ul> <u>الراتنج :</u> <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Technovit GlycolMethacrylate 7100 <br /> هيراوس Kulzer <br /> <a href="http://www.kulzer-technik.de/168/Products/Histology/Technovit_7100.htm">http://www.kulzer-technik.de/168/Products/Histology/Technovit_7100.htm</a> </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دعم كتلة صمغية - Technovit كتلة Histo 3040 <br /> هيراوس Kulzer </li></ul> <u>بقع</u> <br /> <span>(الكواشف من العلم Grale)</span> <p style=";text-align:right;direction:rtl"> ثلاثي الألوان Goldner وصمة عار </li><p style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl"> 1. Weigert من حديد hemotoxylin (DeGroat) </p><table style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" border="0"><tr><td colspan="2" style="font-weight:bold;"> أ) حل Hemotoxylin </td></tr><tr><td> Hemotoxylin </td><td> 1G </td></tr><tr><td> الكحول المطلق </td><td> 100ML </td></tr><tr><td colspan="2"  style="font-weight:bold;"> ب) الحديد الحل </td></tr><tr><td> 30 ٪ كلوريد الحديديك المائي </td><td> 4mL </td></tr><tr><td> حمض الهيدروكلوريك (تركيز) </td><td> 1mL </td></tr><tr><td> الماء المقطر </td><td> 95mL </td></tr></table><p style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" > تمت تصفيتها ، وأضاف إلى حجم مساو من hemotoxylin تستخدم من قبل على الفور وصمة عار. </p><p style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" > 2. الشقائقية - فوكسين - azophloxin الأسهم حلول </p><table style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" border="0"><tr><td colspan="2"  style="font-weight:bold;"> أ) حل الشقائقية دي زايليدين </td></tr><tr><td> الشقائقية دي زايليدين </td><td> 0.75g </td></tr><tr><td> حمض fuchsion </td><td> 0.25g </td></tr><tr><td> حمض الخليك </td><td> 1mL </td></tr><tr><td colspan="2"> المزيج ، وإضافة الماء المقطر (100ML) </td></tr><tr><td colspan="2"  style="font-weight:bold;"> ب) حل azophloxin </td></tr><tr><td> Azophloxin </td><td> 0.5g </td></tr><tr><td> حامض الخليك </td><td> 0.6mL </td></tr><tr><td colspan="2"> المزيج ، وإضافة الماء المقطر (100ML) </td></tr><tr><td colspan="2"  style="font-weight:bold;"> ج) العمل النهائية حل صمة عار </td></tr><tr><td> الشقائقية - فوكسين الحل </td><td> 5 - 10ML </td></tr><tr><td> Azophloxin </td><td> 2mL </td></tr><tr><td> 0.2 ٪ محلول حمض الخليك </td><td> 88mL </td></tr></table><p style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl"> 3. ضوء أخضر الحل </p><table style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" border="0"><tr><td> الضوء الأخضر </td><td> 1G </td></tr><tr><td> حامض الخليك </td><td> 1mL </td></tr><tr><td colspan="2"> المزيج ، وإضافة الماء المقطر (500mL) </td></tr></table><p style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl"> 4. Phophomolybdic حل G حمض البرتقال </p><table style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" border="0"><tr><td> حمض الفسفومولبديك </td><td> 3G </td></tr><tr><td> البرتقالي G </td><td> 2G </td></tr><tr><td colspan="2"> تذوب في الماء المقطر 500ml من الثيمول وإضافة الكريستال. </td></tr></table><p style=";text-align:right;direction:rtl"> فون كوسا اللطخة </p><table style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" border="0"><tr><td> مائي 1 ٪ نترات الفضة </td></tr><tr><td> ثيوسلفات الصوديوم 2.5 ٪ </td></tr><tr><td> 1 ٪ safranin O </td></tr></table><p style=";text-align:right;direction:rtl"> زرقة الألسيان صمة عار </p><table style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" border="0"><tr><td> زرقة الألسيان 8GX </td><td> 1G </td></tr><tr><td> 3 ٪ من محلول حمض الخليك </td><td> 100ML </td></tr></table><p style=";text-align:right;direction:rtl"> وصمة عار Hemotoxylin يوزين </p><table style="margin-left:40px;;text-align:right;direction:rtl" border="0"><tr><td colspan="2"  style="font-weight:bold;"> أ) هاريس hemotoxylin </td></tr><tr><td> Hemotoxylin </td><td> 2.5G </td></tr><tr><td> كحول مطلق </td><td> 25mL </td></tr><tr><td> البوتاسيوم الشب </td><td> 50G </td></tr><tr><td> الماء المقطر </td><td> 500mL </td></tr><tr><td> أكسيد الزئبق </td><td> 1.25g OR </td></tr><tr><td> يودات الصوديوم </td><td> 0.5g </td></tr><tr><td> الجليدية حمض الخليك </td><td> 20mL </td></tr><tr><td colspan="2"  style="font-weight:bold;"> ب) حل يوزين </td></tr><tr><td colspan="2"> وقد استخدم يوزين المنتجة تجاريا. </td></tr></table><p style=";text-align:right;direction:rtl"> كل مساحيق صبغ هي وصمة عار Gurr مساحيق صباغة. <br /> كل الكواشف والكواشف التحليلية ، وليس الكواشف المخبرية </p><p style=";text-align:right;direction:rtl"> <u>Fluorochromes</u> </p><table border="1" cellspacing="0" cellpadding="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tr><td><br /> الصانع </td><td> ملون تألقي </td><td> رقم كتالوج </td></tr><tr><td> سيغما الدريخ ، سيدني </td><td> Calcein الخضراء </td><td> C0875 </td></tr><tr><td> سيغما الدريخ ، سيدني </td><td> الأليزارين Complexone </td><td> A3882 </td></tr><tr><td> إنترفيت استراليا وفيكتوريا </td><td> أكسي تتراسكلين <br /> (قبالة الجرف المخدرات المضادة للميكروبات) </td><td> الاسم التجاري ؛ Engemycin 100 </td></tr></table>

