Name: linearization of the bradford protein assay
Uploaded: 2010-04-12T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Linearization of the Bradford Protein Assay at JoVE.com

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> وتكرس هذه الورقة لذكرى الراحل Selinger الدكتور تسفي ، الذي استضاف البحوث الأصلية وصفها هنا. </p>

<p class="jove_title" style=";text-align:right;direction:rtl"> الخطية للمعايرة برادفورد رسم بياني البروتين : </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> ويستخدم على نطاق واسع الرائعة Coomassie مقايسة البروتين الأزرق ، والمعروفة عموما باسم مقايسة برادفورد <sup>1</sup> ، بسبب البروتوكول الملحق بها سريعة ومريحة وكذلك حساسيته النسبية. للأسف ، هناك...

<ol>
	<li>Bradford, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+sensitive+method+for+the+quantitation+of+microgram+quantities+of+protein+utilizing+the+principle+of+protein-dye+binding.">A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>72</b>, 248-254 (1976).</li><li>Chial, H. J., Thompson, H. B., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spectral+study+of+the+charge+forms+of+Coomassie+blue+G.">A spectral study of the charge forms of Coomassie blue G.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>209</b>, 258-266 (1993).</li><li>Chial, H. J., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+binding+of+Coomassie+brilliant+blue+to+proteins+at+low+and+neutral+pH.">A comparison of the binding of Coomassie brilliant blue to proteins at low and neutral pH.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>213</b>, 362-369 (1993).</li><li>Compton, S. J., Jones, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+dye+response+and+interference+in+the+Bradford+protein+assay.">Mechanism of dye response and interference in the Bradford protein assay.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>151</b>, 369-374 (1985).</li><li>Congdon, R. W., Muth, G. W., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+binding+interaction+of+Coomassie+blue+with+proteins.">The binding interaction of Coomassie blue with proteins.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>213</b>, 407-413 (1993).</li><li>Zor, T., Selinger, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linearization+of+the+Bradford+protein+assay+increases+its+sensitivity:+theoretical+and+experimental+studies.">Linearization of the Bradford protein assay increases its sensitivity: theoretical and experimental studies.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>236</b>, 302-308 (1996).</li></ol>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> وفحص البروتين برادفورد تحظى بشعبية نظرا لسهولة الأداء والحساسية النسبية. عرضت الخطية على تركيزات بروتين كامل مجموعة التي حصلت عليها بروتوكول هنا يبسط كذلك مقايسة ، والعينات غير معروفة لا تحتاج إلى تدخل ضمن نطاق الرسم البياني المعايرة. </p><p class="jove_content" style=";text-align:right;di...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Bradford reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bio-Rad Laboratories</td>
<td>500-0006</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bovine Serum Albumin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Amersco</td>
<td>0332</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Multiplate absorbance reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BioTek</td>
<td>Synergy2</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

linearization of the bradford protein assay

<p class="jove_content">ويتم إنجاز تقرير كميات من البروتين ميكروغرام في مقايسة Coomassie برادفورد الزرقاء الرائعة التي كتبها قياس الامتصاصية في 590 نانومتر. هذا الاختبار الأكثر شيوعا وبسيطة تمكن السريع الكمي البروتين في الخلية lysates ، الكسور الخلوية ، أو عينات البروتين المؤتلف ، لغرض التطبيع القياسات البيوكيميائية. ومع ذلك ، واستقامة تنازلات جوهرية لحساسية ودقة هذه الطريقة. وتبين أنه في ظل ظروف الفحص القياسية ، فإن نسبة من قياسات الامتصاصية في 590 نانومتر و 450 نانومتر خطي صارم مع تركيز البروتين. هذا الإجراء البسيط يزيد من دقة ويحسن من حساسية مقايسة حول الكمي ، 10 أضعاف السماح باستمرار إلى 50 نانوغرام من ألبومين المصل البقري. علاوة على ذلك ، تقلص إلى حد كبير التدخل قدم عادة بواسطة المنظفات المستخدمة لإنشاء خلية lysates البروتوكول الجديد. معادلة خطية وضعت على أساس العمل الجماعي وقانون بير يناسب تماما على البيانات التجريبية.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Linearization of the Bradford Protein Assay at JoVE.com

