Name: a model of disturbed flow-induced atherosclerosis in mouse carotid artery by partial ligation and a simple method of rna isolation from carotid endothelium
Uploaded: 2010-06-22T17:30:00
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<p class="jove_content"> Questo lavoro è stato supportato da finanziamenti dal NIH concede HL87012 (HJ), HL75209 (HJ), UO1HL80711 (DH, DG, HJ) e una World Class University Project (HJ) da parte del Ministero di Scienza, Tecnologia e Istruzione della Corea del Sud. </p>

<p class="jove_title"> 1. Legatura parziale della carotide sinistra </p><ol><li> I topi sono utilizzati a ~ 8 settimane di età. Il peso dei topi si raccomanda di avere almeno 18 grammi. </li><li> Sterilizzare gli strumenti per 30 secondi in sterilizzatore strumento tallone e lasciare raffreddare </li><li> Indurre l&#39;anestesia con ketamina (80mg/kg) e xilazina (10mg/kg) anestesia intraperitoneale (ip) iniezione o alternative come approvato dalla IACUC. Per l&#39;iniezione ip, iniettare del mouse nel quadrante in basso a sinistra dell&#39;add...

<ol>
	<li>Korshunov, V. A., Berk, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow-induced+vascular+remodeling+in+the+mouse:+a+model+for+carotid+intima-media+thickening.">Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening.</a> <em style='font-style: italic'>Arterioscler Thromb Vasc Biol</em>. <b>23</b> (12), 2185-2191 (2003).</li><li>Sullivan, C. J., Hoying, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow-dependent+remodeling+in+the+carotid+artery+of+fibroblast+growth+factor-2+knockout+mice.">Flow-dependent remodeling in the carotid artery of fibroblast growth factor-2 knockout mice.</a> <em style='font-style: italic'>Arterioscler Thromb Vasc Biol</em>. <b>22</b> (7), 1100-1105 (2002).</li><li>Nam, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow,+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis.">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> <em style='font-style: italic'>Am J Physiol Heart Circ Physiol</em>. <b>297</b> (4), H1535-H1543 (2009).</li></ol>

<p class="jove_content"> In questa procedura, corretta identificazione di tutti i rami della carotide comune tra cui la carotide esterna, carotide interna, arteria occipitale e l&#39;arteria tiroidea superiore è essenziale. E &#39;anche importante per verificare il modello di flusso utilizzando gli ultrasuoni, come dimostrato. Nelle nostre mani esperte, il nostro tasso di successo di interventi chirurgici legatura parziale basati sugli studi ecografia di più di 500 topi è migliore del 90%. Per la preparazione di RNA intimale carotideo, è im...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Normal Saline (0.9% sodium chloride)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Baxter</td>
<td>2B1323</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin syringe (3/10 ml 29g syringe)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tyco Health care</td>
<td>8881600145</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro, Mediatech, Inc.</td>
<td>21-023</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>miRNeasy mini kit (including, QIAzol)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>QIAGEN</td>
<td>217004</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vevo 770 High-Resolution Micro-Imaging System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Visualsonics</td>
<td>a.Visualsonics 770 system<br />b.Imaging stage<br />c.Vevo integrated rail system<br />d.RMV scan head for mice</td>
<td>or similar system</td>
</tr>
<tr>
<td>6-0 Silk Suture, sterile</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Covidien</td>
<td>s-1172 c2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Small scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5675</td>
<td>or similar</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissecting Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5005</td>
<td>or similar</td>
</tr>
<tr>
<td>Tissue Mend II</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Webster Vet Supply</td>
<td>07-856-7946</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

a model of disturbed flow-induced atherosclerosis in mouse carotid artery by partial ligation and a simple method of rna isolation from carotid endothelium

<p class="jove_content">Nonostante la ben nota stretta associazione, la prova diretta che collega il flusso disturbato per l&#39;aterogenesi è mancata. Recentemente abbiamo usato una versione modificata della carotide metodi di legatura parziale [1,2] per mostrare che induce acutamente condizioni di basso flusso e oscillatori, due caratteristiche fondamentali del flusso disturbato, nel topo l&#39;arteria carotide comune. Utilizzando questo modello, abbiamo fornito la prova diretta che il flusso disturbato porta infatti allo sviluppo dell&#39;aterosclerosi rapido e robusto nel topo knockout Apolipoproteina E [3]. Abbiamo anche sviluppato un metodo di preparazione endoteliale RNA con elevata purezza dalla carotide del mouse intima [3]. Utilizzando questo modello di topo e il metodo, abbiamo scoperto che la legatura parziale le cause della disfunzione endoteliale in una settimana, seguito dalla formazione dell&#39;ateroma robusto e rapido in due settimane in un modello murino iperlipidemici oltre a funzionalità di formazione di lesioni complesse, come neovascolarizzazione intraplaque da quattro settimane. Questa rapida<em&gt; In vivo</emModello&gt; e il endoteliale metodo di preparazione di RNA potrebbero essere utilizzati per determinare i meccanismi molecolari alla base del flusso-dipendente regolazione della biologia vascolare e malattie. Inoltre, potrebbe essere usato per testare diversi interventi terapeutici targeting disfunzione endoteliale e aterosclerosi nella durata dello studio considerevolmente ridotto.</p>

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A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

<p class="jove_content">Questo descrive un intervento parziale legatura della carotide, che causa condizioni di flusso disturbato e lo sviluppo dell&#39;aterosclerosi successivi (in due settimane) con intraplaque neo-vascolarizzazione (in quattro settimane) nel topo l&#39;arteria carotide comune. Abbiamo anche descritto un nuovo metodo di isolamento di RNA dal dell&#39;intima carotidea, fornendo RNA di elevata purezza endoteliali.</p>

Un modello di Disturbed flusso indotta aterosclerosi carotidea in Arteria mouse da legatura parziale e un semplice metodo di isolamento dell&#39;RNA da Endotelio carotidea

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

Impianto di un bracciale carotidea per innescare Shear-stress aterosclerosi indotta in topi

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce ...

Ricerca

Medicina

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

La formazione di una sofisticata tecnica microchirurgica: Interposizione della vena giugulare esterna innesto nella carotide comune in Rats

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Un modello murino di impianto di stent a livello dell&#39;arteria carotidea per lo Studio della restenosi

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

Un metodo semplice di intubazione mouse polmone

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

Topo adulto venosa Ipertensione Modello: carotide comune di External Vena giugulare anastomosi.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Infusi carotide di farmacocinetica e di farmacodinamica Analisi dei taxani nei topi

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

Vascolare Balloon Lesioni e intraluminale Amministrazione in Rat carotide

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Cloruro ferrico-indotta Trombosi modello murino sulla carotide e Mesentere Vessel

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

<em>In Vivo</em> Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

<em>In Vivo</em> Trasferimento del gene per l'endotelio dell'arteria carotica comune di coniglio

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Un modello del coniglio di espressione del Transgene durevole nella vena giugulare di innesti di interposizione dell'arteria carotica comune

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...