Name: organotypic culture of adult rabbit retina
Uploaded: 2007-04-29T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Organotypic Culture of Adult Rabbit Retina at JoVE.com

Göra gen pistol kulor (GOLD) <ol><li> Gör 100X PVP (0.5mg/ml) i 100% EtOH. </li><li> Väg upp 30 mg BioRad 1,6 Micron microcarrier guld och placera den i ett 1,5 ml Eppendorf-rör. </li><li> Beräkna plasmiden behövs för att ge en koncentration av 0,5-3 mikrogram plasmid / mg guld, och placera plasmid i röret med guld microcarriers. Kombinera flera plasmider om det behövs. </li><li> Ta volym av plasmid till 100 l med destillerat vatten. </li><li> Tillsätt 100 ìl 0,05 spermidine i röret. Vortexröret 30 sekunde...

<ol>
	<li>Landreth, . B. W., Agranoff, N. R., Smalheiser, S. M., Crain, M. B., Bornstein, R., Adler, P. J., Magistretti, A. G., Hyndman, W. J., Shoemaker, H., Rehm, T., Schafer, H., Betz, S. U., Kim, H., Takahashi, A. R., Caffe, A., Soderpalm, T., van Veen, H. C., Wong, S., Thompson, D. Y., Yu, S. J., Cringle, V. A., Alder, S. J., Taylor, G. M., Seigel, A. R., Caffe, P., Ahuja, B., Holmqvist, S., Azadi, J., Forsell, I., Holmqvist, J., Hatakeyama, R., Kageyama, S. S., Zhang, X. Y., Fu, C. J., Barnstable, S. W., Wang, X., Mu, W. J., Bowers, W. H., Klein, T., Inoue, M., Hojo, Y., Bessho, Y., Tano, J., Lee, R., Kageyama, A., Kretz, S. H., Hermening , S., Isenmann , I., Liljekvist-Larsson, K., Johansson, B., Reidel, W., Orisme, T., Goldmann, W. C., Smith, U., Wolfrum, H., Xin, J. A., Yannazzo, R. S., Duncan, E. V., Gregg, M., Singh, P., Koulen, S. A., Johnston, D. C., Tang, D. C., Lo, A. K., McAllister, K. a. t. z., LC, L. E., Rajagopalan, J. S., Malter, A. K., McAllister, W. -. B., Gan, J., Grutzendler, W., Wong, R., Wong, J., Lichtman, H., Sato, S., Hattori, S., Kawamoto, I., Kudoh, A., Hayashi, I., Yamamoto, G., Zhang, M. E., Selzer, R. L., Sohn, M. T., Murray, K., Schwarz, J., Nyitray, P., Purray, A. P., Franko, J. A., O'Brien, M., Holt, G., Whiteside, S. C., Lummis, M. H., Hastings, L., Klimaschewski, W., Nindl, M., Pimpl, P., Waltinger, K., Pfaller, P., Kettunen, J., Demas, C., Lohmann, N., Kasthuri, Y., Gong, R. O., Wong, N., Gamper, M. S., Shapiro, M. J., Wirth, P., Wahle, J., O'Brien, S. C., Lummis, A. M., Benediktsson, S. J., Schachtele, S. H., Green, M. E., Dailey, L., Chow, E. M., Levine, T. A., Reh, R. L., Rockhill, F. J., Daly, M. A., MacNeil, S. P., Brown, R. H., Masland, W., Sun, N., Li, S., He, W., Sun, N., Li, S., He, R. C., Stacy, R. O., Wong, E., Strettoi, V., Pignatelli, C., Rossi, V., Porciatti, B., Falsini, V., Pignatelli, E., Strettoi, V. P., Connaughton, D., Graham, R., Nelson, P. H., Edqvist, F., Hallbook, T. C., Jakobs, R. T., Libby, Y., Ben, S. W., John, R. H., Masland, Y., Qin, G., Xu, W., Wang, R., Roizenblatt, J. D., Weiland, S., Carcieri, G., Qiu, M., Behrend, M. S., Humayun, A., Koizumi, G., Zeck, Y., Ben, R. H., Masland, T. C., Jakobs, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Explant+culture+of+adult+goldfish+retina:+a+model+for+the+study+of+CNS+regeneration.">Explant culture of adult goldfish retina: a model for the study of CNS regeneration.</a> Brain Res. 161, 39-55 (1979).</li></ol>

