Name: mammary epithelial transplant procedure
Uploaded: 2010-06-10T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mammary Epithelial Transplant Procedure at JoVE.com

1. Beredning av Transplant Epitel Färska eller frysta givare epitelvävnad kan transplanteras in i rensas fett pad, men före beredning av frysta givare epitel är mer praktiskt med en minimal minskning transplantation effektivitet (&gt; 85% effektivitet). Protokollet för beredning av frysta givare epitel är följande: Innan du förbereder epitel donator transplantation, förbereda frysa media för epitel och delprov om 1 ml till cryovials. Detta kan lagras vid ...

<ol>
	<li>DeOme, K. B., Faulkin, L. J., Bern, H. A., Blair, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+mammary+tumors+from+hyperplastic+alveolar+nodules+transplanted+into+gland-free+mammary+fat+pads+of+female+C3H+mice.">Development of mammary tumors from hyperplastic alveolar nodules transplanted into gland-free mammary fat pads of female C3H mice.</a> Cancer Res. 19, 515-520 (1959).</li><li>Brill, B., Boecher, N., Groner, B., Shemanko, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sparing+procedure+to+clear+the+mouse+mammary+fat+pad+of+epithelial+components+for+transplantation+analysis.">A sparing procedure to clear the mouse mammary fat pad of epithelial components for transplantation analysis.</a> Laboratory Animals. 42, 104-110 (2008).</li><li>Jerry, D. J., Kittrell, F. S., Kuperwasser, C., Laucirica, R., Dickinson, E. S., Bonilla, P. J., Butel, J. S., Medina, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mammary-specific+model+demonstrates+the+role+of+the+p53+tumor+suppressor+gene+in+tumor+development.">A mammary-specific model demonstrates the role of the p53 tumor suppressor gene in tumor development.</a> Oncogene. 19, 1052-1058 (2000).</li><li>Shackleton, M., Vaillant, F., Simpson, K. J., Stingl, J., Smyth, G. K., Asselin-Labat, M. -. L., Wu, L., Lindman, G. J., Visvader, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+functional+mammary+gland+from+a+single+stem+cell.">Generation of a functional mammary gland from a single stem cell.</a> Nature. 439, 84-88 (2006).</li><li>Stingl, J., Eirew, P., Ricketson, I., Shackleton, M., Vaillant, F., Choi, D., Li, H. I., Eaves, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+and+unique+properties+of+mammary+epithelial+stem+cells.">Purification and unique properties of mammary epithelial stem cells.</a> Nature. 439, 993-997 (2006).</li><li>Medina, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preneoplastic+Lesions+in+Murine+Mammary+Cancer.">Preneoplastic Lesions in Murine Mammary Cancer.</a> Cancer Res. 36, 2589-2595 (1976).</li><li>Wagner, K. -. U., Boulanger, C. A., Henry, S. g. a. g. i. a. s., Hennighausen, M., Smith, G. H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+adjunct+mammary+epithelial+cell+population+in+parous+females:+its+role+in+functional+adaptation+and+tissue+renewal.">An adjunct mammary epithelial cell population in parous females: its role in functional adaptation and tissue renewal.</a> Development. 129, 1377-1386 (2002).</li><li>Dunphy, K. A., Blackburn, A. C., Haoheng, Y., O Connell, L. R., Jerry, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+and+progesterone+induce+persistent+increases+in+p53-dependent+apoptosis+and+suppress+mammary+tumors+in+BALB/c-Trp53+/-+mice.">Estrogen and progesterone induce persistent increases in p53-dependent apoptosis and suppress mammary tumors in BALB/c-Trp53+/- mice.</a> Breast Cancer Res. 10 (3), R43-R43 (2008).</li></ol>

I denna rapport presenterar vi två alternativa metoder för att rensa musen juverfett pad som en förberedelse för bröst epitelceller transplantationer. Standarden Förfarandet har varit i bruk sedan dess utveckling 1959 av DeOme et al. 1 Medan mer invasiva, är standard metoden att föredra för att utbilda nybörjare eftersom strukturen och orientering av bröstkörteln är lätt ses. Kan dock bespara förfarande föredras av de mer erfarna kirurgen på grund av flera fördelar 2. Vik...

