Name: measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum
Uploaded: 2010-03-29T18:05:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum at JoVE.com

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> ويود الكاتب أن أشكر الآنسة لورا ماثيوز لأداء هذه التقنية ، والسيد بول الراعي لصناعة السينما. وقد تم تمويل هذا المشروع من قبل جامعة جنوب أستراليا ، مختبر برنامج الطب. </p>

<p class="jove_title" style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد المالحة Veronal 5X التخزين المؤقت (VBS) </p><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإعداد المالحة Veronal التخزين المؤقت (VBS) ، وثلاثة حلول فصل ابد أن نكون مستعدين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1 إعداد حل عن طريق إذابة 21.25gm من كلوريد الصوديوم و0.94gm باربيتون من الصوديوم ...

<ol>
	<li>Goldsby, R. A., Kindt, T. J., Osborne, B. A., Kuby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Immunology</em>. , (2003).</li></ol>

<p class="jove_content" style=";text-align:right;direction:rtl"> <sub>50</sub> CH مقايسة يخضع لتدخلات كثيرة. بعض SRBC هي أكثر هشاشة من غيرها ، مما أدى إلى haemolysis العفوية التي لا علاقة لتكملة النشاط. تقارب من الأضداد الأرنب يختلف من الكثير والكثير لمن مصنع واحد لآخر ، وهذا يؤثر على كمية من الأجسام المضادة التي تربط لSRBC. أيضا ، فإن عملية توعية SRB...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sheep red blood cells</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CSL</td>
<td>2490201</td>
<td>Use at 1% final</td>
</tr>
<tr>
<td>Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Human serum</td>
</tr>
<tr>
<td>Rabbit Anti-Sheep Haemolytic serum (RBCs), Unconjugated</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AdB Serotec</td>
<td>C12HSB</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96 well flat bottom plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sarstedt</td>
<td>83.1839</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Veronal buffered saline</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use at 1x final</td>
</tr>
<tr>
<td>Waterbath</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plate reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>37&deg;C room/incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum

<p class="jove_content">نظام تكمل مجموعة من البروتينات التي تؤدي الى تنشيط عندما تحلل الخلايا المستهدفة ويسهل من خلال البلعمة opsonisation. ويمكن قياس مكونات تكمل الفردية ولكن هذا لا يوفر أي معلومات عن نشاط المسار. وCH<sub&gt; 50</sub&gt; هو فحص الكشف عن تفعيل الممر تكمل الكلاسيكية (الشكل رقم 1) وأنه حساس في الحد ، وغياب و / أو الخمول أي مكون من الطريق. وCH<sub&gt; 50</sub&gt; اختبارات القدرة الفنية لمكونات مصل لاستكمال المسار الكلاسيكي لليز خلايا الدم الحمراء الأغنام (SRBC) قبل المغلفة مع الغنم الحمراء المضادة للأرنب الدم الأضداد الخلية (haemolysin). عندما يتم تحضين الضد المغلفة SRBC مع اختبار المصل ، يتم تنشيط المسار الكلاسيكي لتكمل والنتائج haemolysis. إذا كان مكونا مكملا غائب ، CH<sub&gt; 50</sub&gt; سوف يكون مستوى الصفر ، وإذا انخفضت هي واحدة أو أكثر من مكونات المسار الكلاسيكية ، CH<sub&gt; 50</subوسيتم انخفضت&gt;. يتم إضافة وحدة تخزين ثابتة من SRBC توعيتهم على النحو الأمثل لتخفيف كل مصل. بعد الحضانة ، يتم طرد الخليط وكميا درجة haemolysis عن طريق قياس الامتصاصية من الهيموغلوبين يطلق في طاف في 540nm. يتم تحديد مقدار النشاط تكملة طريق فحص قدرة تخفيفات مختلفة من اختبار المصل على الضد ليز SRBC المغلفة. هذا الفيديو يبين الخطوات التجريبية تشارك في تحليل مستوى النشاط استكمالا للمسار استكمال الكلاسيكية.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum at JoVE.com

Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum

<p class="jove_content">يتم تنشيط المسار الكلاسيكي بواسطة الأجسام المضادة ويتوج في انحلال الخلايا المستهدفة. وCH<sub&gt; 50</sub&gt; مقايسة يوفر قدرا من النشاط مكملا لعينة مصل. هذا الفيديو يوضح الخطوات التي ينطوي عليها تحديد CH<sub&gt; 50</sub&gt; عينة مصل ، والحسابات وتفسير النتائج.</p>

قياس يكمل 50 ٪ الدم الانحلالي (CH<sub> 50</sub>) نشاط المصل

The complement system is a group of proteins that when activated lead to target cell lysis and facilitates phagocytosis through opsonisation. Individual ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH<sub>50</sub>) Activity of Serum

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

نضوب بالسكان خلية معينة من قبل استنفاد تكملة

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay

تحديد التفاعل وعيار من المصل باستخدام الفحص Haemagglutination

Haemagglutination is a specific form of agglutination and is used when antibodies bind to red blood cells, which act as a particulate antigen. Red blood ...

Measuring Calpain Activity in Fixed and Living Cells by Flow Cytometry

قياس نشاط خلايا في Calpain الثابتة والعيش من خلال التدفق الخلوي

Calpains are ubiquitous intracellular, calcium-sensitive, neutral cysteine proteases 1. Calpains play crucial roles in many physiological processes, ...

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with <em>Listeria monocytogenes</em>

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

قياس الحمولة الجرثومية والاستجابات المناعية في الفئران المصابة<em> المستوحدة الليستيريا</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Determining the Phagocytic Activity of Clinical Antibody Samples

تحديد نشاط أكلة العينات السريرية جسم

Antibody-driven phagocytosis is induced via the engagement of Fc receptors on professional phagocytes, and can contribute to both clearance as well as ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from <em>Ixodes scapularis</em> Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

اللعاب، الغدد اللعابية، وجمع اللمف الدموي من القراد اللبود الكتفي

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

طرق للكشف الكمي للجسم التي يسببها تكملة التنشيط على خلايا الدم الحمراء.

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

قياس الحساسية المفرطة المحلية في الفئران

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Measuring Granulocyte and Monocyte Phagocytosis and Oxidative Burst Activity in Human Blood

قياس الحبيبية والوحيدات البلعمة ومؤكسد آخر انفجار في الدم البشري

The granulocyte and monocyte phagocytosis and oxidative burst (OB) activity assay can be used to study the innate immune system. This manuscript provides ...

Assays for Studying the Role of Vitronectin in Bacterial Adhesion and Serum Resistance

فحوصات لدراسة دور فيترونيكتين في التصاق البكتيريا ومقاومة المصل

Bacteria utilize complement regulators as a means of evading the host immune response. Here, we describe protocols for evaluating the role vitronectin ...

قياس يكمل 50 ٪ الدم الانحلالي (CH 50) نشاط المصل

قياس يكمل 50 ٪ الدم الانحلالي (CH₅₀) نشاط المصل