Name: primary human bronchial epithelial cells grown from explants
Uploaded: 2010-03-26T17:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Primary Human Bronchial Epithelial Cells Grown from Explants at JoVE.com

المؤلفون ممتنون جدا للدكتور ريتشارد Inculet لتوفير أنسجة الشعب الهوائية. تم الحصول على موافقات مجلس البحوث الأخلاقيات الطبية من هاميلتون القديس يوسف وجامعة اونتاريو / لندن الغربية مركز علوم الصحة (الدكتور ديفيد ماكورماك) ، مناديل والمحفوظات اللجنة ، قسم علم الأمراض. ونحن نشكر أيضا إرني سبيتزر (الميكروسكوب الالكتروني ، جامعة ماكماستر) لتوفير إحساس الغانيين علي الثقافات لدينا ، وفاركاس دانييلا لتوفير بعض المواد اللازمة لimmunostaining. وقد تم تمويل هذا العمل من قبل كتلة منحة المدى من جمعية أونتاريو الصدر ؛ وأيد الدكتور ياغي أسماء من قبل منحة FSORC ، والرعاية الصحية سانت جوزيف ، هاميلتون ، اونتاريو ، كندا.

شرائح الشعبي الإنسان توفير مصدر وفيرة من الخلايا الأولية الظهارية القصبية. في هذه المقالة وصفنا بروتوكولا للنمو والتوسع في الشعب الهوائية الخلايا البشرية (HBE) الظهارية من شرائح الشعب الهوائية المعزولة حديثا الإنسان. هذا البروتوكول يتكون من خمسة أقسام : <ol style=";text-ali...

<ol>
	<li>Phillips, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growing+Cells+on+Transwell+Inserts+-+Tips+and+Techniques+[Internet].">Growing Cells on Transwell Inserts - Tips and Techniques [Internet].</a> Corning Life Sciences, Technical Resources, Online Training. , (2008).</li><li>Turi, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+stress+activates+anion+exchange+protein+2+and+AP-1+in+airway+epithelial+cells.">Oxidative stress activates anion exchange protein 2 and AP-1 in airway epithelial cells.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol. Physiol. 283, L791-L798 (2002).</li><li>Lechner, J. F., Haugen, A., McClendon, I. A., Pettis, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonal+growth+of+normal+adult+human+bronchial+epithelial+cells+in+a+serum-free+medium.">Clonal growth of normal adult human bronchial epithelial cells in a serum-free medium.</a> In Vitro. 18, 633-642 (1982).</li><li>Yoshisue, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+ciliated+bronchial+epithelium+1,+a+ciliated+cell-associated+gene+induced+during+mucociliary+differentiation.">Characterization of ciliated bronchial epithelium 1, a ciliated cell-associated gene induced during mucociliary differentiation.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 31, 491-500 (2004).</li><li>Wetering, S. v. a. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+secretory+leukocyte+proteinase+inhibitor+(SLPI)+production+by+human+bronchial+epithelial+cells:+increase+of+cell-associated+SLPI+by+neutrophil+elastase.">Regulation of secretory leukocyte proteinase inhibitor (SLPI) production by human bronchial epithelial cells: increase of cell-associated SLPI by neutrophil elastase.</a> J. Investig. Med. 48, 359-366 (2000).</li><li>Tristram, D. A., Hicks, W., Hard, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+syncytial+virus+and+human+bronchial+epithelium.">Respiratory syncytial virus and human bronchial epithelium.</a> Arch. Otolaryngol. Head Neck Surg. 124, 777-783 (1998).</li><li>Mattinger, C., Nyugen, T., Schafer, D., Hormann, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+serum-free+culture+conditions+for+primary+human+nasal+epithelial+cells.">Evaluation of serum-free culture conditions for primary human nasal epithelial cells.</a> Int. J. Hyg. Environ. Health. 205, 235-238 (2002).</li><li>Freshney, R. I., Freshney, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Culture of epithelial cells. , 1-23 (1992).</li><li>Freshney, R. I., Freshney, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+human+bronchial+epithelial+cell+cultures+in+Culture+of+specialized+cells+series.">Normal human bronchial epithelial cell cultures in Culture of specialized cells series.</a> Culture of epithelial cells. , 181-196 (1992).</li></ol>