mammary epithelial transplant procedure

Den här artikeln beskriver och jämför fettet förfarande pad clearance utvecklades av DeOme KB et al. 1 och sparsam förfarande som utvecklats av Brill B et al. 2, följt av bröst epiteliala transplantationen. Det mammary transplantationen används flitigt av bröst biologer eftersom det tar fördel av det faktum att betydande utveckling av bröst epitel inte sker förrän efter puberteten. Vid 3 veckors ålder, är tillväxten av bröst epitelceller trädet begränsat till närheten av bröstvårtan och fettet pad är till stor del saknar bröst epitel, men med 7 veckors ålder epitelceller duktal trädet sträcker sig genom hela fet pad. Därför, om denna lilla del av fettet pad innehåller epitel är området mellan bröstvårtan och lymfkörtel, tas bort vid 3 veckors ålder, kommer den endogena epitelet befolkar aldrig juverfett pad och fettet pad beskrivs som &quot;rensas &quot;. Vid denna tid, kan bröst epitel från en annan källa ska transplanteras i rensas fett pad där den har potential att förlänga mammary duktal träd genom ut fettet pad. Detta förfarande har utnyttjats i många experimentella modeller inklusive granskning av tumör fenotyp i transgena bröst epitelvävnad utan störande inverkan av genotyp på hela djuret 3, identifiering av bröst stamceller genom att transplantera celler i begränsad utspädning 4,5, bestämma Om hyperplastiska knutor vidare till juvertumörer 6, och för att utvärdera effekten av tidigare hormonexponering på beteendet hos de mammary epitel 7,8. Tre veckor gamla värd möss är bedövad, rengöras och återhållsam på en kirurgisk scen. En utvärdering efter halva sagittal snitt görs genom huden, men inte bukhinnan, sträcker sig från pubis till bröstbenet. Snedställda snitt görs genom huden från mitten av sagittal snitt över bäckenet mot varje ben. Huden dras bort från bukhinnan att exponera den 4: e ljumsk bröstkörtlarna. Fettet pad rensas genom att ta bort fettet främre pad vävnad till lymfkörtel. Epitel fragment eller epitelceller transplanteras in i rensas resterande fettet pad och musen är stängd.

Watch this Scientific Journal Video about Mammary Epithelial Transplant Procedure at JoVE.com

Mammary Epithelial Transplant Procedure

Den här artikeln visar det förfarande som utvecklats av DeOme KB<em&gt; Et al.</em&gt; (1959) och sparsam förfarande som utvecklats av Brill B<em&gt; Et al.</em&gt; (2008) för att rensa den 4: e ljumsk juverfett pad av en ludna mus inför transplantation av bröst fragment, bröst epitelceller, eller bröst tumörceller.

Bröst Epithelial transplantationen

This article describes and compares the fat pad clearance procedure developed by DeOme KB et al.1 and the sparing procedure developed by Brill B et al.2, ...

Research

JoVE Journal

Biology

Investigating the Immunological Mechanisms Underlying Organ Transplant Rejection

Undersöka vilka immunologiska mekanismer bakom avstötning av transplanterade organ

Murine Renal Transplantation Procedure

Murina njurtransplantation Förfarande

Renal orthotopic transplantation in mice is a technically challenging procedure. Although the first kidney transplants in mice were performed by Russell ...

In vivo Bioluminescent Imaging of Mammary Tumors Using IVIS Spectrum

In vivo Bioluminescent Imaging of Mammary Tumors Using IVIS Spectrum

In vivo Bioluminescent Imaging för juvertumörer Använda IVIS Spectrum

4T1 mouse mammary tumor cells can be implanted sub-cutaneously in nu/nu mice to form palpable tumors in 15 to 20 days. This xenograft tumor model system ...

Mouse Mammary Epithelial Cells form Mammospheres During Lactogenic Differentiation

Mus bröst epitelceller formen Mammospheres Under Lactogenic Differentiering

A phenotypic measure commonly used to determine the degree of lactogenic differentiation in mouse mammary epithelial cell cultures is the formation of ...

Dendra2 Photoswitching through the Mammary Imaging Window

Dendra2 Photoswitching genom bröst Imaging Fönster

In the last decade, intravital microscopy of breast tumors in mice and rats at single-cell resolution1-4  has resulted in important insights into ...

Right Hemihepatectomy by Suprahilar Intrahepatic Transection of the Right Hemipedicle using a Vascular Stapler

Rätt Hemihepatectomy av Suprahilar Intrahepatisk transection av Right Hemipedicle med en vaskulär häftapparat

Successful hepatic resection requires profound anatomical knowledge and delicate surgical technique. Hemihepatectomies are mostly performed after ...

Tissue Determination Using the Animal Cap Transplant (ACT) Assay in Xenopus laevis

Tissue Determination Using the Animal Cap Transplant ACT Assay in Xenopus laevis

Tissue Fastställande Använda Transplant Animal Cap (ACT) analys i Xenopus laevis</em

Many proteins play a dual role in embryonic development. Those that regulate cell fate determination in a specific tissue can also affect the development ...

Evaluation of Mammary Gland Development and Function in Mouse Models

Utvärdering av bröstkörtlarna utveckling och funktion i musmodeller

The human mammary gland is composed of 15-20 lobes that secrete milk into a branching duct system opening at the nipple. Those lobes are themselves ...

Isolation of Mammary Epithelial Cells from Three-dimensional Mixed-cell Spheroid Co-culture

Isolering av bröstepitelialceller celler från tre-dimensionell Mixed-cell sfäroid Co-kultur

While enormous efforts have gone into identifying signaling pathways and molecules involved in normal and malignant cell behaviors1-2, much of this work ...

Chromatin Isolation by RNA Purification (ChIRP)

Chromatin Isolation by RNA Purification ChIRP

Kromatin Isolering av RNA Rening (chirp)

Long noncoding RNAs are key regulators of chromatin states for important biological processes such as dosage compensation, imprinting, and developmental ...