Name: a reversible, non-invasive method for airway resistance measurements and bronchoalveolar lavage fluid sampling in mice
Uploaded: 2010-04-13T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice at JoVE.com

Nous remercions le Dr W. Mintzer pour la suggestion de réaliser à fibre optique intubation orotrachéale. Soutenue par des subventions U19AI070973, R01AI057696, K02HL75243 et R01HL082487 de la National Institutes of Health.

Provocation allergénique: <ol><li> Souris C57BL / 6, 4-8 semaines d&#39;âge, sont anesthésiés dans une chambre en plexiglas étanche à l&#39;air purgé avec un isoflurane 3,2% en vapeur d&#39;oxygène mélange pendant 10 minutes pour atteindre profonde anesthésie générale. </li><li> Défis allergènes par voie intranasale (45μL OVA (22,5 mg) et 7μL A. oryzae (7 mg) dans du PBS) sont administrés, chaque mardi, jeudi et dimanche, pour un total de sept demandes consécutives. </li></ol> A...

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	<li>Hamelmann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+airway+responsiveness+in+allergic+mice+using+barometric+plethysmography.">Noninvasive measurement of airway responsiveness in allergic mice using barometric plethysmography.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 156, 766-775 (1997).</li><li>Adler, A., Cieslewicz, G., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unrestrained+plethysmography+is+an+unreliable+measure+of+airway+responsiveness+in+BALB/c+and+C57BL/6+mice.">Unrestrained plethysmography is an unreliable measure of airway responsiveness in BALB/c and C57BL/6 mice.</a> J. Appl. Physiol. 97, 286-292 (2004).</li><li>Bates, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+and+misuse+of+penh+in+animal+models+of+lung+disease.">The use and misuse of penh in animal models of lung disease.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 31, 373-374 (2004).</li><li>Lundblad, L. K., Irvin, C. G., Adler, A., Bates, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reevaluation+of+the+validity+of+unrestrained+plethysmography+in+mice.">A reevaluation of the validity of unrestrained plethysmography in mice.</a> J. Appl. Physiol. 93, 1198-1207 (2002).</li><li>Grunig, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+for+IL-13+independently+of+IL-4+in+experimental+asthma.">Requirement for IL-13 independently of IL-4 in experimental asthma.</a> Science. 282, 2261-2263 (1998).</li><li>Corry, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirements+for+allergen-induced+airway+hyperreactivity+in+T+and+B+cell-deficient+mice.">Requirements for allergen-induced airway hyperreactivity in T and B cell-deficient mice.</a> Mol. Med. 4, 344-355 (1998).</li><li>Corry, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin+4,+but+not+interleukin+5+or+eosinophils,+is+required+in+a+murine+model+of+acute+airway+hyperreactivity.">Interleukin 4, but not interleukin 5 or eosinophils, is required in a murine model of acute airway hyperreactivity.</a> J. Exp. Med. 183, 109-117 (1996).</li><li>Amdur, M. O., Mead, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+respiration+in+unanesthetized+guinea+pigs.">Mechanics of respiration in unanesthetized guinea pigs.</a> Am J Physiol. 192, 364-368 (1958).</li></ol>

L&#39;étude de l&#39;asthme, et diverses autres maladies obstructives des voies aériennes, constitue un domaine actif et croissant de la recherche biomédicale. Une composante importante de l&#39;asthme lié à la recherche expérimentale est la capacité à mesurer les variations de taille des voies aériennes dans des conditions variables. Rétrécissement des voies respiratoires excessive en réponse au défi provocateur, une fonction canonique de l&#39;asthme et des maladies pulmonaires liées à une propriété e...

