Name: deciphering axonal pathways of genetically defined groups of neurons in the chick neural tube utilizing in ovo electroporation
Uploaded: 2010-05-02T20:17:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Deciphering Axonal Pathways of Genetically Defined Groups of Neurons in the Chick Neural Tube Utilizing in ovo Electroporation at JoVE.com

इस काम में इसराइल विज्ञान फाउंडेशन, इसराइल के स्वास्थ्य मंत्रालय, और DFG (जर्मन रिसर्च फाउंडेशन) से एके अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था.

मैं electroporation अंडे से निपटने <ol><li> 37-38 डिग्री सेल्सियस बेहतर, एक कमाल की ट्रे के साथ एक मशीन एक humidified इनक्यूबेटर सेट में अंडे रखें. </li><li> भ्रूण ऊष्मायन के बारे में 66 घंटे के बाद electroporated हैं, जब वे हैम्बर्गर औ?...

<ol>
	<li>Zisman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteolysis+and+membrane+capture+of+F-spondin+generates+combinatorial+guidance+cues+from+a+single+molecule.">Proteolysis and membrane capture of F-spondin generates combinatorial guidance cues from a single molecule.</a> J Cell Biol. 178 (7), 1237-1249 (2007).</li><li>Arakawa, T., Iwashita, M., Matsuzaki, F., Suzuki, T., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paths,+elongation,+and+projections+of+ascending+chick+embryonic+spinal+commissural+neurons+after+crossing+the+floor+plate.">Paths, elongation, and projections of ascending chick embryonic spinal commissural neurons after crossing the floor plate.</a> Brain Res. 1223, 25-33 (2008).</li><li>Avraham, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptional+control+of+axonal+guidance+and+sorting+in+dorsal+interneurons+by+the+Lim-HD+proteins+Lhx9+and+Lhx1.">Transcriptional control of axonal guidance and sorting in dorsal interneurons by the Lim-HD proteins Lhx9 and Lhx1.</a> Neural Dev. 4 (1), 21 (2009).</li><li>Timmer, J., Johnson, J., Niswander, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+in+ovo+electroporation+for+the+rapid+analysis+of+neural-specific+murine+enhancers.">The use of in ovo electroporation for the rapid analysis of neural-specific murine enhancers.</a> Genesis. 29 (3), 123-132 (2001).</li><li>Reeber, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manipulating+Robo+expression+in+vivo+perturbs+commissural+axon+pathfinding+in+the+chick+spinal+cord.">Manipulating Robo expression in vivo perturbs commissural axon pathfinding in the chick spinal cord.</a> J Neurosci. 28 (35), 8698-8708 (2008).</li></ol>

लड़की भ्रूण में डीएनए प्लाज्मिड के electroporation vivo में अस्थानिक अभिव्यक्ति में एक शक्तिशाली तकनीक के रूप में विकसित. विशिष्ट enhancers, और लड़की electroporation के संयोजन 1,3,5 न्यूरॉन्स की आनुवंशिक रूप से परिभाषित समूह के ...

deciphering axonal pathways of genetically defined groups of neurons in the chick neural tube utilizing in ovo electroporation

रोजगार बढ़ाने तत्वों के न्यूरॉन्स में रिपोर्टर जीन की अभिव्यक्ति ड्राइव axonal प्रक्षेपण पर नज़र रखने के लिए एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया प्रतिमान है. रीढ़ में रीढ़ की हड्डी interneurons की axonal प्रक्षेपण पर नज़र रखने के लिए, रोगाणु लाइन लक्षित रिपोर्टर जीन द्विपक्षीय सममित लेबलिंग उपज. इसलिए, यह ipsi और विपरीत laterally पेश axons के बीच भेद करना मुश्किल है. लड़की न्यूरल ट्यूब में एकतरफा electroporation एक उपयोगी साधन प्रदान करता है केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के एक तरफ करने के लिए एक पत्रकार के जीन की अभिव्यक्ति को सीमित करते हैं, और दोनों पक्षों पर axonal प्रक्षेपण का पालन<sup&gt; ,2 5 - 1</sup&gt;. यह वीडियो पहले दर्शाता है कि कैसे संभाल करने के लिए इंजेक्शन के लिए पहले अंडे. एचएच 18-20 चरण में, डीएनए न्यूरल ट्यूब के त्रिक स्तर में इंजेक्ट किया है, तब टंगस्टन इलेक्ट्रोड समानांतर भ्रूण के लिए रखा जाता है और कम बिजली दालों एक पल्स जनरेटर के साथ प्रशासित रहे हैं. अंडे टेप के साथ बंद है और आगे विकास के लिए एक मशीन में वापस रखा. तीन दिन बाद (E6) रीढ़ की हड्डी भ्रूण से एक खुली किताब की तैयारी के रूप में निकाल दिया जाता है, तय है, और पूरे माउंट एंटीबॉडी धुंधला के लिए कार्रवाई की. दाग रीढ़ की हड्डी स्लाइड पर मुहिम शुरू की है और confocal माइक्रोस्कोपी का उपयोग करते हुए कल्पना.