1. Vad kan jag göra med den här metoden? <ul><li> Se cellmorfologin tydligt. </li><li> Label celler för att spela in från dem. </li><li> Överuttrycker proteiner, som PSD95, men även andra proteiner som modulera cellens svar, t.ex. jonkanaler, receptorer. </li><li> Express hämmande RNA. </li></ul> 2. Hur länge kan jag hålla vuxen näthinnan? <ul><li> 4 dagar är inget problem för vuxna kaniner. Efter sex dagar i cellerna ser &quot;sjuka&quot;, dvs axoner tillbaka, ser du svullnad av dendriter och registrering av lätta s...

organotypic culture of adult rabbit retina

Organotypic kultur system av funktionella neuronala vävnader är viktiga verktyg i neurobiologisk forskning. Helst bör ett sådant system är förenligt med avbildningstekniker, genetisk manipulation, och elektrofysiologiska inspelning. Här presenterar vi ett enkelt interfas systemet vävnadsodling för vuxna kanin näthinna som inte kräver någon särskild utrustning och mycket lite underhåll. Vi visar de dissekering och inkubering av kanin näthinna och partikel-medierad genöverföring av plasmider kodning GFP eller en variation av subcellulära markörer i retinal ganglion celler. Kanin näthinnor odlade på detta sätt kan hållas vid liv i upp till 6 dagar med mycket små förändringar i den övergripande anatomiska struktur eller morfologi av enskilda ganglion-och amakrina celler.

Watch this Scientific Journal Video about Organotypic Culture of Adult Rabbit Retina at JoVE.com

Organotypic Culture of Adult Rabbit Retina

Denna artikel visar dissekering och inkubering av kanin näthinna och partikel-medierad genöverföring av plasmider kodning GFP eller en variation av subcellulära markörer i retinal ganglion celler.

Organotypic kultur Adult Rabbit Retina

Organotypic culture systems of functional neural tissues are important tools in neurobiological research. Ideally, such a system should be compatible with ...

Research

JoVE Journal

Biology

Horizontal Slice Preparation of the Retina

Horisontell Skiva Beredning av näthinnan

Traditionally the vertical slice and the whole-mount preparation of the retina have been used to study the function of retinal circuits. However, many of ...

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

Organotypic Slice Kultur av E18 råttors hjärnor

Organotypic slice cultures from embryonic rodent brains are widely used to study brain development. While there are often advantages to an in-vivo system, ...

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

Primär kultur Vuxen myocyter Rat hjärta

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

In vivo-like Organotypic Murine Retinal Wholemount Culture

In vivo-like Organotypic Murine Retinal Wholemount Culture

In vivo-liknande Organotypic Murine Retinal Wholemount Kultur

Targeted ablations of genes and analysis of animal models is the classical strategy for enrolling specific retinal gene function. However, transgenic, ...

Adult and Embryonic Skeletal Muscle Microexplant Culture and Isolation of Skeletal Muscle Stem Cells

Adulta och embryonala skelettmuskler Microexplant Kultur och Isolering av skelettet muskelceller Stem

Cultured embryonic and adult skeletal muscle cells have a number of different uses. The micro-dissected explants technique described in this chapter is a ...

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

Isolering och odling av vuxna Epithelial stamceller från mänskliga Skin

The homeostasis of all self-renewing tissues is dependent on adult stem cells. As undifferentiated stem cells undergo asymmetric divisions, they generate ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo elektroporering av Morpholinos i Adult Zebrafish Retina

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

Isolation and Culture of Individual Myofibers and their Satellite Cells from Adult Skeletal Muscle

Isolering och odling av individuella Myofibers och deras satellit celler från vuxna skelettmuskulatur

Muscle  regeneration in the adult is performed by resident stem cells called satellite  cells. Satellite cells are defined by  their position between the ...

Isolation, Culture, and Functional Characterization of Adult Mouse Cardiomyoctyes

Isolering, kultur, och funktionell karakterisering av vuxen mus Cardiomyoctyes

The use of primary cardiomyocytes (CMs) in culture has provided a powerful complement to murine models of heart disease in advancing our understanding of ...

Isolation and Culture of Dental Epithelial Stem Cells from the Adult Mouse Incisor

Isolering och kultur av Dental epitelceller stamceller från vuxen mus Incisor

Understanding the cellular and molecular mechanisms that underlie tooth regeneration and renewal has become a topic of great interest1-4, and the mouse ...