Name: a model of disturbed flow-induced atherosclerosis in mouse carotid artery by partial ligation and a simple method of rna isolation from carotid endothelium
Uploaded: 2010-06-22T17:30:00
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<p class="jove_content"> Este trabajo fue apoyado por la financiación de los NIH subvenciones HL87012 (HJ), HL75209 (HJ), UO1HL80711 (DH, DG, HJ) y un proyecto de clase mundial de la Universidad (HJ) del Ministerio de Ciencia, Tecnología y Educación de Corea del Sur. </p>

<p class="jove_title"> 1. La ligadura parcial de la arteria carótida izquierda </p><ol><li> Los ratones son utilizados en ~ 8 semanas de edad. El peso de los ratones se recomienda tener al menos 18 gramos. </li><li> Esterilizar los instrumentos durante 30 segundos en el esterilizador de instrumentos de cuentas y deje que se enfríe </li><li> Inducir la anestesia con ketamina (80mg/kg) y xilazina (10mg/kg) anestesia intraperitoneal (ip) o una alternativa aprobada por IACUC. Para la inyección ip, inyectar ratón en el cuadrante inferior izquier...

<ol>
	<li>Korshunov, V. A., Berk, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow-induced+vascular+remodeling+in+the+mouse:+a+model+for+carotid+intima-media+thickening.">Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening.</a> <em style='font-style: italic'>Arterioscler Thromb Vasc Biol</em>. <b>23</b> (12), 2185-2191 (2003).</li><li>Sullivan, C. J., Hoying, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow-dependent+remodeling+in+the+carotid+artery+of+fibroblast+growth+factor-2+knockout+mice.">Flow-dependent remodeling in the carotid artery of fibroblast growth factor-2 knockout mice.</a> <em style='font-style: italic'>Arterioscler Thromb Vasc Biol</em>. <b>22</b> (7), 1100-1105 (2002).</li><li>Nam, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow,+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis.">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> <em style='font-style: italic'>Am J Physiol Heart Circ Physiol</em>. <b>297</b> (4), H1535-H1543 (2009).</li></ol>

<p class="jove_content"> En este procedimiento, la identificación adecuada de todas las ramas de la carótida común, incluyendo la carótida externa, la carótida interna, arteria occipital y la arteria tiroidea superior es esencial. También es importante verificar el patrón de flujo con ultrasonido como se ha demostrado. En nuestras manos experimentadas, nuestra tasa de éxito de las cirugías de ligadura parcial basado en los estudios de ultrasonido de más de 500 ratones es superior al 90%. De la carótida íntima preparaciones de ARN, e...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Normal Saline (0.9% sodium chloride)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Baxter</td>
<td>2B1323</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin syringe (3/10 ml 29g syringe)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tyco Health care</td>
<td>8881600145</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cellgro, Mediatech, Inc.</td>
<td>21-023</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>miRNeasy mini kit (including, QIAzol)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>QIAGEN</td>
<td>217004</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vevo 770 High-Resolution Micro-Imaging System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Visualsonics</td>
<td>a.Visualsonics 770 system<br />b.Imaging stage<br />c.Vevo integrated rail system<br />d.RMV scan head for mice</td>
<td>or similar system</td>
</tr>
<tr>
<td>6-0 Silk Suture, sterile</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Covidien</td>
<td>s-1172 c2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Small scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5675</td>
<td>or similar</td>
</tr>
<tr>
<td>Dissecting Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Roboz</td>
<td>RS-5005</td>
<td>or similar</td>
</tr>
<tr>
<td>Tissue Mend II</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Webster Vet Supply</td>
<td>07-856-7946</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

a model of disturbed flow-induced atherosclerosis in mouse carotid artery by partial ligation and a simple method of rna isolation from carotid endothelium

<p class="jove_content">A pesar de la estrecha asociación conocida, evidencia la vinculación directa alteración del flujo de la aterogénesis ha estado ausente. Recientemente, hemos utilizado una versión modificada de la carótida métodos de ligadura parcial [1,2] para demostrar que forma aguda induce condiciones de flujo bajo y oscilante, dos características fundamentales de la alteración del flujo, en el ratón de la arteria carótida común. El uso de este modelo, hemos proporcionado evidencia directa de que el flujo alterado de hecho conduce a un desarrollo rápido y robusto aterosclerosis en ratones apolipoproteína E nocaut [3]. También hemos desarrollado un método de preparación de ARN endoteliales de alta pureza a partir de la íntima carotídea ratón [3]. El uso de este modelo de ratón y el método, se encontró que la ligadura parcial provoca la disfunción endotelial en una semana, seguido por la formación de ateroma robusto y rápido de dos semanas en un modelo de ratón hiperlipidémicos junto con las características de la formación de lesiones complejas, como la neovascularización intraplaca por cuatro semanas. Esta rápida<em&gt; In vivo</emModelo&gt; y el endotelio método de preparación de ARN podría ser utilizado para determinar los mecanismos moleculares subyacentes de flujo dependen de la regulación de la biología y las enfermedades vasculares. Además, podría ser utilizado para poner a prueba diversas intervenciones terapéuticas dirigidas a la disfunción endotelial y aterosclerosis en la duración del estudio reducido considerablemente.</p>

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A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

<p class="jove_content">Esto describe una cirugía de ligadura de la carótida parcial, lo que provoca trastornos condiciones de flujo y posterior desarrollo de la aterosclerosis (en dos semanas) con intraplaca neovascularización (en cuatro semanas) en el ratón de la arteria carótida común. También describe un nuevo método de aislamiento de ARN de la carótida íntima, proporcionando ARN de alta pureza endoteliales.</p>

Un modelo de Disturbed inducida por el flujo de Aterosclerosis en la arteria carótida del ratón por la ligadura parcial y un método sencillo para el aislamiento de ARN del endotelio carótida

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

Implantación de un manguito de la carótida para provocar esfuerzo cortante aterosclerosis inducida en ratones

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce ...

Investigación

Medicina

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

La formación de una sofisticada técnica de microcirugía: La interposición de injerto de la vena yugular externa en la arteria carótida común en ratas

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Un modelo murino de la implantación de un stent en la arteria carótida para el Estudio de la reestenosis

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

Un sencillo método de intubación ratón de pulmón

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

Adultos Mouse hipertensión venosa: Modelo: arteria carótida común a la vena yugular externa anastomosis.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Infusiones de la arteria carótida para farmacocinéticas y farmacodinámicas Análisis de taxanos en ratones

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Vascular Balloon Injury and Intraluminal Administration in Rat Carotid Artery

Lesión Vascular Globo y Administración intraluminal en rata arteria carótida

The carotid artery balloon injury model in rats has been well established for over two decades. It remains an important method to study the molecular and ...

Ferric Chloride-induced Thrombosis Mouse Model on Carotid Artery and Mesentery Vessel

Trombosis modelo de ratón de la arteria carótida y Mesenterio Embarcaciones inducida por cloruro férrico-

Severe thrombosis and its ischemic consequences such as myocardial infarction, pulmonary embolism and stroke are major worldwide health issues. The ferric ...

<em>In Vivo</em> Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

<em>En Vivo</em> Transferencia génica en el endotelio de la arteria carótida común conejo

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Un modelo de conejo de expresión del transgen Durable en la vena yugular a los injertos de interposición de la arteria carótida común

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...