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Deciphering Axonal Pathways of Genetically Defined Groups of Neurons in the Chick Neural Tube Utilizing in ovo Electroporation

इस वीडियो को दर्शाता है कैसे भ्रूण लड़की रीढ़ की हड्डी उपयोग की हड्डी में न्यूरॉन्स की आनुवंशिक रूप से परिभाषित समूहों के axonal रास्ते कल्पना करने के लिए<em&gt; ओवो में</emविशिष्ट बढ़ाने तत्वों के नियंत्रण के तहत रिपोर्टर जीन&gt; electroporation.

चिकी तंत्रिका ट्यूब उपयोग में न्यूरॉन्स की आनुवंशिक निर्धारित समूह की axonal रास्ते के गूढ़ रहस्य ओवो में Electroporation

Employment of enhancer elements to drive expression of reporter genes in neurons is a widely used paradigm for tracking axonal projection. For tracking ...

Research

JoVE Journal

Biology

Deciphering Axonal Pathways of Genetically Defined Groups of Neurons in the Chick Neural Tube Utilizing in ovo Electroporation

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

एचएच स्टेज 10 चिकन भ्रूण के ओवो Electroporations में

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

Electroporation of Mycobacteria

माइक्रोबैक्टीरिया की electroporation

High efficiency transformation is a major limitation in the study of mycobacteria. The genus Mycobacterium can be difficult to transform; this is mainly ...

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

चिकी भ्रूण में तंत्रिका प्रेरण के लिए परख

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Chick ex ovo Culture and ex ovo CAM Assay: How it Really Works

Chick ex ovo Culture and ex ovo CAM Assay: How it Really Works

चिकी पूर्व ओवो संस्कृति और पूर्व ओवो सीएएम परख: यह कैसे सच में काम करता

Chicken eggs in the early phase of breeding are between in vitro and in vivo systems and provide a vascular test environment not only to study ...

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

भ्रूण की इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए तैयार ड्रोसोफिला भ्रूण दिल ट्यूब

The morphogenesis of the Drosophila  embryonic heart tube has emerged as a valuable model system for studying cell migration, cell-cell adhesion and cell ...

Primary Culture and Plasmid Electroporation of the Murine Organ of Corti. 

प्राथमिक संस्कृति और Corti के murine अंग के प्लाज्मिड electroporation.

In all mammals, the sensory epithelium for audition is located along the spiraling organ of Corti that resides within the conch shaped cochlea of the ...

Live Imaging of Cell Motility and Actin Cytoskeleton of Individual Neurons and Neural Crest Cells in Zebrafish Embryos

व्यक्तिगत Zebrafish भ्रूण में न्यूरॉन्स और तंत्रिका शिखा कोशिकाओं के सेल गतिशीलता और actin cytoskeleton के लाइव इमेजिंग

The zebrafish is an ideal model for imaging cell behaviors during development in vivo. Zebrafish embryos are externally fertilized and thus easily ...

Purification of the M. magneticum Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamA&Delta;41

Purification of the M. magneticum Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamAÃƒÅ½Ã¢â‚¬Â41

के शोधन एम. magneticum तनाव Magnetosome एसोसिएटेड प्रोटीन MamAΔ41-1 AMB

Magnetotactic bacteria comprise a diverse group of aquatic microorganisms that are able to orientate themselves along geomagnetic fields. This behavior is ...

Tracking Morphogenetic Tissue Deformations in the Early Chick Embryo

प्रारंभिक चिकी भ्रूण में Morphogenetic ऊतक विरुपणों ट्रैकिंग

Embryonic epithelia undergo complex deformations (e.g. bending, twisting, folding, and stretching) to form the primitive organs of the early embryo. ...

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

भ्रूण चिकी रेटिना में ओवो electroporation में

Chicken embryonic retina is an excellent tool to study retinal development in higher vertebrates. Because of large size and external development, it is ...