Name: a reversible, non-invasive method for airway resistance measurements and bronchoalveolar lavage fluid sampling in mice
Uploaded: 2010-04-13T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice at JoVE.com

Vi tackar Dr W. Mintzer för förslaget att utföra fiberoptiska orotracheal intubering. Finansierats med bidrag U19AI070973, R01AI057696, K02HL75243 och R01HL082487 från National Institutes of Health.

Allergen utmaning: <ol><li> C57BL / 6 möss, 4-8 veckors ålder, bedövas i en lufttät plexiglas kammare fylls sedan med en 3,2% isofluran i syre ånga blandningen i 10 minuter för att nå fullständig bedövning. </li><li> Intranasal allergen utmaningar (45μL OVA (22,5 mikrogram) och 7μL A. oryzae (7 mikrogram) i PBS) administreras, varje tisdag, torsdag och söndag, för totalt sju på varandra följande program. </li></ol> Anestesi: <ol start="3"><li> Inför varje allergen utmaning, oc...

<ol>
	<li>Hamelmann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+airway+responsiveness+in+allergic+mice+using+barometric+plethysmography.">Noninvasive measurement of airway responsiveness in allergic mice using barometric plethysmography.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 156, 766-775 (1997).</li><li>Adler, A., Cieslewicz, G., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unrestrained+plethysmography+is+an+unreliable+measure+of+airway+responsiveness+in+BALB/c+and+C57BL/6+mice.">Unrestrained plethysmography is an unreliable measure of airway responsiveness in BALB/c and C57BL/6 mice.</a> J. Appl. Physiol. 97, 286-292 (2004).</li><li>Bates, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+and+misuse+of+penh+in+animal+models+of+lung+disease.">The use and misuse of penh in animal models of lung disease.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 31, 373-374 (2004).</li><li>Lundblad, L. K., Irvin, C. G., Adler, A., Bates, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reevaluation+of+the+validity+of+unrestrained+plethysmography+in+mice.">A reevaluation of the validity of unrestrained plethysmography in mice.</a> J. Appl. Physiol. 93, 1198-1207 (2002).</li><li>Grunig, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+for+IL-13+independently+of+IL-4+in+experimental+asthma.">Requirement for IL-13 independently of IL-4 in experimental asthma.</a> Science. 282, 2261-2263 (1998).</li><li>Corry, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirements+for+allergen-induced+airway+hyperreactivity+in+T+and+B+cell-deficient+mice.">Requirements for allergen-induced airway hyperreactivity in T and B cell-deficient mice.</a> Mol. Med. 4, 344-355 (1998).</li><li>Corry, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin+4,+but+not+interleukin+5+or+eosinophils,+is+required+in+a+murine+model+of+acute+airway+hyperreactivity.">Interleukin 4, but not interleukin 5 or eosinophils, is required in a murine model of acute airway hyperreactivity.</a> J. Exp. Med. 183, 109-117 (1996).</li><li>Amdur, M. O., Mead, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanics+of+respiration+in+unanesthetized+guinea+pigs.">Mechanics of respiration in unanesthetized guinea pigs.</a> Am J Physiol. 192, 364-368 (1958).</li></ol>

Studiet av astma och diverse andra luftvägssjukdomar obstruktiv, utgör en aktiv och växande området biomedicinsk forskning. En viktig del av astmarelaterade experimentell forskning är förmågan att mäta förändringar i luftvägarna storlek under varierande förhållanden. Överdriven luftvägsförträngning som svar på provocerande utmaning, en kanonisk funktion i astma och sjukdomar lunga och en egendom kallas luftvägarna luftvägarna hyperreaktivitet, är en viktig del av kliniskt signifikant attacker som le...

Airway fysiologi mätning programvara (Rescomp) var anpassade preparerade (Millennium Premier Group, 415-519-4371). Data analyserades med hjälp av en PC arbetsstation som kör Windows XP utrustad med en Pentium III processor (Intel, Inc. Santa Clara, CA) och en 17-stifts analog till digital signalomvandlare (National Instruments, # PC-LPM16). Ett litet djur luftvägar fysiologi arbetsstation var anpassade sammansatta (Millennium Premier Group) med hjälp av kommersiellt tillgängliga tryckgivare (del # TRD5700 och TRD4510), förförstärkare moduler (del # MAX2270), chassin (del # MAX1320, alla från Buxco, Inc. Wilmington, NC ) och en anpassad litet djur plethysmograph. 0.5mm ytterdiameter fiberoptisk tråd, ansluten till ljuskällan (Cole Palmer lampa, 41.722-serien) Fläkt (Harvard Apparater Mus Fläkt, # 687) 10 mm, 27ga nål (BD Biosciences, kat. Nr. 309.602) Värmelampa 1 ml spruta (BD Biosciences, kat. Nr. 305.109) 4 klämmor (ponny 3200 fjäderklämma) 0,5 mm extern tråd för intubation guide Hemacytometer SuperFrost / plus objektglas (Fisher katt. Nr. 12-550-15) Shandon Filter Kort (Thermo katt. Nr. 5.991.022) Differential cell bild fläcken (Fisher katt. Nr. 122.911) Ljusmikroskop (Leica) Cytospin 3 (Shandon) 20 GA, 1,25 tums ProtectIV intravenösa katetrar (Smith Medical) 0,5 mm polymer optisk fiber (Edmund Optics # NT02-532).

