Name: a reversible, non-invasive method for airway resistance measurements and bronchoalveolar lavage fluid sampling in mice
Uploaded: 2010-04-13T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice at JoVE.com

אנו מודים לד&quot;ר וו מינצר על ההצעה לבצע אינטובציה orotracheal סיב אופטי. U19AI070973 נתמך על ידי מענקים, R01AI057696, K02HL75243 ו R01HL082487 מן המכונים הלאומיים לבריאות.

אלרגן אתגר: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> C57BL / 6 עכברים, 4-8 שבועות של גיל, מורדמים בתא פרספקס אטום מטוהר עם 3.2% isoflurane בתערובת אדי חמצן במשך 10 דקות כדי להשיג הרדמה כללית עמוקה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתגרים אלרגן Intranasal (45μL OVA (22.5 מיקרוגרם) ו 7μL א Oryzae (...

<ol>
	<li>Hamelmann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+airway+responsiveness+in+allergic+mice+using+barometric+plethysmography.">Noninvasive measurement of airway responsiveness in allergic mice using barometric plethysmography.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 156, 766-775 (1997).</li><li>Adler, A., Cieslewicz, G., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unrestrained+plethysmography+is+an+unreliable+measure+of+airway+responsiveness+in+BALB/c+and+C57BL/6+mice.">Unrestrained plethysmography is an unreliable measure of airway responsiveness in BALB/c and C57BL/6 mice.</a> J. Appl. Physiol. 97, 286-292 (2004).</li><li>Bates, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+and+misuse+of+penh+in+animal+models+of+lung+disease.">The use and misuse of penh in animal models of lung disease.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 31, 373-374 (2004).</li><li>Lundblad, L. K., Irvin, C. G., Adler, A., Bates, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reevaluation+of+the+validity+of+unrestrained+plethysmography+in+mice.">A reevaluation of the validity of unrestrained plethysmography in mice.</a> J. Appl. Physiol. 93, 1198-1207 (2002).</li><li>Grunig, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+for+IL-13+independently+of+IL-4+in+experimental+asthma.">Requirement for IL-13 independently of IL-4 in experimental asthma.</a> Science. 282, 2261-2263 (1998).</li><li>Corry, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirements+for+allergen-induced+airway+hyperreactivity+in+T+and+B+cell-deficient+mice.">Requirements for allergen-induced airway hyperreactivity in T and B cell-deficient mice.</a> Mol. Med. 4, 344-355 (1998).</li><li>Corry, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin+4,+but+not+interleukin+5+or+eosinophils,+is+required+in+a+murine+model+of+acute+airway+hyperreactivity.">Interleukin 4, but not interleukin 5 or eosinophils, is required in a murine model of acute airway hyperreactivity.</a> J. Exp. Med. 183, 109-117 (1996).</li><li>Amdur, M. O., Mead, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+respiration+in+unanesthetized+guinea+pigs.">Mechanics of respiration in unanesthetized guinea pigs.</a> Am J Physiol. 192, 364-368 (1958).</li></ol>

המחקר של אסטמה, מחלות שונות אחרות חסימתית בדרכי הנשימה, מהווה שדה פעיל והרחבת של מחקר ביו. מרכיב חשוב של מחקר אסטמה הקשורות ניסיוני הוא היכולת למדוד שינויים בגודל דרכי הנשימה בתנאים משתנים. היצרות דרכי הנשימה מוגזמת בתגובה אתגר פרובוקטיבי, תכונה הקנוני של אסטמה, מחלו...

Airway הפיזיולוגיה מדידה תוכנה (Rescomp) היה מוכן אישית (Millennium פרמייר קבוצה: 415-519-4371). הנתונים נותחו באמצעות תחנת PC מערכת הפעלה Windows XP מצויד עם מעבד Pentium III (Intel, Inc בסנטה קלרה, קליפורניה) ו אנלוגי 17 פינים ל אות ממיר דיגיטלי (National Instruments, # PC-LPM16). חיה קטנה בדרכי האוויר תחנת הפיזיולוגיה הורכב אישית (Millennium פרמייר קבוצה) באמצעות מתמרים ללחץ זמינים מסחרית (חלק # TRD5700 TRD4510 ו), מודולים preamp (חלק # MAX2270), מארז (חלק # MAX1320, כל מן Buxco, Inc בווילמינגטון, צפון קרוליינה ) ו plethysmograph אישית חיה קטנה. 0.5mm קוטר חיצוני סיבים אופטיים חוט, מחובר למקור האור (הפנס קול פאלמר, 41722 סדרה) מאוורר (הרווארד Apparatus עכבר מאוורר, # 687) 10 מ&quot;מ, מחט 27ga (BD Biosciences, חתול. לא. 309602) מחממים מנורה 1 מ&quot;ל במזרק (BD Biosciences, חתול. לא. 305109) מהדק 4 (פוני 3200 מהדק קפיץ) חוט 0.5 מ&quot;מ חיצוני עבור מדריך אינטובציה Hemacytometer Superfrost / פלוס מיקרוסקופ שקופיות (חתול פישר. לא. 12-550-15) Shandon סינון כרטיסים (Thermo חתול. לא. 5991022) תא שקופיות דיפרנציאלי כתם (חתול פישר. לא. 122911) מיקרוסקופ אור (לייקה) Cytospin 3 (Shandon) 20 ga, 1.25 אינטש ProtectIV קטטר תוך ורידי (סמית רפואי) 0.5 מ&quot;מ פולימר סיב אופטי (אדמונד אופטיקה # NT02-532).

