Name: a model of disturbed flow-induced atherosclerosis in mouse carotid artery by partial ligation and a simple method of rna isolation from carotid endothelium
Uploaded: 2010-06-22T17:30:00
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<p class="jove_content"> Ce travail a été soutenu par un financement provenant de subventions des NIH HL87012 (HJ), HL75209 (HJ), UO1HL80711 (DH, DG, HJ) et une université de classe mondiale aux projets (HJ) du ministère de la Science, la Technologie et de l&#39;Education de S. Corée. </p>

<p class="jove_title"> 1. Ligature partielle de l&#39;artère carotide gauche </p><ol><li> Les souris sont utilisées à ~ 8 semaines d&#39;âge. Le poids de la souris est recommandé d&#39;avoir au moins 18 grammes. </li><li> Stériliser les instruments pour les 30 secondes dans le stérilisateur à l&#39;instrument de perles et laisser refroidir </li><li> Induire une anesthésie à la kétamine (80mg/kg) et de xylazine (10mg/kg) anesthésie intrapéritonéale (ip) par injection ou alternative approuvée par IACUC. Pour une injection ip, injec...

<ol>
	<li>Korshunov, V. A., Berk, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow-induced+vascular+remodeling+in+the+mouse:+a+model+for+carotid+intima-media+thickening.">Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening.</a> <em style='font-style: italic'>Arterioscler Thromb Vasc Biol</em>. <b>23</b> (12), 2185-2191 (2003).</li><li>Sullivan, C. J., Hoying, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow-dependent+remodeling+in+the+carotid+artery+of+fibroblast+growth+factor-2+knockout+mice.">Flow-dependent remodeling in the carotid artery of fibroblast growth factor-2 knockout mice.</a> <em style='font-style: italic'>Arterioscler Thromb Vasc Biol</em>. <b>22</b> (7), 1100-1105 (2002).</li><li>Nam, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow,+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis.">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> <em style='font-style: italic'>Am J Physiol Heart Circ Physiol</em>. <b>297</b> (4), H1535-H1543 (2009).</li></ol>

<p class="jove_content"> Dans cette procédure, l&#39;identification correcte de toutes les branches de la carotide commune, y compris la carotide externe, la carotide interne, artère occipitale et l&#39;artère thyroïdienne supérieure est essentielle. Il est également important de vérifier la configuration de l&#39;écoulement en utilisant des ultrasons comme l&#39;a démontré. Dans nos mains expérimentés, notre taux de succès des chirurgies ligature partielle sur la base des études de l&#39;échographie de plus de 500 souris est sup...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Normal Saline (0.9% sodium chloride)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Baxter</td>
<td>2B1323</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin syringe (3/10 ml 29g syringe)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tyco Health care</td>
<td>8881600145</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro, Mediatech, Inc.</td>
<td>21-023</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>miRNeasy mini kit (including, QIAzol)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>QIAGEN</td>
<td>217004</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vevo 770 High-Resolution Micro-Imaging System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Visualsonics</td>
<td>a.Visualsonics 770 system<br />b.Imaging stage<br />c.Vevo integrated rail system<br />d.RMV scan head for mice</td>
<td>or similar system</td>
</tr>
<tr>
<td>6-0 Silk Suture, sterile</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Covidien</td>
<td>s-1172 c2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Small scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5675</td>
<td>or similar</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissecting Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5005</td>
<td>or similar</td>
</tr>
<tr>
<td>Tissue Mend II</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Webster Vet Supply</td>
<td>07-856-7946</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

a model of disturbed flow-induced atherosclerosis in mouse carotid artery by partial ligation and a simple method of rna isolation from carotid endothelium

<p class="jove_content">Malgré l&#39;association connue près, les preuves directes reliant écoulement perturbé à l&#39;athérogenèse a fait défaut. Nous avons récemment utilisé une version modifiée de la carotide méthodes ligature partielle [1,2] pour montrer qu&#39;il induit gravement les conditions de faible débit et oscillatoire, deux caractéristiques essentielles du flux perturbé, chez la souris l&#39;artère carotide commune. En utilisant ce modèle, nous avons fourni des preuves directes qui en découlent perturbée conduit en effet au développement rapide et robuste athérosclérose chez la souris knockout apolipoprotéine E [3]. Nous avons également développé une méthode de préparation de l&#39;ARN endothéliales avec une grande pureté de l&#39;intima carotidienne la souris [3]. L&#39;utilisation de ce modèle de souris et de la méthode, nous avons constaté que la ligature partielle entraîne une dysfonction endothéliale en une semaine, suivie de la formation d&#39;athérome robuste et rapide de deux semaines dans un modèle de souris hyperlipidémiques ainsi que des fonctions de formation de lésions complexes tels que la néovascularisation intraplaque de quatre semaines. Ce rapide<em&gt; In vivo</em&gt; Modèle et la méthode de préparation endothéliales ARN pourrait être utilisée pour déterminer les mécanismes moléculaires sous-jacents des flux régulation dépendante de la biologie vasculaire et les maladies. Aussi, il pourrait être utilisé pour tester différentes interventions thérapeutiques ciblant la dysfonction endothéliale et l&#39;athérosclérose de la durée d&#39;étude considérablement réduit.</p>

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A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

<p class="jove_content">Ceci décrit une ligature partielle carotide, ce qui provoque des conditions d&#39;écoulement perturbé et développement de l&#39;athérosclérose ultérieure (dans deux semaines) avec intraplaque néo-vascularisation (en quatre semaines) chez la souris l&#39;artère carotide commune. Nous décrivons également une nouvelle méthode d&#39;isolement d&#39;ARN à partir de l&#39;intima carotidienne, fournissant ARN haute pureté endothéliales.</p>

Un modèle de Disturbed flux athérosclérose induite chez la souris artère carotide par ligature partielle et une méthode simple d&#39;isolement d&#39;ARN de l&#39;endothélium carotidienne

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

Implantation d&#39;une manchette carotidienne pour le déclenchement de cisaillement-stress athérosclérose induite chez la souris

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce ...

Recherche

Médecine

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Former une technique microchirurgicale sophistiquée: Interposition de greffe veine jugulaire externe dans l&#39;artère carotide commune chez les rats

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Un modèle murin d&#39;implantation d&#39;une endoprothèse dans l&#39;artère carotide pour l&#39;étude de la resténose

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

Une méthode simple d&#39;intubation poumon de souris

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

Adulte souris veineuse Modèle d&#39;hypertension: l&#39;artère carotide commune à externe Veine jugulaire anastomose.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Infusions de l&#39;artère carotide pour pharmacocinétiques et pharmacodynamiques Analyse des taxanes chez la souris

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

Vasculaire Balloon blessures et de l&#39;administration chez le rat Intraluminal artère carotide

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Chlorure ferrique induite souris thrombose type sur l&#39;artère carotide et Mesentery navire

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

<em>In Vivo</em> Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

<em>In Vivo</em> Transfert de gènes à l’endothélium de l’artère carotide commune lapin

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Un modèle de lapin d’Expression du transgène durables dans la veine jugulaire à des greffes d’Interposition artère carotide commune

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...