Airway physiologie logiciel de mesure (Rescomp) a été spécialement préparé (Millenium Premier Group, 415-519-4371). Les données ont été analysées à l&#39;aide d&#39;un poste de travail PC sous Windows XP équipé d&#39;un processeur Pentium III (Intel, Inc Santa Clara, CA) et une analogique 17 broches pour signal numérique convertisseur (National Instruments, # PC-LPM16). Un petit animal voies respiratoires physiologie poste de travail a été spécialement assemblé (Millenium Premier Group) à l&#39;aide des capteurs de pression disponibles dans le commerce (pièce n ° TRD5700 et TRD4510), des modules de préampli (pièce n ° MAX2270), le châssis (n ° de pièce MAX1320, le tout à partir Buxco, Inc Wilmington, Caroline du Nord ) et un pléthysmographe animaux personnalisée de petite taille. 0,5 mm de diamètre externe de fibre optique fil, connecté à une source de lumière (Cole Palmer Illuminateur, 41722 séries) Ventilateur (Harvard Apparatus Souris Ventilateur, # 687) 10 mm, aiguille 27ga (BD Biosciences, cat. No. 309602) Lampe chauffante 1 ml seringue (BD Biosciences, cat. No. 305109) 4 pinces (pince poney printemps 3200) <br/&gt; 0,5 mm fil externe pour le guide de l&#39;intubation Hémacytomètre Lames de microscope Superfrost / plus (chat Fisher. No. 12-550-15) Shandon Filtre Cartes (Thermo chat. No. 5991022) Coulissant cellule différentielle tache (chat Fisher. No. 122911) Microscope optique (Leica) Cytospin 3 (Shandon) 20 ga, 1,25 pouces, cathéters intraveineux PROTECTIV (Smith médicale) 0,5 mm en fibre optique polymère (Edmund Optics # NT02-532). <!-- OLD Materials List 4/12/10 Changed
 Airway physiologie logiciel de mesure (Rescomp) a été spécialement préparé (Millenium Premier Group, 415-519-4371) et les données ont été analysées à l&#39;aide d&#39;un poste de travail PC sous Windows XP équipé d&#39;un processeur Pentium III (Intel, Inc Santa Clara, CA) et une 17-broches analogique en signal numérique (National Instruments, # PC-LPM16). Petit animal voies respiratoires physiologie poste de travail a été spécialement assemblé (Millenium Premier Group) à l&#39;aide des capteurs de pression disponibles dans le commerce (pièce n ° TRD5700 et TRD4510), préampli modules (n ° de pièce MAX2270) et le châssis (n ° de pièce MAX1320, le tout à partir Buxco, Inc Wilmington, Caroline du Nord) et un pléthysmographe animaux personnalisée de petite taille. 0,5 mm de diamètre externe de fibre optique fil, connecté à une source de lumière (Cole Palmer Illuminateur, 41722 séries); Ventilateur (Harvard Apparatus Souris Ventilateur, # 687), 10 mm, aiguille 27ga (BD Biosciences, cat no 309602..); Chaleur lampe; 1 ml seringue (BD Biosciences, cat no 305109..); 4 pinces (pince poney printemps 3200), 0,5 mm fil externe pour le guide de l&#39;intubation); hémacytomètre; Superfrost / lames de microscope plus (chat Fisher aucune 12-550.. -15); Shandon Filtre Cartes (cat Thermo pas 5.991.022);.. coulissant cellule différentielle tache (chat Fisher aucune 122,911);.. microscope optique (Leica); Cytospin 3 (Shandon), 20 ga, 1,25 pouces, cathéters intraveineux (PROTECTIV Smith médical); 0,5 mm fibre optique polymère (Edmund Optics # NT02-532). -&gt;

a reversible, non-invasive method for airway resistance measurements and bronchoalveolar lavage fluid sampling in mice