undecalcified bone preparation for histology, histomorphometry and fluorochrome analysis

<p style=";text-align:right;direction:rtl"> Undecalcified الأنسجة العظمية يوضح الهيكل الصغير للعظم. ويعرض كل من المكونات المعدنية للعظم والخلوية ، التي توفر معلومات حيوية عن دوران العظم أو تكوين العظام وارتشاف. هذا له أهمية كبيرة في مجموعة متنوعة من التطبيقات السريرية والبحوث. أنها تعود الصور الجميلة <sup>(1)</sup> ويسمح لتقنيات مثل تقييم ملون تألقي وhistomorphometry <sup>2.</sup> ملون تألقي التحليل هو تقنية حيث يتم حقن الأصباغ الفلورية التي تربط إلى الكالسيوم في نقطة زمنية معينة ، والذي يسمح لتقدير حجم كمية تمعدن في ذلك الوقت بعينه. Histomorphometry هو عملية تقدير العظام على المستوى المجهري. </p><p style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء undecalcified الأنسجة العظمية يمثل تحديا تقنيا ، لا سيما مع عينات كبيرة الحجم. فهي تتطلب تغييرات في أسلوب من تلك المستخدمة في البارافين القياسية جزءا لا يتجزأ من الأنسجة. هذا الفيديو يوضح عملية إنتاج المقاطع ذات نوعية جيدة ويدل على الصعوبات التقنية والأساليب التي للتغلب عليها. وتتحقق إعداد العينات ، وتجهيز مع تثبيت بطريقة مماثلة لغيرها من الأنسجة اللينة ، ولكن نظرا لكثافة وأقل نفاذية للعظم كبير تعد مطلوبة تثبيت وتجهيز مرات ، مع الأخذ في كثير من الأحيان عدة أسابيع. ويتم تحقيق دمج باستخدام وسيلة دعم مماثل مع صلابة وكثافة أو يساوي حتى العظم مثل ميتاكريليت مقرها راتنجات ، ولكن خلافا تسلل البارافين والتضمين ، وهذا هو خطوة لا رجعة فيها. لا يمكن أن يتحقق عن طريق طحن Sectioning التي تنتج أكثر سمكا المقطع ، الذي هو الأمثل لمثل هذه الدراسات والتحليل ملون تألقي. هو أفضل طريقة لتحقيق ذلك باستخدام شفرة الماس على macrotome. بدلا من ذلك ، يمكن أن تنتج أرق أقسام للالمجهر الضوئي ويتحقق هذا باستخدام مشراح تمزلج بشفرة حادة جدا. ومشراح تمزلج يوفر قوة إضافية والاستقرار المطلوبة لكتل ​​كبيرة وصعبة. يمكن أن تكون جزءا لا يتجزأ من المقاطع ملون الراتنج مع مجموعة متنوعة من البقع ، والتي أظهرت. </p>

