Name: dissection and culture of commissural neurons from embryonic spinal cord
Uploaded: 2010-05-25T17:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord at JoVE.com

وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من المعاهد الكندية للأبحاث الصحية (CIHR) ، وبيتر Lougheed للبحوث الطبية ، ومؤسسة برنامج ماكجيل في Neuroengineering ، وفون بحوث دي سانتي ان كيبيك (FRSQ) ، والمؤسسة الكندية للابتكار (CFI ). وأيد سيباستيان دي انجلوا لجائزة التدريب على الماجستير من فون دي سانتي LA RECHERCHE EN كيبيك (FRSQ) وقبل فريدريك وتشارلز بانتينغ جائزة أفضل رسالة ماجستير كندا منح دراسات عليا من المعهد الكندي للبحوث الصحية (CIHR). ونحن ممتنون لجيسيكا MT فام للحصول على المساعدة وأرقام.

1. تشريح الفئران الجنينية الحبل الشوكي الظهري توصيات عامة إبقاء L - 15 متوسطة على الجليد وتغيير في كثير من الأحيان وسيلة في طبق تشريح للحفاظ على الاجنة بارد. هذا يساعد على الحفاظ على سلامة الأنسجة. ...

<ol>
	<li>Charron, F., Stein, E., Jeong, J., McMahon, A. P., Tessier-Lavigne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+morphogen+sonic+hedgehog+is+an+axonal+chemoattractant+that+collaborates+with+netrin-1+in+midline+axon+guidance.">The morphogen sonic hedgehog is an axonal chemoattractant that collaborates with netrin-1 in midline axon guidance.</a> Cell. , 113-1111 (2003).</li><li>Fabre, P., Shimogori, T., Charron, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+ipsilateral+retinal+ganglion+cell+axons+at+the+optic+chiasm+requires+the+Shh+Receptor+Boc.">Segregation of ipsilateral retinal ganglion cell axons at the optic chiasm requires the Shh Receptor Boc.</a> Journal of Neuroscience. 30, 266-275 (2010).</li><li>Helms, A. W., Johnson, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progenitors+of+dorsal+commissural+interneurons+are+defined+by+MATH1+expression.">Progenitors of dorsal commissural interneurons are defined by MATH1 expression.</a> Development. 125, 919-928 (1998).</li><li>Kaech, S., Banker, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culturing+hippocampal+neurons.">Culturing hippocampal neurons.</a> Nature Protocols. 1, 2406-2415 (2006).</li><li>Okada, A., Charron, F., Morin, S., Shin, D. S., Wong, K., Fabre, P. J., Tessier-Lavigne, M., McConnell, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Boc+is+a+receptor+for+sonic+hedgehog+in+the+guidance+of+commissural+axons.">Boc is a receptor for sonic hedgehog in the guidance of commissural axons.</a> Nature. 444, 369-373 (2006).</li><li>Yam, P. T., Langlois, S. D., Morin, S., Charron, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonic+hedgehog+guides+axons+through+a+noncanonical,+Src-family-kinase-dependent+signaling+pathway.">Sonic hedgehog guides axons through a noncanonical, Src-family-kinase-dependent signaling pathway.</a> Neuron. 62, 349-362 (2009).</li></ol>

وقد وصف لنا طريقة لتشريح والثقافة صواري الخلايا العصبية من الحبل الشوكي الفئران الجنينية. وقد تم هذا الإجراء تستخدم بشكل روتيني في مختبرنا لإعداد موثوق الخلايا العصبية لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية التوجيه محور عصبي. لبيولوجيا الخلية وتجارب كيمياء مناعية ، تشر?...

