Name: linearization of the bradford protein assay
Uploaded: 2010-04-12T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Linearization of the Bradford Protein Assay at JoVE.com

<p class="jove_content"> 본 논문은 여기에서 설명한 원래 연구를 호스팅하는 후반 박사 Zvi 셀린저의 기억에 전념하고 있습니다. </p>

<p class="jove_title"> 브래드 포드 단백질 보정 그래프의 선형화 : </p><p class="jove_content"> 일반적으로 브래드 포드 분석 <sup>1로</sup> 알려진 쿠매시 화려한 파란색 단백질 분석은, 널리 때문에 신속하고 편리한 프로토콜뿐만 아니라 그 상대 감도의하는 데 사용됩니다. 불행히도, 단백질 농도의 광범위한 (그림 1) 이상의 곡률의 큰 정도가 있습니다. 따라서, 상대적으로 높은 단백질 농도, 20-10 MG / ML BSA의 단지 좁은 범위는 ?...

<ol>
	<li>Bradford, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+sensitive+method+for+the+quantitation+of+microgram+quantities+of+protein+utilizing+the+principle+of+protein-dye+binding.">A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>72</b>, 248-254 (1976).</li><li>Chial, H. J., Thompson, H. B., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spectral+study+of+the+charge+forms+of+Coomassie+blue+G.">A spectral study of the charge forms of Coomassie blue G.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>209</b>, 258-266 (1993).</li><li>Chial, H. J., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+binding+of+Coomassie+brilliant+blue+to+proteins+at+low+and+neutral+pH.">A comparison of the binding of Coomassie brilliant blue to proteins at low and neutral pH.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>213</b>, 362-369 (1993).</li><li>Compton, S. J., Jones, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+dye+response+and+interference+in+the+Bradford+protein+assay.">Mechanism of dye response and interference in the Bradford protein assay.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>151</b>, 369-374 (1985).</li><li>Congdon, R. W., Muth, G. W., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+binding+interaction+of+Coomassie+blue+with+proteins.">The binding interaction of Coomassie blue with proteins.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>213</b>, 407-413 (1993).</li><li>Zor, T., Selinger, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linearization+of+the+Bradford+protein+assay+increases+its+sensitivity:+theoretical+and+experimental+studies.">Linearization of the Bradford protein assay increases its sensitivity: theoretical and experimental studies.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>236</b>, 302-308 (1996).</li></ol>

<p class="jove_content"> 브래드 포드 단백질 분석 인해 성능과 상대 감도 자사의 용이성으로 인기가 있습니다. 프로토콜에 의해 얻은 범위 전체 단백질 농도 이상의 선형화는 미지 샘플의 교정 그래프의 범위 내에서 빠지지하지 않아도 여기에 추가로, 분석을 간단하게 제시. </p><p class="jove_content"> 중요한 것은 향상된 프로토콜은 더 이상 원래 브래드 프로토콜에 비해 다음과 같은 장점을 제공합니다 : </p><ol><li> 정확도를 ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Bradford reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bio-Rad Laboratories</td>
<td>500-0006</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bovine Serum Albumin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Amersco</td>
<td>0332</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Multiplate absorbance reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BioTek</td>
<td>Synergy2</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

linearization of the bradford protein assay

<p class="jove_content">브래드 쿠매시 화려한 파란색 분석에서 단백질의 마이크로 그램 수량의 결정은 590 nm의 흡광도에서 측정하여 수행됩니다. 이것은 가장 일반적인 분석은 생화 학적 측정의 정상화를 목적으로, 세포 lysates, 휴대 분수, 또는 재조합 단백질 샘플에 신속하고 간단하게 단백질 부량 수 있습니다. 그러나, 본질적 비선 형성이 방법의 감도와 정확성을 타협. 이것은 표준 분석 조건 하에서 흡광도 590 NM에서 측정과 450 nm의 비율은 단백질 농도와 엄격하게 선형임을 표시됩니다. 이 간단한 절차는 정확성을 증가 및 아래쪽 소 혈청 알부민 50 NG 10 배, 좋으 부량에 대한 분석의 감도를 향상시킵니다. 또한, 일반적으로 세포 lysates을 만드는 데 사용되는 세제의 도입 간섭은 크게 새로운 프로토콜에 의해 줄어 듭니다. 대량 작업 및 맥주의 율법에 기초하여 개발된 선형 방정식 완벽하게 실험 데이터를 맞는 데요.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Linearization of the Bradford Protein Assay at JoVE.com

