Name: linearization of the bradford protein assay
Uploaded: 2010-04-12T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Linearization of the Bradford Protein Assay at JoVE.com

<p class="jove_content"> Эта статья, посвященная памяти покойного д-р Цви Селинджер, которая состоялась оригинальное исследование описано здесь. </p>

<p class="jove_title"> Линеаризация Калибровочный график белка Брэдфорд: </p><p class="jove_content"> Кумасси бриллиантовый синий анализа белка, широко известный как анализ Брэдфорд <sup>1,</sup> широко используется из-за его быстрого и удобного протокола, а также его относительной чувствительности. К сожалению, в значительн?...

<ol>
	<li>Bradford, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+sensitive+method+for+the+quantitation+of+microgram+quantities+of+protein+utilizing+the+principle+of+protein-dye+binding.">A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>72</b>, 248-254 (1976).</li><li>Chial, H. J., Thompson, H. B., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spectral+study+of+the+charge+forms+of+Coomassie+blue+G.">A spectral study of the charge forms of Coomassie blue G.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>209</b>, 258-266 (1993).</li><li>Chial, H. J., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+binding+of+Coomassie+brilliant+blue+to+proteins+at+low+and+neutral+pH.">A comparison of the binding of Coomassie brilliant blue to proteins at low and neutral pH.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>213</b>, 362-369 (1993).</li><li>Compton, S. J., Jones, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+dye+response+and+interference+in+the+Bradford+protein+assay.">Mechanism of dye response and interference in the Bradford protein assay.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>151</b>, 369-374 (1985).</li><li>Congdon, R. W., Muth, G. W., Splittgerber, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+binding+interaction+of+Coomassie+blue+with+proteins.">The binding interaction of Coomassie blue with proteins.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>213</b>, 407-413 (1993).</li><li>Zor, T., Selinger, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linearization+of+the+Bradford+protein+assay+increases+its+sensitivity:+theoretical+and+experimental+studies.">Linearization of the Bradford protein assay increases its sensitivity: theoretical and experimental studies.</a> <em style='font-style: italic'>Anal Biochem</em>. <b>236</b>, 302-308 (1996).</li></ol>

<p class="jove_content"> Анализ Брэдфорд белок популярной благодаря своей простоте исполнения и относительной чувствительности. Линеаризация по всей концентрации белка предельных значений, полученных по протоколу, представленные здесь еще больше упрощает анализ, так как неизвестные образцы не нужно падать...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Bradford reagent</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bio-Rad Laboratories</td>
<td>500-0006</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Bovine Serum Albumin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Amersco</td>
<td>0332</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Multiplate absorbance reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BioTek</td>
<td>Synergy2</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

linearization of the bradford protein assay

<p class="jove_content">Определение мкг количества белка в Брэдфорд Кумасси синий блестящий анализ выполняется путем измерения оптической плотности при 590 нм. Это наиболее распространенный тип анализа позволяет быстро и простых белков количественного в клеточных лизатов, клеточные фракции, или рекомбинантный белок образцы, с целью нормализации биохимических показателей. Тем не менее, внутренняя нелинейность компромиссы чувствительность и точность этого метода. Показано, что при стандартных условиях теста, отношение поглощения измерения при 590 нм и 450 нм строго линейна концентрации белка. Эта простая процедура повышает точность и улучшает чувствительность теста примерно в 10 раз, что позволяет количественное до 50 нг бычьего сывороточного альбумина. Кроме того, вмешательство обычно введены моющие средства, которые используются для создания клеточных лизатов значительно снижается по новому протоколу. Линейное уравнение разработан на основе действующих масс и закон Бера идеально подходит экспериментальных данных.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Linearization of the Bradford Protein Assay at JoVE.com

Linearization of the Bradford Protein Assay

<p class="jove_content">Точность и чувствительность определения белка путем быстрого и удобного анализа Брэдфорда, подрывается внутренней нелинейности. Мы показываем, простая процедура линеаризации, что существенно повышает точность, повышает чувствительность теста примерно в 10 раз, и значительно сокращает вмешательство моющих средств.</p>

Линеаризация Анализ белка Брэдфорд

Determination of microgram quantities of protein in the Bradford Coomassie brilliant blue assay is accomplished by measurement of absorbance at 590 nm. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin

Актина сотрудничества седиментации Пробирной; для анализа связывание белка с F-актин

The actin cytoskeleton within the cell is a network of actin filaments that allows the movement of cells and cellular processes, and that generates ...

Detection of Protein Ubiquitination

Обнаружение белка убиквитинирования

Ubiquitination, the covalent attachment of the polypeptide ubiquitin to target proteins, is a key posttranslational modification carried out by a set of ...

Staining of Proteins in Gels with Coomassie G-250 without Organic Solvent and Acetic Acid

Окрашивание белков в гелях Кумасси G-250 без органических растворителей и уксусной кислоты

In classical protein staining protocols using Coomassie Brilliant Blue (CBB), solutions with high contents of toxic and flammable organic solvents ...

Using the GELFREE 8100 Fractionation System for Molecular Weight-Based Fractionation with Liquid Phase Recovery

Использование GELFREE 8100 Фракционирование Система Молекулярный вес основе фракционирования с жидким этапе восстановления

The GELFREE 8100 Fractionation System is a novel protein fractionation system designed to maximize protein recovery during molecular weight based ...

Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) Assay for Protein-Protein Interaction in Onion Cells Using the Helios Gene Gun

Bimolecular Fluorescence Complementation BiFC Assay for Protein-Protein Interaction in Onion Cells Using the Helios Gene Gun

Бимолекулярные флуоресценции комплементации (BiFC) Пробирной для белок-белковые взаимодействия в Лук ячеек с использованием генной пушки Helios

Investigation of gene function in diverse organisms relies on knowledge of how the gene products interact with each other in their normal cellular ...

A Liquid Phase Affinity Capture Assay Using Magnetic Beads to Study Protein-Protein Interaction: The Poliovirus-Nanobody Example

Жидкая фаза Affinity Capture методом с использованием магнитных шариков по изучению белок-белковые взаимодействия: Полиовирус-нанотела Пример

In this article, a simple, quantitative, liquid phase affinity capture assay is presented. Provided that one protein can be tagged and another protein ...

Linking Predation Risk, Herbivore Physiological Stress and Microbial Decomposition of Plant Litter

Образцы хищничества риска, травоядным физиологический стресс и микробного разложения растительного опада

The quantity and quality of detritus entering the soil  determines the rate of decomposition by microbial communities as well as  recycle rates of ...

Reporter-based Growth Assay for Systematic Analysis of Protein Degradation

Репортер основе анализа роста для систематического анализа белка деградации

Protein degradation by the ubiquitin-proteasome system (UPS) is a major regulatory mechanism for protein homeostasis in all eukaryotes. The standard ...

Quantitative Immunofluorescence Assay to Measure the Variation in Protein Levels at Centrosomes

Количественный иммунофлюоресценции для измерения различий в уровне белка на центросомах

Centrosomes are small but important organelles that serve as the poles of mitotic spindle to maintain genomic integrity or assemble primary cilia to ...

Identifying Protein-protein Interaction Sites Using Peptide Arrays

Выявление белок-белковых сайтов взаимодействие по пептидов массивов

Protein-protein interactions mediate most of the processes in the living cell and control homeostasis of the organism. Impaired protein interactions may ...