Name: implantation of ferumoxides labeled human mesenchymal stem cells in cartilage defects
Uploaded: 2010-04-05T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Ferumoxides Labeled Human Mesenchymal Stem Cells in Cartilage Defects at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door een subsidie ​​van het Nationaal Instituut van artritis en spier Skin Diseases, NIH RO1AR054458.

1. Etikettering van hMSCs met Endorem <ol><li> Cellen zijn gegroeid tot 80% confluentie ten minste 18 uur voor etikettering. </li><li> Gedurende deze tijd, is het labelen van media bereid door toevoeging van Endorem om het monster op een dosis van 100 ug Fe / ml serum-vrije media. </li><li> Na de cellen worden gekweekt tot confluentie, is cultuur media opgezogen en cellen worden gewassen 1x met PBS of serum-vrije media. </li><li> Vervolgens wordt de spoeling oplossing opgezogen en de vooraf bereide etikettering media ...

<ol>
	<li>Mauck, R. L., Yuan, X., Tuan, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondrogenic+differentiation+and+functional+maturation+of+bovine+mesenchymal+stem+cells+in+long-term+agarose+culture.">Chondrogenic differentiation and functional maturation of bovine mesenchymal stem cells in long-term agarose culture.</a> Osteoarthritis Cartilage. 14, 179-189 (2006).</li><li>Pittenger, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multilineage+potential+of+adult+human+mesenchymal+stem+cells.">Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells.</a> Science. 284, 143-147 (1999).</li><li>Rahfoth, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+of+allograft+chondrocytes+embedded+in+agarose+gel+into+cartilage+defects+of+rabbits.">Transplantation of allograft chondrocytes embedded in agarose gel into cartilage defects of rabbits.</a> Osteoarthritis Cartilage. 6, 50-65 (1998).</li><li>Henning, T. D., Boddington, S., Daldrup-Link, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Labeling+hESCs+and+hMSCs+with+iron+oxide+nanoparticles+for+non-invasive+in+vivo+tracking+with+MR+imaging.">Labeling hESCs and hMSCs with iron oxide nanoparticles for non-invasive in vivo tracking with MR imaging.</a> J Vis Exp. , (2008).</li></ol>

De beschreven protocol voorziet in een reproduceerbare manier om MSC label met ijzeroxide nanodeeltjes en implantaat deze gelabelde MSC&#39;s in het kraakbeen defecten. Deze techniek maakt niet-invasieve weergave van stamceltransplantaties in letsels aan het kraakbeen met MR beeldvorming, die een vroegtijdige detectie van MASI mislukking toestaat. Een dislocatie of efflux van de gelabelde cellen kan worden gediagnosticeerd op basis van een verdwijning van het label van de transplantatie site op MR-beelden. Een vroege di...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>D-MEM High Glucose</td>
<td>Reagent</td>
<td>Sigma</td>
<td>D5648</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PBS (Ca++, Mg++ free)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>GIBCO</td>
<td>14190-144</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin-EDTA 0.05%</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>25399-120</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hyclone</td>
<td>SH30071.03</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Penicillin/Streptomycin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>GIBCO</td>
<td>15140-122</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ferumoxides (Endorem)</td>
<td>
</td>
<td>Guerbet</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Agarose Typ VII</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>A9045</td>
<td>Dilute Agarose in PBS to final concentration of 4%</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

implantation of ferumoxides labeled human mesenchymal stem cells in cartilage defects

Op het gebied van tissue engineering integreert de principes van de engineering, celbiologie en geneeskunde aan de regeneratie van specifieke cellen en functionele weefsel. Matrix geassocieerd stamcelimplantaten (MASI) hebben tot doel kraakbeen defecten als gevolg van artritis of traumatische letsel aan gewrichten te regenereren. Volwassen mesenchymale stamcellen (MSC&#39;s) hebben de mogelijkheid om te differentiëren tot cellen van de chondrogenische afstamming en veelbelovende resultaten laten zien voor cel-gebaseerde kraakbeen te herstellen technologieën. Autologe MSC&#39;s kunnen worden geïsoleerd uit een verscheidenheid van weefsels, kan worden uitgebreid in celculturen zonder verlies van hun differentiatie potentieel, en hebben aangetoond chondrogene differentiatie in vitro en in vivo 1, 2. Om lokale behoud en de levensvatbaarheid van de getransplanteerde MSC&#39;s in kraakbeendefecten bieden, is een steiger nodig, die ook de daaropvolgende differentiatie en proliferatie ondersteunt. De architectuur van de steiger gidsen weefsel vorming en laat de extracellulaire matrix, geproduceerd door de stamcellen, uit te breiden. Eerdere onderzoeken hebben aangetoond dat een 2% agarose steiger kan de ontwikkeling van stabiele hyalien kraakbeen te ondersteunen en veroorzaakt geen immuunreacties 3. Op lange termijn behoud van getransplanteerde stamcellen in MASI is cruciaal voor het herstel van kraakbeen. Etikettering van MSC&#39;s met ijzeroxide nanodeeltjes maakt voor de lange termijn in vivo tracking met niet-invasieve MRI technieken 4. Deze presentatie zal aantonen technieken voor het labelen van MSC&#39;s met ijzeroxide nanodeeltjes, de generatie van cel-agarose constructen en de implantatie van deze constructen in de gebreken van het kraakbeen. De gelabelde constructen kunnen non-invasief worden gevolgd met MR-Imaging.

Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Ferumoxides Labeled Human Mesenchymal Stem Cells in Cartilage Defects at JoVE.com

Implantation of Ferumoxides Labeled Human Mesenchymal Stem Cells in Cartilage Defects

Doel van de presentatie is om aan te tonen een zeer reproduceerbare methode om matrix geassocieerd stamcelimplantaten genereren in kraakbeen defecten, die kunnen worden gevisualiseerd met MRI. Stamcellen zijn gelabeld met de FDA-goedgekeurde Ferumoxides, vermengd met agarose, geïmplanteerd in letsels aan het kraakbeen en afgebeeld met een 7T MR-scanner.

Implantatie van Ferumoxides Gelabelde humane mesenchymale stamcellen in kraakbeenletsels

The field of tissue engineering integrates the principles of engineering, cell biology and medicine towards the regeneration of specific cells and ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells MSCs and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells ECFCs

Isolatie en dierlijk serum vrije expansie van de mens navelstreng Afgeleid Mesenchymale stromale cellen (MSC&#39;s) en Endotheliale Colony Forming progenitor cellen (ECFCs)

The umbilical cord is a rich source for progenitor cells with high proliferative potential including mesenchymal stromal cells (also termed mesenchymal ...

Peptides from Phage Display Library Modulate Gene Expression in Mesenchymal Cells and Potentiate Osteogenesis in Unicortical Bone Defects

Peptiden van faag display bibliotheek Modulate genexpressie in mesenchymale cellen en versterken Osteogenesis in Unicortical Bone Gebreken

Two novel synthetic peptides accelerate bone formation and can be delivered using a collagen matrix. The aim of this study was to investigate the effects ...

Isolation &#38; Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells

Isolation & Characterization of Hoechstlow CD45negative Mouse Lung Mesenchymal Stem Cells

Isolatie &amp; Karakterisering van Hoechst Lage CD45 Negatief Muis Lung Mesenchymale stamcellen

Tissue resident mesenchymal stem cells (MSC) are important regulators of tissue repair or regeneration, fibrosis, inflammation, angiogenesis and tumor ...

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Using Retroviral Vector with GFP

Reprogramming Human Somatic Cells into Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs Using Retroviral Vector with GFP

Herprogrammeren menselijke somatische cellen in geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSCs) Met behulp van retrovirale vector met GFP

Human embryonic stem cells (hESCs) are pluripotent and an invaluable cellular sources for in vitro disease modeling and regenerative medicine1. It has ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

Inductie en analyse van epitheliale naar mesenchymale transitie

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Isolation and Culture of Dental Epithelial Stem Cells from the Adult Mouse Incisor

Isolatie en Cultuur van Dental epitheliale stamcellen van de volwassen muis Incisor

Understanding the cellular and molecular mechanisms that underlie tooth regeneration and renewal has become a topic of great interest1-4, and the mouse ...

Efficient Generation Human Induced Pluripotent Stem Cells from Human Somatic Cells with Sendai-virus

Efficiënte Generation humane geïnduceerde pluripotente stamcellen uit menselijke somatische cellen met Sendai-virus

A few years ago, the establishment of human induced pluripotent stem cells (iPSCs) ushered in a new era in biomedicine. Potential uses of human iPSCs ...

Profiling Individual Human Embryonic Stem Cells by Quantitative RT-PCR

Profilering Individuele menselijke embryonale stamcellen door kwantitatieve RT-PCR

Heterogeneity of stem cell population hampers detailed understanding of stem cell biology, such as their differentiation propensity toward different ...

A Simple Benchtop Filtration Method to Isolate Small Extracellular Vesicles from Human Mesenchymal Stem Cells

Een eenvoudige benchtop-filtratiemethode om kleine extracellulaire blaasjes te isoleren van menselijke mesenchymale stamcellen

The ultracentrifugation-based process is considered the common method for small extracellular vesicles (sEVs) isolation. However, the yield from this ...

Isolation, Characterization, and Therapeutic Application of Extracellular Vesicles from Cultured Human Mesenchymal Stem Cells

Isolatie, karakterisering en therapeutische toepassing van extracellulaire blaasjes uit gekweekte menselijke mesenchymale stamcellen

Extracellular vesicles (EVs) are heterogeneous membrane nanoparticles released by most cell types, and they are increasingly recognized as physiological ...