في هذه الدراسة التي قدمت لنا وسائل مفصلة للثقافة وتوسيع الشعب الهوائية الخلايا الظهارية الإنسان الأساسية. أظهرنا كيف explants وزرع أنسجة الشعب الهوائية ، ومثقف في وسائل الإعلام التي تروج للنمو الخلايا الظهارية ، ويمكن توفير مصدر مستمر من الخلايا الظهارية البشرية الهوا...

متطلبات أخرى : حاضنة والبيولوجية مجلس الوزراء السلامة (BSC) ، الطرد المركزي ، لوحات ثقافة 100mm ، وأنابيب معقمة (15 مل ، 50 مل ، ومل 2) ، ونصائح ماصة معقمة ، والتعامل مع مشرط وريش ، مقص صغير حاد ، والمعاطف والقفازات المختبر. ويمكن الحصول على هذه من الموردين المفضل لديك.

primary human bronchial epithelial cells grown from explants

وهناك حاجة الإنسان الخلايا الظهارية القصبية لنماذج خلية من المرض ودراسة تأثير السواغات وكلاء الصيدلانية على وظيفة وهيكل الخلايا الظهارية البشرية. نحن هنا تصف بالتفصيل طريقة تنامي الخلايا الظهارية القصبات الهوائية من نسيج الشعب الهوائية التي يتم حصادها من قبل الجراح في أوقات جراحة الرئة (مثل سرطان الرئة أو جراحة خفض حجم الرئة). مع الموافقة على الأخلاق والموافقة المستنيرة ، الجراح يأخذ ما هو بحاجة لعلم الأمراض ، ويوفر لنا مع جزء الشعب الهوائية التي هي بعيدة من المناطق المصابة. ثم يتم استخدام النسيج كمصدر للexplants التي يمكن استخدامها لزراعة الخلايا الظهارية القصبية الأساسي في الثقافة. يتم شطف شرائح الشعب الهوائية نحو 0.5 - 1cm طويلة و≤ 1cm في قطر مع EBSS الباردة وتتم إزالة الأنسجة الزائدة متني. تقطع شرائح فتح والمفروم إلى 3mm - 2<sup&gt; 3</sup&gt; قطعة من نسيج الجسم. وتستخدم القطع كمصدر للخلايا الأولية. بعد طلاء الصفائح 100mm الثقافة لمدة 1-2 ساعة مع مزيج من الكولاجين (30 ميكروغرام / مل) ، فبرونيكتين (10 ميكروغرام / مل) ، وديوان الرقابة المالية (10 ميكروغرام / مل) ، وخدش لوحات في المناطق 4-5 والأنسجة توضع القطع في المناطق خدش ، ثم يضاف مستنبت (DMEM / هام F - 12 مع اضافات) مناسبة لنمو الخلايا الظهارية ويتم وضعها في حاضنة لوحات عند 37 درجة مئوية في ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5 ٪<sub&gt; 2</sub&gt; ترطيب الهواء. يتم تغيير الثقافة المتوسطة كل 3-4 أيام. تنمو الخلايا الظهارية من القطع التي تشكل حوالي 1.5 سم في القطر الحلقات 3-4 أسابيع. ويمكن إعادة استخدامها Explants تصل إلى 6 مرات من قبل نقلها إلى لوحات قبل المغلفة جديدة. ورفع الخلايا باستخدام التربسين / EDTA ، المجمعة ، عدها ، وإعادة مطلي T75 في قوارير ربط الخلية لزيادة أعدادهم. T75 قوارير المصنفة 2-3 مع ملايين الخلايا تنمو لالتقاء 80 ٪ في 4 أسابيع. يمكن أن يكون المثقف الإنسان الأساسية توسيع الخلايا الظهارية ، وسمح للتمييز على الهواء السائل واجهة. وصف أساليب هنا توفير مصدر وفيرة من الخلايا البشرية القصبية الظهارية من الأنسجة المعزولة حديثا ، والسماح لدراسة هذه الخلايا كنماذج من المرض والصيدلة وعلم السموم الفرز.