Linearization of the Bradford Protein Assay

<p class="jove_content">هو خطر على دقة وحساسية من بروتين تقرير الفحص برادفورد سريعة ومريحة من خلال استقامة الذاتية. نظهر الخطية إجراء بسيط هو أن يزيد كثيرا من الدقة ، ويحسن من حساسية مقايسة حول أضعاف - 10 ، ويخفف كثيرا تدخل المنظفات.</p>

الخطية من الفحص البروتين برادفورد

Determination of microgram quantities of protein in the Bradford Coomassie brilliant blue assay is accomplished by measurement of absorbance at 590 nm. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin

أكتين المشارك الترسيب الفحص ، وبالنسبة للتحليل البروتين ملزمة لF - أكتين

The actin cytoskeleton within the cell is a network of actin filaments that allows the movement of cells and cellular processes, and that generates ...

Detection of Protein Ubiquitination

اكتشاف بروتين Ubiquitination

Ubiquitination, the covalent attachment of the polypeptide ubiquitin to target proteins, is a key posttranslational modification carried out by a set of ...

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

تلطيخ من البروتينات في الهلام مع Coomassie G - 250 دون عضوي حمض الخليك والمذيبات

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Using the GELFREE 8100 Fractionation System for Molecular Weight-Based Fractionation with Liquid Phase Recovery

باستخدام نظام التقطير GELFREE 8100 لتقطير الوزن الجزيئي وبناء مع مرحلة الانتعاش السائل

The GELFREE 8100 Fractionation System is a novel protein fractionation system designed to maximize protein recovery during molecular weight based ...

Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) Assay for Protein-Protein Interaction in Onion Cells Using the Helios Gene Gun

Bimolecular Fluorescence Complementation BiFC Assay for Protein-Protein Interaction in Onion Cells Using the Helios Gene Gun

ثنائي الجزيء الإسفار التكملة (BiFC) الفحص عن البروتين البروتين في خلايا البصل التفاعل باستخدام مدفع الجينات هيليوس

Investigation of gene function in diverse organisms relies on knowledge of how the gene products interact with each other in their normal cellular ...

A Liquid Phase Affinity Capture Assay Using Magnetic Beads to Study Protein-Protein Interaction: The Poliovirus-Nanobody Example

تقارب المرحلة السائلة الفحص التقاطها باستخدام الخرز المغناطيسي لدراسة البروتين البروتين التفاعل: المثال فيروس شلل الأطفال، Nanobody

In this article, a simple, quantitative, liquid phase affinity capture assay is presented. Provided that one protein can be tagged and another protein ...

Linking Predation Risk, Herbivore Physiological Stress and Microbial Decomposition of Plant Litter

ربط المخاطر الافتراس، والإجهاد الفسيولوجي آكل النبات والتحلل الميكروبي للنباتات القمامة

The quantity and quality of detritus entering the soil  determines the rate of decomposition by microbial communities as well as  recycle rates of ...

Reporter-based Growth Assay for Systematic Analysis of Protein Degradation

الفحص النمو القائم على مراسل لتحليل منهجي من تدهور البروتين

Protein degradation by the ubiquitin-proteasome system (UPS) is a major regulatory mechanism for protein homeostasis in all eukaryotes. The standard ...

Quantitative Immunofluorescence Assay to Measure the Variation in Protein Levels at Centrosomes

الكمية المناعي الفحص لقياس التفاوت في مستويات البروتين في Centrosomes

Centrosomes are small but important organelles that serve as the poles of mitotic spindle to maintain genomic integrity or assemble primary cilia to ...

Identifying Protein-protein Interaction Sites Using Peptide Arrays

تحديد مواقع التفاعل البروتين البروتين عن طريق الببتيد صفائف

Protein-protein interactions mediate most of the processes in the living cell and control homeostasis of the organism. Impaired protein interactions may ...