Linearization of the Bradford Protein Assay

<p class="jove_content">신속하고 편리한 브래드 포드 분석에 의해 단백질 결정의 정확성과 감도는 본질적인 비선 형성에 의해 손상됩니다. 우리는 크게, 정확성을 증가 10 배에 대한 분석의 감도를 향상하고, 크게 세제에 의해 간섭을 줄일 수있는 간단한 선형화 절차를 보여줍니다.</p>

브래드 포드 단백질 분석의 선형화

Determination of microgram quantities of protein in the Bradford Coomassie brilliant blue assay is accomplished by measurement of absorbance at 590 nm. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin

굴지 공동 침강 분석, F - 굴지에 바인딩 단백질의 분석

The actin cytoskeleton within the cell is a network of actin filaments that allows the movement of cells and cellular processes, and that generates ...

연구

생물학

Detection of Protein Ubiquitination

단백질 Ubiquitination의 감지

Ubiquitination, the covalent attachment of the polypeptide ubiquitin to target proteins, is a key posttranslational modification carried out by a set of ...

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

유기 용매 및 초산없이 쿠매시 G - 250로 젤의 단백질 염색법

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Using the GELFREE 8100 Fractionation System for Molecular Weight-Based Fractionation with Liquid Phase Recovery

액상 복구와 분자량 기반 분류에 대한 GELFREE 8100 분획화 시스템을 사용하여

The GELFREE 8100 Fractionation System is a novel protein fractionation system designed to maximize protein recovery during molecular weight based ...

Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) Assay for Protein-Protein Interaction in Onion Cells Using the Helios Gene Gun

Bimolecular Fluorescence Complementation BiFC Assay for Protein-Protein Interaction in Onion Cells Using the Helios Gene Gun

헬리 우스 진 건을 사용하여 양파 세포에서 단백질 - 단백질 상호 작용에 대한 Bimolecular 형광 Complementation (BiFC) 어세이

Investigation of gene function in diverse organisms relies on knowledge of how the gene products interact with each other in their normal cellular ...

A Liquid Phase Affinity Capture Assay Using Magnetic Beads to Study Protein-Protein Interaction: The Poliovirus-Nanobody Example

단백질 - 단백질 상호 작용 연구를 자성 비즈를 사용하여 액상 동질 캡처 분석 : Poliovirus-Nanobody의 예

In this article, a simple, quantitative, liquid phase affinity capture assay is presented. Provided that one protein can be tagged and another protein ...

Linking Predation Risk, Herbivore Physiological Stress and Microbial Decomposition of Plant Litter

Predation 위험, Herbivore 생리적 스트레스와 식물 돼지 미생물 분해를 연결

The quantity and quality of detritus entering the soil  determines the rate of decomposition by microbial communities as well as  recycle rates of ...

Reporter-based Growth Assay for Systematic Analysis of Protein Degradation

단백질 분해의 체계적인 분석을위한 기자 기반의 성장 분석

Protein degradation by the ubiquitin-proteasome system (UPS) is a major regulatory mechanism for protein homeostasis in all eukaryotes. The standard ...

Quantitative Immunofluorescence Assay to Measure the Variation in Protein Levels at Centrosomes

정량 면역 형광 분석은 중심체에서 단백질 수준의 변화를 측정하기 위해

Centrosomes are small but important organelles that serve as the poles of mitotic spindle to maintain genomic integrity or assemble primary cilia to ...

Identifying Protein-protein Interaction Sites Using Peptide Arrays

펩타이드 배열을 사용하여 단백질 - 단백질 상호 작용 사이트를 확인

Protein-protein interactions mediate most of the processes in the living cell and control homeostasis of the organism. Impaired protein interactions may ...