a reversible, non-invasive method for airway resistance measurements and bronchoalveolar lavage fluid sampling in mice

Airway hyperreaktivitet (AHR) mätningar och lungsköljning (BAL) vätska provtagning är avgörande för experimentell astma modeller, men upprepade procedurer för att få sådana mätningar i samma djur är i allmänhet inte är genomförbara. Här visar vi protokoll för att erhålla från möss upprepade mätningar av AHR och lungsköljning prover vätska. Möss intranasalt sju gånger under 14 dagar med en potent allergen eller behandlas bluff. Före den första utmaningen, och inom 24 timmar efter varje intranasal utmaning, var samma djur bedövas, oralt intuberade och mekaniskt ventilerad. AHR, bedömas genom att jämföra kurvor dos respons andningsorganen motstånd (RRS) inducerad genom att öka intravenösa doser av acetylkolin (ACH) klorid mellan falskt och allergen-utmanade djur, fastställdes. Efteråt, och via samma intubation, var den vänstra lungan lavaged så att differential räkning av luftvägarna celler kan utföras. Dessa studier visar att upprepade mätningar av AHR och BAL vätskeansamling är möjliga från samma djur och att maximal luftvägarna hyperreaktivitet och luftvägar eosinofili uppnås inom 7-10 dagar efter påbörjad allergen utmaning. Denna nya teknik reducerar antalet möss som behövs för longitudinella experiment och tillämpas på olika arter av gnagare, modeller sjukdom och luftvägar fysiologi instrument.

Watch this Scientific Journal Video about A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice at JoVE.com

A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

Upprepade mätningar av gnagare andningsfysiologi och provtagning av luftvägarna inflammatoriska celler är önskvärda, men i allmänhet inte genomförbart. Här beskriver vi en repeterbar metod för oralt intubating möss som medger upprepade mätningar av luftvägarna hyperreaktivitet och provtagning i luftvägarna inflammatoriska celler.

En reversibel, icke-invasiv metod för mätningar luftvägsmotståndet och lungsköljning Fluid Provtagning i Möss

Airway hyperreactivity (AHR) measurements and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid sampling are essential to experimental asthma models, but repeated ...

Research

JoVE Journal

Biology

Pyrosequencing: A Simple Method for Accurate Genotyping

Pyrosequencing: En enkel metod för noggrann Genotypning

Pharmacogenetic research benefits first-hand from the abundance of information provided by the completion of the Human Genome Project. With such a ...

Labeling hESCs and hMSCs with Iron Oxide Nanoparticles for Non-Invasive in vivo Tracking with MR Imaging

Märkning hESCs och hMSCs med nanopartiklar av järnoxid för icke-invasiv in vivo-spårning med MR

In recent years, stem cell research has led to a better understanding of developmental biology, various diseases and its potential impact on regenerative ...

Labeling Stem Cells with Fluorescent Dyes for non-invasive Detection with Optical Imaging

Märkning stamceller med fluorescerande färger för icke-invasiv Detection med optisk avbildning

Optical imaging (OI) is an easy, fast and inexpensive tool for in vivo monitoring of new stem cell based therapies. The technique is based on ex vivo ...

Seawater Sampling and Collection

Havsvatten Provtagning och insamling

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

A 3D System for Culturing Human Articular Chondrocytes in Synovial Fluid

En 3D-system för odling mänskliga Artikulära chondrocyter i ledvätskan

Cartilage destruction is a central pathological feature of osteoarthritis, a leading cause of disability in the US. Cartilage in the adult does not ...

Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification

Utföra Vaginal Lavage, Crystal Violet färgning och vaginal Cytologisk utvärdering för mus estrous cykel Staging Identifiering

A rapid means of assessing reproductive status in rodents is useful not only in the study of reproductive dysfunction but is also required for the ...

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

Ex vivo-metod för högupplöst avbildning av Cilia Motility i Rodent luftvägsepitel

An ex vivo technique for imaging mouse airway epithelia for quantitative  analysis of motile cilia function important for insight into mucociliary  ...

Functional Reconstitution and Channel Activity Measurements of Purified Wildtype and Mutant CFTR Protein

Funktionell beredning och Kanalaktivitets Mätningar av renat Vildtyps och Mutant CFTR Protein

The Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) is a unique channel-forming member of the ATP Binding Cassette (ABC) superfamily of ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

Fekal Glukokortikoid Analys: Icke-invasiv Adrenal Övervakning av equids

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

Filtration Isolation of Nucleic Acids:  A Simple and Rapid DNA Extraction Method

Filtrering Isolering av nukleinsyror: En enkel och snabb DNA-extraktion metod

FINA, filtration isolation of nucleic acids, is a novel extraction method which utilizes vertical filtration via a separation membrane and absorbent pad ...