Name: preparation of drosophila polytene chromosome squashes for antibody labeling
Uploaded: 2010-02-09T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling at JoVE.com

Мы благодарим г-жа В. Lephart для поддержания запасов летать Работа выполнена при поддержке Национального института здравоохранения гранта (GM62916) и Национального научного фонда грант (MCB0817107).

Следующие протокол для подготовки сквош политенных хромосом адаптировано из процедуры, описанной в Йохансен и соавт. (2009). 1. Культура третьего возраста личинок дрозофилы Для того чтобы получить оптимальную политенных хромосом для высокого каче?...

<ol>
	<li>Cai, W., Bao, X., Deng, H., Jin, Y., Girton, J., Johansen, J., Johansen, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+polymerase+II-mediated+transcription+at+active+loci+does+not+require+histone+H3S10+phosphorylation+in+Drosophila.">RNA polymerase II-mediated transcription at active loci does not require histone H3S10 phosphorylation in Drosophila.</a> Development. 135, 2917-2925 (2008).</li><li>DiMario, P., Rosby, R., Cui, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+visualization+of+GFP-fusion+proteins+on+polytene+chromosomes.">Direct visualization of GFP-fusion proteins on polytene chromosomes.</a> Dros. Inf. Serv. 89, 115-118 (2006).</li><li>Johansen, K. M., Cai, W., Deng, H., Bao, X., Zhang, W., Girton, J., Johansen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+studying+transcription+and+epigenetic+chromatin+modification+in+Drosophila+polytene+chromosome+squash+preparations+using+antibodies.">Methods for studying transcription and epigenetic chromatin modification in Drosophila polytene chromosome squash preparations using antibodies.</a> Methods. 48, 387-397 (2009).</li></ol>

Включение уксусная и молочная кислоты в обычных протоколов фиксации сквош облегчает как разрешение межзонных и хромосомные руку распространения, но к сожалению, некоторые эпитопы не выживают этого лечения. Примером такого эпитопа является H3S10ph (Cai и соавт., 2008). После кислотной обр...

preparation of drosophila polytene chromosome squashes for antibody labeling

Дрозофилы уже давно любимые модельной системой для изучения взаимосвязи между структурой хроматина и регуляции генов в связи с цитологическим преимущества, которые дает гигантский слюнной железы политенных хромосом личинок третьего возраста. В этой ткани хромосом пройти много раундов репликации в отсутствие деления клеток что приводит к приблизительно 1000 экземпляров. ДНК остается выровнен после каждого цикла репликации в результате чего значительно увеличен хромосом, которые предоставляют уникальную возможность соотнести хроматина морфологии с локализацией специфических белков. Следовательно, наблюдается высокий уровень заинтересованности в определении эпигенетические модификации присутствует на различных генов и на разных этапах процесса транскрипции. Важным инструментом для таких исследований является маркировка политенных хромосом с антителами к фермента, фактора транскрипции, или модификации гистонов интересов. Это видео показывает протокол сквош техника, используемая в Йохансен лаборатории для подготовки политенных хромосом дрозофилы на антитела маркировки.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling at JoVE.com

Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling

Это видео показывает протокол сквош техника, используемая в Йохансен лаборатории для подготовки<em&gt; Drosophila</em&gt; Политенных хромосом антитела маркировки.

Подготовка политенных хромосом Drosophila Кабачки для антител маркировки

Drosophila has long been a favorite model system for studying the relationship between chromatin structure and gene regulation due to the cytological ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Подготовка нейронных культур от Midgastrula этапе эмбрионы дрозофилы

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

Подготовка Drosophila Эмбрионы для Live-визуализации с использованием висячей капли протокола

Green fluorescent protein (GFP)-based timelapse live-imaging is a powerful technique for studying the genetic regulation of dynamic processes such as ...

Fluorescent Labeling of Drosophila Heart Structures

Fluorescent Labeling of Drosophila Heart Structures

Флуоресцентная маркировка Drosophila Структур сердца

The Drosophila melanogaster dorsal vessel, or heart, is a tubular structure comprised of a single layer of contractile cardiomyocytes, pericardial cells ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Подготовка эмбрионов для электронной микроскопии Drosophila Эмбриональные трубки сердца

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Живая Препарирование Drosophila Эмбрионы: Упрощенная методы скрининга Мутант Коллекции антител Окрашивание

Drosophila embryos between stages 14 and 17 of embryonic development can be readily dissected to generate "fillet" preparations.  In these preparations, ...

Preparation of Developing and Adult Drosophila Brains and Retinae for Live Imaging

Preparation of Developing and Adult Drosophila Brains and Retinae for Live Imaging

Подготовка Разработка и взрослых Drosophila Мозги и сетчатки для живых изображений

The Drosophila brain and visual system are widely utilized model systems to study neuronal development, function and degeneration. Here we show three ...

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

Подготовка Drosophila S2 клеток для световой микроскопии

The ideal experimental system would be cheap and easy to maintain, amenable to a variety of techniques, and would be supported by an extensive literature ...

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Подготовка взрослых Drosophila Глаза для тонких Секционирование и микроскопический анализ

Drosophila has long been used as model system to study development, mainly due to the ease with which it is genetically tractable. Over the years, a ...

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

Изучение митоза Checkpoint, иллюстрируя динамического поведения белков кинетохора и хромосомы движения в живых<em&gt; Drosophila</em&gt; Синцитиальный эмбрионов

The spindle assembly checkpoint (SAC) mechanism is an active signal, which monitors the interaction between chromosome kinetochores and spindle ...

Chromosome Preparation From Cultured Cells

Хромосома Подготовка из культивируемых клеток

Chromosome (cytogenetic) analysis is widely used for the detection of chromosome instability. When followed by G-banding and molecular techniques such as ...