Name: preparation of drosophila polytene chromosome squashes for antibody labeling
Uploaded: 2010-02-09T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling at JoVE.com

비행기는 주식이 작품은 건강 그랜트 (GM62916)과 국립 과학 재단 (National Science Foundation) 부여 (MCB0817107)에 대한 국립 연구소에 의해 지원되었다의 유지 보수를 위해 양 V. Lephart 감사합니다.

polytene 염색체 스쿼시 준비에 대해 다음 프로토콜은 요한센 외에서 설명한 절차에서 조정됩니다. (2009). 1. 셋째 instar Drosophila의 애벌레의 문화 고품질 스쿼시 준비를위한 최적의 polytene 염색체를 얻기 위해서는, 솟아 culturing 조건 (즉, 주위 20 달걀 누워 매일 새로운 병에 표준 4 &quot;비행 병 및 변경에 여성 파리). 선택 뚱보 개인 필수입니다 그...

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	<li>Cai, W., Bao, X., Deng, H., Jin, Y., Girton, J., Johansen, J., Johansen, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+polymerase+II-mediated+transcription+at+active+loci+does+not+require+histone+H3S10+phosphorylation+in+Drosophila.">RNA polymerase II-mediated transcription at active loci does not require histone H3S10 phosphorylation in Drosophila.</a> Development. 135, 2917-2925 (2008).</li><li>DiMario, P., Rosby, R., Cui, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+visualization+of+GFP-fusion+proteins+on+polytene+chromosomes.">Direct visualization of GFP-fusion proteins on polytene chromosomes.</a> Dros. Inf. Serv. 89, 115-118 (2006).</li><li>Johansen, K. M., Cai, W., Deng, H., Bao, X., Zhang, W., Girton, J., Johansen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+studying+transcription+and+epigenetic+chromatin+modification+in+Drosophila+polytene+chromosome+squash+preparations+using+antibodies.">Methods for studying transcription and epigenetic chromatin modification in Drosophila polytene chromosome squash preparations using antibodies.</a> Methods. 48, 387-397 (2009).</li></ol>

기존 스쿼시 고정 프로토콜의 아세트산과 젖산 지방산의 포함은 확산 interband 해상도와 염색체 팔 모두를 용이하게하지만, 불행히도 일부 epitopes이 치료를 생존하지 않습니다. 이러한 에피토프의 예는 H3S10ph입니다 (까 외., 2008). 산성 치료 또한 GFP - 태그 단백질, DiMario 외의 고유의 형광을 꺼버리는 그 단점을 가지고 있기 때문에. (2006) 최근에 산성에 민감한 epitopes의 항체 검출을위한 ...

preparation of drosophila polytene chromosome squashes for antibody labeling

Drosophila 오래 염색질 구조와 셋째 instar의 애벌레의 거대한 침샘 polytene 염색체에서 제공하는 cytological 장점으로 인해 유전자 규제 사이의 관계를 공부 좋아하는 모델 시스템을하고 있습니다. 이 조직에서 염색체는 약 1000 사본을 상승을주는 세포 분열의 부재에서 복제의 많은 순찰을 받고있다. DNA는 특정 단백질의 지방화로 염색질 형태를 상호 연관시킬 수있는 독특한 기회를 제공합니다 크게 확대 염색체의 결과로 각 replicative 사이클 이후에 정렬 남아있다. 따라서, 다른 유전자에 존재하는 epigenetic 수정 정의 및 전사 프로세스의 여러 단계에서 관심이 높은 수준이되었습니다. 이러한 연구에 중요한 도구가 효소에 항체와 polytene 염색체의 라벨, 전사 인자, 또는 관심 히스톤 수정입니다. 이 비디오 프로토콜은 항체 라벨에 대한 Drosophila polytene 염색체를 준비 요한센 실험실에서 사용되는 스쿼시 기술을 보여줍니다.

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Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling

이 비디오 프로토콜은 준비하는 요한센 실험실에서 사용되는 스쿼시 기법을 보여줍니다<em&gt; Drosophila</em항체 라벨에 대한&gt; polytene 염색체.

항체 라벨링에 대한 Drosophila Polytene의 염색체 Squashes의 준비

Drosophila has long been a favorite model system for studying the relationship between chromatin structure and gene regulation due to the cytological ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Midgastrula 스테이지 Drosophila의 태아에서 문화의 연결 준비

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

연구

생물학

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

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의 준비 Drosophila</em공중 드롭 프로토콜을 사용하여 라이브 영상을위한> 태아

Green fluorescent protein (GFP)-based timelapse live-imaging is a powerful technique for studying the genetic regulation of dynamic processes such as ...

Fluorescent Labeling of Drosophila Heart Structures

Fluorescent Labeling of Drosophila Heart Structures

의 형광 라벨링 Drosophila 심장 구조

The Drosophila melanogaster dorsal vessel, or heart, is a tubular structure comprised of a single layer of contractile cardiomyocytes, pericardial cells ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

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의 전자 현미경을위한 배아의 준비 Drosophila 태아의 심장 관

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

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라이브 해부 Drosophila 태아 : 항체 스테 이닝에 의해 돌연변이 컬렉션을 검사 늘씬한 방법

Drosophila embryos between stages 14 and 17 of embryonic development can be readily dissected to generate "fillet" preparations.  In these preparations, ...

Preparation of Developing and Adult Drosophila Brains and Retinae for Live Imaging

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개발 및 성인의 준비 Drosophila 두뇌와 라이브 영상을위한 Retinae

The Drosophila brain and visual system are widely utilized model systems to study neuronal development, function and degeneration. Here we show three ...

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

의 준비 Drosophila</em라이트 현미경을 위해> S2 세포

The ideal experimental system would be cheap and easy to maintain, amenable to a variety of techniques, and would be supported by an extensive literature ...

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

성인의 준비 Drosophila</em씬 Sectioning 및 현미경 분석을위한> 눈

Drosophila has long been used as model system to study development, mainly due to the ease with which it is genetically tractable. Over the years, a ...

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

생활에서 보여주는 동적 Kinetochore 단백질 행동과 염색체 모션으로 Mitotic 검사 점 유학<em&gt; Drosophila</em&gt; Syncytial 태아

The spindle assembly checkpoint (SAC) mechanism is an active signal, which monitors the interaction between chromosome kinetochores and spindle ...

Chromosome Preparation From Cultured Cells

배양 세포에서 염색체 준비

Chromosome (cytogenetic) analysis is widely used for the detection of chromosome instability. When followed by G-banding and molecular techniques such as ...