تشريح الفئران الجنينية الحبل الشوكي الظهري (انظر الجدول الأول) <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نظم بالحمل E13 الفئران </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الايثانول 70 ٪ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مقص جراحي ، وأدوات العلوم الجميلة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الملقط ، دومون # 5 ، أدوات العلوم الجميلة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أطباق بتري </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> L - 15 المتوسط </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مجهر تشريح ، لايكا </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماصات نقل البلاستيك </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Microscissors أدوات العلوم الجميلة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الإبر التنغستن وأصحاب دبوس (واحد من خطاف على شكل إبرة ، واحدة من طراز L - الأشكال الإبرة ، واحد الإبرة على التوالي) ، وأدوات العلوم الجميلة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحرارة المعطل مصل الخيول (HiHS) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أنابيب بلاستيكية 15 مل </li></ul> صواري عصبون الثقافة (انظر الجدول الأول) <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حاضنات زراعة الأنسجة (37 درجة مئوية ، 5 ٪ CO 2 ، والرطوبة تسيطر) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الألمانية coverslips الزجاج Desag و / أو البلاستيك أطباق زراعة الأنسجة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بولي - L - يسين ، سيغما </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معقمة milliQ H 2 O </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Neurobasal ، Invitrogen </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحرارة المعطل مصل بقري جنيني (HiFBS) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> L - الجلوتامين </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> B27 ، Invitrogen </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> البنسلين / المضادات الحيوية الستربتوميسين </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 37 درجة مئوية بالحمام المائي </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معقمة باستور الماصات </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بنسن الغاز الموقد </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> HBSS ، كا 2 + / 2 ملغ + خالية ، Invitrogen </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الدناز ، ورثينجتون </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> MgSO 4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الطرد المركزي </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عدادة الكريات </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التريبان الأزرق الحل </li></ul>

dissection and culture of commissural neurons from embryonic spinal cord

وقد استخدمت على نطاق واسع صواري الخلايا العصبية للتحقيق في الآليات الكامنة وراء التوجيه محوار خلال تطور الجنين في الحبل الشوكي. توجد أجسام الخلايا العصبية في هذه النخاع الشوكي الظهري والمحاور التي تتبع المسارات النمطية أثناء التطور الجنيني. محاور المشروع في البداية صواري ventrally نحو floorplate. بعد عبور خط الوسط ، وهذه المحاور الأمامية وتحويل المشروع نحو الدماغ. ينظم كل من هذه الخطوات التي عمل عدة اشارات التوجيه. هي مناسبة بشكل مثالي الثقافات عالي التخصيب في الخلايا العصبية صواري لمعالجة العديد من التجارب آليات محوار الاستطلاعية ، بما في ذلك فحوصات تحول ، كيمياء المناعة والكيمياء الحيوية. هنا ، نحن تصف طريقة لتشريح والثقافة الخلايا العصبية صواري E13 من الحبل الشوكي الفئران الظهرية. الأول ، هو عزل النخاع الشوكي وتشريح شرائط الظهرية بها. النسيج الظهرية ومن ثم فصلها الى تعليق خلية trypsinization واضطراب الميكانيكية. ومطلي على الخلايا العصبية coverslips الزجاج بولي - L - يسين المغلفة أو أطباق الأنسجة الثقافة. بعد 30 ساعة<em&gt; في المختبر</em&gt; ، وقد مددت معظم الخلايا العصبية محور عصبي. نقاء الثقافة (يام<em&gt; وآخرون.</em&gt; 2009) ، وعادة ما يزيد على 90 ٪ ، يمكن تقييم من قبل immunolabeling مع DCC عصبون علامات صواري ، وLH2 TAG1 (هيلمز وجونسون ، 1998). هذا التحضير العصبية هي أداة مفيدة ل<em&gt; في المختبر</em&gt; دراسات الآليات الخلوية والجزيئية للنمو محوار صواري والتوجيه أثناء تطوير الحبل الشوكي.

Watch this Scientific Journal Video about Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord at JoVE.com

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

هذا الفيديو يوضح طريقة لتشريح والثقافة الخلايا العصبية صواري E13 من الحبل الشوكي الفئران الظهرية. فصل الخلايا العصبية صواري مفيدة لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية للنمو محور عصبي والتوجيه.