a reversible, non-invasive method for airway resistance measurements and bronchoalveolar lavage fluid sampling in mice

Airway (AHR) hyperreactivity מדידות שטיפה ברונכואלוואולרית (BAL) דגימת נוזל חיוניים מודלים ניסיוניים אסטמה, אך הליכים חוזרים ונשנים להשיג מדידות כאלה החיה אותו הם בדרך כלל לא ריאלי. הנה, אנחנו מדגימים פרוטוקולים לקבלת מעכברים מדידות חוזרות של AHR ו ברונכואלוואולרית דגימות נוזל שטיפה. עכברים היו תיגר intranasally שבע פעמים מעל 14 ימים עם אלרגן חזק או טיפול דמה. לפני האתגר הראשוני, ותוך 24 שעות לאחר כל אתגר intranasal, החיות באותו היו מורדמים, מחובר לצינורות בעל פה מאוורר מכאני. AHR, שהוערכו על ידי השוואת עקומות מינון תגובה של התנגדות מערכת הנשימה (RRS) הנגרמת על ידי הגדלת מינון תוך ורידי של כלוריד אצטילכולין (אח) בין זיוף ו-אלרגן תיגר בעלי חיים, היו נחושים. לאחר מכן, ובאמצעות אינטובציה זאת, הריאה השמאלית lavaged כך ההפרש ספירה של תאים בדרכי הנשימה יכול להתבצע. מחקרים אלה מראים כי מדידות חוזרות של AHR ואיסוף נוזל BAL אפשריים מן החיות באותה הנשימה כי hyperresponsiveness מירבית דרכי הנשימה eosinophilia מושגות תוך 7-10 ימים של ייזום אתגר אלרגן. טכניקה חדשנית זו מפחיתה באופן משמעותי את מספר העכברים הנדרש לניסויים האורך הוא ישים מינים מכרסמים שונים, מודלים מחלות דרכי הנשימה מכשירים הפיזיולוגיה.

Watch this Scientific Journal Video about A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice at JoVE.com

A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

מדידות חוזרות של הפיזיולוגיה מכרסם הנשימה דגימה של תאים דלקתיים בדרכי האוויר רצויות, אבל בדרך כלל לא ריאלי. כאן אנו מתארים את שיטת הדיר עבור בעל פה intubating עכברים המאפשר מדידות חוזרות של דרכי הנשימה ואת hyperreactivity דגימה של תאים דלקתיים בדרכי האוויר.

הפיך, לא פולשני שיטת ההתנגדות מדידות דרכי הנשימה ואת נוזל שטיפה ברונכואלוואולרית דגימה של עכברים

Airway hyperreactivity (AHR) measurements and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid sampling are essential to experimental asthma models, but repeated ...

Research

JoVE Journal

Biology

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyrosequencing: שיטה פשוטה genotyping מדויק

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

תיוג hESCs ו hMSCs עם ברזל אוקסיד חלקיקים עבור פולשני של מעקב vivo עם MR Imaging

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

תיוג בתאי גזע עם צבעי ניאון על איתור פולשני עם דימות אופטי

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Seawater Sampling and Collection

מי ים דגימה אוסף

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

A 3D System for Culturing Human Articular Chondrocytes in Synovial Fluid

מערכת 3D עבור chondrocytes culturing האדם במפרק של נוזל סינוביאלי

Cartilage destruction is a central pathological feature of osteoarthritis, a leading cause of disability in the US. Cartilage in the adult does not ...

Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification

ביצוע שטיפת נרתיק, כתמים ויולטו קריסטל, והערכת ציטולוגית נרתיק לאחסון זמני מחזור הייחום חולל זיהוי עכבר

A rapid means of assessing reproductive status in rodents is useful not only in the study of reproductive dysfunction but is also required for the ...

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

שיטת vivo לשעבר להדמיה ברזולוציה גבוהה של תנועתיות צילה במכרסמי Airway epithelia

An ex vivo technique for imaging mouse airway epithelia for quantitative  analysis of motile cilia function important for insight into mucociliary  ...

Functional Reconstitution and Channel Activity Measurements of Purified Wildtype and Mutant CFTR Protein

מדידות הכינון פונקציונלי ופעילות הערוץ של מטוהרים wildtype וחלבון CFTR Mutant

The Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) is a unique channel-forming member of the ATP Binding Cassette (ABC) superfamily of ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

ניתוח Glucocorticoid צואה: לא פולשני ניטור הכליה ב Equids

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

Filtration Isolation of Nucleic Acids:  A Simple and Rapid DNA Extraction Method

בידוד סינון של חומצות גרעין: שיטת הפקת DNA פשוטה ומהירה

FINA, filtration isolation of nucleic acids, is a novel extraction method which utilizes vertical filtration via a separation membrane and absorbent pad ...