Name: preparation of drosophila polytene chromosome squashes for antibody labeling
Uploaded: 2010-02-09T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling at JoVE.com

Bayan V. Lephart Biz Bu çalışma, Sağlık hibe (GM62916) ve Ulusal Bilim Vakfı hibe (MCB0817107) Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından desteklenen sinek stokları bakım için teşekkür ederim.

Politen kromozomu squash hazırlanması için aşağıdaki protokol Johansen ve ark açıklanan prosedür uyarlanmıştır. (2009). 1. Üçüncü instar Drosophila larvaları Kültür Yüksek kaliteli squash hazırlıkları için optimal politen kromozom elde etmek için, bulursunuz kültür koşullarında (yani, yer yaklaşık 20 yumurta döşeme standart bir 4 &quot;sinek şişe ve değişim her geçen gün yeni bir şişe içinde erkek sinekler...

<ol>
	<li>Cai, W., Bao, X., Deng, H., Jin, Y., Girton, J., Johansen, J., Johansen, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+polymerase+II-mediated+transcription+at+active+loci+does+not+require+histone+H3S10+phosphorylation+in+Drosophila.">RNA polymerase II-mediated transcription at active loci does not require histone H3S10 phosphorylation in Drosophila.</a> Development. 135, 2917-2925 (2008).</li><li>DiMario, P., Rosby, R., Cui, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+visualization+of+GFP-fusion+proteins+on+polytene+chromosomes.">Direct visualization of GFP-fusion proteins on polytene chromosomes.</a> Dros. Inf. Serv. 89, 115-118 (2006).</li><li>Johansen, K. M., Cai, W., Deng, H., Bao, X., Zhang, W., Girton, J., Johansen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+studying+transcription+and+epigenetic+chromatin+modification+in+Drosophila+polytene+chromosome+squash+preparations+using+antibodies.">Methods for studying transcription and epigenetic chromatin modification in Drosophila polytene chromosome squash preparations using antibodies.</a> Methods. 48, 387-397 (2009).</li></ol>

Geleneksel kabak tespit protokollerinde asetik ve laktik asitler dahil, yayılmasını bantlar çözünürlük ve kromozomal kol kolaylaştırır ama ne yazık ki, bazı epitoplar bu tedavi hayatta yok. Böyle bir epitopu bir örnek H3S10ph (Cai ve ark, 2008). Asit tedavisi de GFP etiketli proteinler, DiMario ve ark doğasında floresan doyurur dezavantajı vardır. (2006) son zamanlarda aside duyarlı epitoplar antikor tespiti için GFP-antikor etiketleme gibi politen kromozom GFP-füzyon proteinine d...

preparation of drosophila polytene chromosome squashes for antibody labeling

Drosophila uzun, kromatin yapısı ve üçüncü instar larvaların dev tükürük bezi politen kromozom tarafından sağlanan sitolojik avantajları nedeniyle gen regülasyonu arasındaki ilişkiyi çalışmak için favori bir model sistem olmuştur. Bu doku kromozomların yaklaşık 1000 kopya yol açan hücre bölünmesi yokluğunda çoğaltma çok sayıda mermi uğrarlar. DNA spesifik protein lokalizasyonu ile kromatin morfolojisi ilişkilendirmek için eşsiz bir fırsat sunan büyük ölçüde genişlemiş kromozom sonuçlanan her replikatif döngüsü sonra dizilen kalır. Sonuç olarak, farklı genlerin epigenetik değişiklikleri tanımlamada ve transkripsiyon sürecinin farklı aşamalarında yüksek düzeyde ilgi olmamıştır. Bu tür çalışmalar için önemli bir araç politen kromozom enzim antikorları ile etiketleme, transkripsiyon faktörü, ya da ilgi histon modifikasyonu. Bu video protokolü antikor etiketlenmesi için Drosophila politen kromozom hazırlamak için Johansen laboratuvarında kullanılan kabak tekniği göstermektedir.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling at JoVE.com

Preparation of Drosophila Polytene Chromosome Squashes for Antibody Labeling

Bu video protokol hazırlamak için Johansen laboratuvarında kullanılan kabak tekniği göstermektedir.<em&gt; Drosophila</em&gt; Antikor etiketleme politen kromozom.

Antikor Etiketleme Drosophila politen Kromozom kabak hazırlanması

Drosophila has long been a favorite model system for studying the relationship between chromatin structure and gene regulation due to the cytological ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Nöronal Kültürler Midgastrula Sahne Drosophila Embriyolar hazırlanması

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

The Preparation of Drosophila Embryos for Live-Imaging Using the Hanging Drop Protocol

Hazırlanması Drosophila</emAsma Bırak Protokolü kullanarak Canlı Görüntüleme> Embriyolar

Green fluorescent protein (GFP)-based timelapse live-imaging is a powerful technique for studying the genetic regulation of dynamic processes such as ...

Fluorescent Labeling of Drosophila Heart Structures

Fluorescent Labeling of Drosophila Heart Structures

VE Floresan Etiketleme Drosophila Kalp Yapıları

The Drosophila melanogaster dorsal vessel, or heart, is a tubular structure comprised of a single layer of contractile cardiomyocytes, pericardial cells ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Elektron Mikroskobu için embriyo Hazırlık Drosophila Embriyonik kalp tüpü

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

Live Dissection of Drosophila Embryos: Streamlined Methods for Screening Mutant Collections by Antibody Staining

VE Canlı Diseksiyon Drosophila Embriyolar: Aerodinamik Antikor Boyama Mutant Koleksiyonlar Eleme Yöntemleri

Drosophila embryos between stages 14 and 17 of embryonic development can be readily dissected to generate "fillet" preparations.  In these preparations, ...

Preparation of Developing and Adult Drosophila Brains and Retinae for Live Imaging

Preparation of Developing and Adult Drosophila Brains and Retinae for Live Imaging

Geliştirilmesi ve Yetişkin hazırlanması Drosophila Brain ve Canlı Görüntüleme için Retinae

The Drosophila brain and visual system are widely utilized model systems to study neuronal development, function and degeneration. Here we show three ...

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

Preparation of Drosophila S2 cells for Light Microscopy

Hazırlanması Drosophila Işık Mikroskopi S2 hücreleri

The ideal experimental system would be cheap and easy to maintain, amenable to a variety of techniques, and would be supported by an extensive literature ...

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Yetişkin hazırlanması Drosophila Gözler İnce Kesit ve Mikroskobik Analizi

Drosophila has long been used as model system to study development, mainly due to the ease with which it is genetically tractable. Over the years, a ...

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

Studying Mitotic Checkpoint by Illustrating Dynamic Kinetochore Protein Behavior and Chromosome Motion in Living Drosophila Syncytial Embryos

Living Görselleştirilmesi Dinamik Kinetochore Protein Davranış ve Kromozom Hareket tarafından Mitotik Checkpoint incelenmesi<em&gt; Drosophila</em&gt; Sinsityal Embriyolar

The spindle assembly checkpoint (SAC) mechanism is an active signal, which monitors the interaction between chromosome kinetochores and spindle ...

Chromosome Preparation From Cultured Cells

Kültür Hücrelerinin itibaren Kromozom Hazırlık

Chromosome (cytogenetic) analysis is widely used for the detection of chromosome instability. When followed by G-banding and molecular techniques such as ...