تشريح والثقافة من الخلايا العصبية من النخاع الشوكي صواري الجنينية

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Nucleofection and Primary Culture of Embryonic Mouse Hippocampal and Cortical Neurons

Nucleofection والثقافة الأولية من الخلايا العصبية الجنينية الماوس الحصين والقشرية

Hippocampal and cortical neurons have been used extensively to study central nervous system (CNS) neuronal polarization, axon/dendrite outgrowth, and ...

Dissection and Culture of Chick Statoacoustic Ganglion and Spinal Cord Explants in Collagen Gels for Neurite Outgrowth Assays

تشريح العقدة والثقافة والفرخ Statoacoustic Explants النخاع الشوكي في الهلام الكولاجين لفحوصات ثمرة Neurite

The sensory organs of the chicken inner ear are innervated by the peripheral processes of statoacoustic ganglion (SAG) neurons. Sensory organ innervation ...

A Functional Motor Unit in the Culture Dish: Co-culture of Spinal Cord Explants and Muscle Cells

وحدة للسيارات وظيفية في صحن الثقافة: شارك في ثقافة Explants النخاع الشوكي وخلايا العضلات

Human primary muscle cells cultured  aneurally in monolayer rarely contract spontaneously because, in the absence of  a nerve component, cell ...

DiI-Labeling of DRG Neurons to Study Axonal Branching in a Whole Mount Preparation of Mouse Embryonic Spinal Cord

الجاذبة - DRG وصفها من الخلايا العصبية لدراسة المحاور المتفرعة في إعداد جبل الجامعة الحبل الشوكي الفأر الجنينية

Here we  present a technique to label the trajectories of small groups of DRG neurons  into the embryonic spinal cord by diffusive staining using the ...

Dissection, Culture, and Analysis of Xenopus laevis Embryonic Retinal Tissue

Dissection, Culture, and Analysis of Xenopus laevis Embryonic Retinal Tissue

تشريح والثقافة، وتحليل<em&gt; القيطم المورق</em&gt; الأنسجة الجنينية الشبكية

The process by which  the anterior region of the neural plate gives rise to the vertebrate retina  continues to be a major focus of both clinical and ...

Chicken Embryo Spinal Cord Slice Culture Protocol

الدجاج الأجنة شريحة الحبل الشوكي الثقافة البروتوكول

Slice cultures can facilitate the manipulation of  embryo development both pharmacologically and through gene manipulations. In  this reduced system, ...

Dissection and Lateral Mounting of Zebrafish Embryos: Analysis of Spinal Cord Development

تشريح والتركيب الجانبي من اسماك الزرد الأجنة: تحليل التنمية الحبل الشوكي

The zebrafish spinal cord is an effective investigative model for nervous system research for several reasons. First, genetic, transgenic and gene ...

RNA-Seq Analysis of Differential Gene Expression in Electroporated Chick Embryonic Spinal Cord

RNA تسلسل تحليل التفاضلية التعبير الجيني في Electroporated الفرخ الجنينية الحبل الشوكي

In ovo electroporation of the chick neural tube is a fast and inexpensive method for identification of gene function during neural development. Genome ...

Isolation, Culture and Long-Term Maintenance of Primary Mesencephalic Dopaminergic Neurons From Embryonic Rodent Brains

العزلة والثقافة وطويل الأجل صيانة الابتدائية الدماغ المتوسط ​​الدوبامين العصبية من المخ الجنينية القوارض

Degeneration of mesencephalic dopaminergic (mesDA) neurons is the pathological hallmark of Parkinson&#8217;s diseae. Study of the biological processes ...

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

Zebrafish In Situ Spinal Cord Preparation for Electrophysiological Recordings from Spinal Sensory and Motor Neurons

الزرد<em&gt; في الموقع</em&gt; الحبل الشوكي التحضير للتسجيلات الكهربية من العمود الفقري الحسية والحركية العصبية

Zebrafish, first introduced as a developmental model, have gained popularity in many other fields. The ease of rearing large numbers of rapidly developing ...