Watch this Scientific Journal Video about Primary Human Bronchial Epithelial Cells Grown from Explants at JoVE.com

Primary Human Bronchial Epithelial Cells Grown from Explants

نحن هنا وصف طريقة مفصلة لزراعة القصبات الإنسان الأولية من الخلايا الظهارية explants الأنسجة البشرية القصبات الهوائية بما في ذلك النمو المتباينة على واجهة الهواء السائل. هذا الأسلوب يوفر مصدر وفيرة من الخلايا الأولية للتحقيق في دور ظهارة مجرى الهواء في الرئة صحة الإنسان والمرض.

الإنسان الشعبي الأساسي الخلايا الظهارية نمت من Explants

Human bronchial epithelial cells are needed for cell models of disease and to investigate the effect of excipients and pharmacologic agents on the ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation and Culture of Rat Lens Epithelial Explants for Studying Terminal Differentiation

إعداد وثقافة Explants لنس الجرذ طلائي لدراسة التمايز الطرفية

The anterior surface of the ocular lens is covered by a monolayer of epithelial cells, which proliferate in an annular zone underlying the ciliary body.  ...

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

العزلة وثقافة الكبار الخلايا الجذعية الظهارية من الجلد البشري

The homeostasis of all self-renewing tissues is dependent on adult stem cells. As undifferentiated stem cells undergo asymmetric divisions, they generate ...

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

Ex Vivo Culture of Primary Human Fallopian Tube Epithelial Cells

الثقافة السابقين فيفو من خلايا الإنسان الأولية قناة فالوب طلائي

Epithelial ovarian cancer is a leading cause of female cancer mortality in the United States. In contrast to other women-specific cancers, like breast and ...

Na&iuml;ve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

السذاجة الكبار الخلايا الجذعية عزل من المرحلة الابتدائية الثقافات الخلايا الليفية الإنسان

Over the last decade, several adult stem cell  populations have been identified in human skin 1-4.  The isolation of multipotent adult dermal precursors ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

الاستقراء وتحليل الظهارية الوسيطة الانتقالية ل

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Optimal Lentivirus Production and Cell Culture Conditions Necessary to Successfully Transduce Primary Human Bronchial Epithelial Cells

الأمثل الفيروسة البطيئة إنتاج وزراعة الخلايا الشروط الضرورية لبنجاح خلايا تنبيغ الإنسان الشعبي الأساسي طلائي

In vitro culture of primary human bronchial epithelial (HBE) cells using air-liquid interface conditions provides a useful model to study the processes of ...

Methods to Study Epithelial Transport Protein Function and Expression in Native Intestine and Caco-2 Cells Grown in 3D

طرق لدراسة النقل طلائي وظيفة البروتين والتعبير في الأمعاء الأصلية وكاتشو-2 الخلايا المزروعة في 3D

The intestinal epithelium has important transport and barrier functions that play key roles in normal physiological functions of the body while providing ...

Multicellular Human Alveolar Model Composed of Epithelial Cells and Primary Immune Cells for Hazard Assessment

نموذج القُزلة السنخية البشرية متعددة الخلايا يتكون من الخلايا الظهارية والخلايا المناعية الأولية لتقييم المخاطر

A human alveolar cell coculture model is described here for simulation of the alveolar epithelial tissue barrier composed of alveolar epithelial type II ...

Generation of Murine Primary Colon Epithelial Monolayers from Intestinal Crypts

جيل من المورين الأولي القولون الظهارية Monolayers من سرداب الأمعاء

The intestinal epithelium is comprised of a single layer of cells that act as a barrier between the gut lumen and the interior of the body. Disruption in ...

Efficient Dissection and Culture of Primary Mouse Retinal Pigment Epithelial Cells

تشريح فعال وثقافة الخلايا الظهارية صبغة الفأر الأولية

Eye disorders affect millions of people worldwide, but the limited availability of human tissues hinders their study. Mouse models are powerful tools to ...