Watch this Scientific Journal Video about Undecalcified Bone Preparation for Histology, Histomorphometry and Fluorochrome Analysis at JoVE.com

Undecalcified Bone Preparation for Histology, Histomorphometry and Fluorochrome Analysis

<p class="jove_content">Undecalcified الأنسجة العظام يوفر معلومات هامة لمجموعة متنوعة من التطبيقات السريرية والبحوث. فإنه يمثل تحديا تقنيا ، لا سيما مع عينات كبيرة الحجم. هذا الفيديو يوضح عملية إنتاج المقاطع ذات نوعية جيدة ويدل على الصعوبات التقنية والأساليب التي للتغلب عليها.</p>

Undecalcified العظام لإعداد الأنسجة ، وتحليل Histomorphometry ملون تألقي

Undecalcified bone histology demonstrates the micro-architecture of bone. It shows both the mineralised and cellular components of bone, which provides ...

Research

JoVE Journal

Biology

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

التحضير لزراعة الخلايا المكونة للدم الابتدائية من نخاع عظام الفئران لElectroporation

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

A Neuronal and Astrocyte Co-Culture Assay for High Content Analysis of Neurotoxicity

والخلايا العصبية ونجمية المشارك الثقافة الفحص لتحليل محتوى عال من العصبية

High Content Analysis (HCA) assays combine cells and detection reagents with automated imaging and powerful image analysis algorithms, allowing ...

Preparation of Adult <em>Drosophila</em> Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

إعداد الكبار<em> ذبابة الفاكهة</em> لعيون Sectioning رقيقة والتحليل المجهري

Drosophila has long been used as model system to study development, mainly due to the ease with which it is genetically tractable. Over the years, a ...

RNA <em>In situ</em> Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين في الأجنة جبل الجامعة وعلم الأنسجة الخلية مقتبس عن Elasmobranchs البحرية

Marine  elasmobranchs are valued animal models for biomedical and genomic studies as  they are the most primitive vertebrates to have adaptive immunity ...

Bone Conditioned Medium: Preparation and Bioassay

العظام مكيفة المتوسطة: إعداد والأحيائي

Autologous bone grafts are widely used in oral and maxillofacial surgery, orthopedics, and traumatology. Autologous bone grafts not only replace missing ...

Sample Preparation for Mass Cytometry Analysis

إعداد نموذج لتحليل قداس الخلوي

Mass cytometry utilizes antibodies conjugated with heavy metal labels, an approach that has greatly increased the number of parameters and opportunities ...

An Alternative Approach for Sample Preparation with Low Cell Number for TEM Analysis

طريقة بديلة لإعداد نموذج مع انخفاض عدد الخلايا لتحليل تيم

Transmission electron microscopy (TEM) provides details of the cellular organization and ultrastructure. However, TEM analysis of rare cell populations, ...

A Sectioning, Coring, and Image Processing Guide for High-Throughput Cortical Bone Sample Procurement and Analysis for Synchrotron Micro-CT

قسم، Coring، ودليل معالجة الصور لارتفاع الإنتاجية اختبار العظام كورتيكية الشراء وتحليل لSynchrotron الدقيقة CT

Bone is a dynamic and mechanically active tissue that changes in structure over the human lifespan. The products of the bone remodeling process have been ...

Tissue Collection and RNA Extraction from the Human Osteoarthritic Knee Joint

جمع الأنسجة واستخراج الحمض النووي الريبي من مفصل الركبة هشاشة العظام البشرية

Osteoarthritis (OA) is a chronic and degenerative joint disease most often affecting the knee. As there is currently no cure, total knee arthroplasty ...

Using Real-Time Cell Metabolic Flux Analyzer to Monitor Osteoblast Bioenergetics

استخدام محلل التدفق الأيضي للخلايا في الوقت الفعلي لمراقبة الطاقة الحيوية لمنطقة العظام

Bone formation by osteoblasts is an essential process for proper bone acquisition and bone turnover to maintain skeletal homeostasis, and ultimately, ...