Betydelsen av korrekt proteinkoncentration för kinetik och affinitet Bestämning i struktur och funktion Analys

Vi tillämpar etikett-fri analys av proteininteraktioner använda Biacore X100 för struktur och funktion analys av bindning av flera mutanter cystatin B till papain genom kinetiska karakterisering. Kalibrering-fria koncentrationen analys (CFCA) mäter koncentrationen av protein med bibehållen bindande aktivitet utan behov av en standardkurva. Vi visar att en bekräftelse av koncentrationer med CFCA ökar tillförlitligheten i den kinetiska analysen och att kinetiska konstanter tillförlitligt kan bestämmas, även om aktiviteten av ett rekombinant protein minskar.