Airway hyperréactivité (PA) des mesures et des broncho-échantillonnage liquide de lavage (BAL) sont essentielles pour les modèles expérimentaux d&#39;asthme, mais les procédures maintes reprises d&#39;obtenir de telles mesures dans le même animal ne sont généralement pas faisable. Ici, nous démontrons protocoles pour l&#39;obtention de souris mesures répétées de la procréation assistée et broncho-liquide de lavage. Les souris ont été contestées par voie intranasale sept fois plus de 14 jours avec un allergène puissant ou fictive traitée. Avant le premier défi, et dans les 24 heures suivant chaque épreuve intranasale, les mêmes animaux ont été anesthésiés, intubés par voie orale et ventilés mécaniquement. Procréation assistée, évaluée en comparant les courbes dose-réponse de la résistance du système respiratoire (RRS) induite par l&#39;augmentation des doses intraveineuses de l&#39;acétylcholine (Ach) de chlorure entre imposture et allergènes animaux contestées, ont été déterminés. Par la suite, et par la même l&#39;intubation, le poumon gauche a été un lavage de sorte que le dénombrement différentiel des cellules des voies respiratoires peut être effectuée. CesDes études révèlent que des mesures répétées de la procréation assistée et la collecte de liquide de LBA sont possibles à partir des mêmes animaux et que l&#39;hyperréactivité bronchique maximale et éosinophilie des voies aériennes sont atteintes dans les 7-10 jours suivant le début du test de provocation. Cette nouvelle technique permet de réduire de façon significative le nombre de souris nécessaires à l&#39;expérimentation longitudinale et est applicable à diverses espèces de rongeurs, des modèles de maladies des voies respiratoires et des instruments de physiologie.

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A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

Des mesures répétées de la physiologie respiratoire rongeurs et prélèvement de cellules inflammatoires des voies respiratoires sont souhaitables, mais généralement pas possible. Nous décrivons ici une méthode reproductible pour intubation par voie orale souris qui permet des mesures répétées de l&#39;hyperréactivité des voies aériennes et prélèvement de cellules inflammatoires des voies aériennes.

Une réversible, méthode non-invasive pour les mesures de résistance des voies aériennes et d&#39;échantillonnage du liquide de lavage broncho-alvéolaire chez des souris

Airway hyperreactivity (AHR) measurements and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid sampling are essential to experimental asthma models, but repeated ...

Research

JoVE Journal

Biology

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyroséquençage: une méthode simple pour le génotypage précis

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

Recherche

Biologie

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

Étiquetage CSEh et hMSCs d&#39;oxyde de fer nanoparticules pour les non-invasives dans le suivi in ​​vivo avec IRM

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

Étiquetage des cellules souches avec des colorants fluorescents pour les non-invasive de détection avec l&#39;imagerie optique

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Seawater Sampling and Collection

L&#39;échantillonnage d&#39;eau de mer et de Collection

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

A 3D System for Culturing Human Articular Chondrocytes in Synovial Fluid

Un système 3D pour les chondrocytes articulaires humains Culture dans le liquide synovial

Cartilage destruction is a central pathological feature of osteoarthritis, a leading cause of disability in the US. Cartilage in the adult does not ...

Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification

De procéder au lavage vaginal, coloration au cristal violet et l&#39;évaluation cytologique vaginal pour Souris cycle œstral Staging identification

A rapid means of assessing reproductive status in rodents is useful not only in the study of reproductive dysfunction but is also required for the ...

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

Ex méthode in vivo pour l&#39;imagerie haute résolution de la motilité Cilia dans Rongeur épithélium des voies respiratoires

An ex vivo technique for imaging mouse airway epithelia for quantitative  analysis of motile cilia function important for insight into mucociliary  ...

Functional Reconstitution and Channel Activity Measurements of Purified Wildtype and Mutant CFTR Protein

Reconstitution fonctionnelle et Activité du Chan mesures de type sauvage purifiée et Mutant protéine CFTR

The Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) is a unique channel-forming member of the ATP Binding Cassette (ABC) superfamily of ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

Fecal glucocorticoïdes Analyse: Surveillance surrénale non invasive en Equidés

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

Filtration Isolation of Nucleic Acids:  A Simple and Rapid DNA Extraction Method

Filtration Isolement des acides nucléiques: Une méthode d&#39;extraction de l&#39;ADN simple et rapide

FINA, filtration isolation of nucleic acids, is a novel extraction method which utilizes vertical filtration via a separation membrane and absorbent pad ...