Name: measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum
Uploaded: 2010-03-29T18:05:00
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<p class="jove_content"> लेखक और छायांकन के लिए तकनीक श्री पॉल शेफर्ड के प्रदर्शन के लिए मिस Lora मैथ्यू धन्यवाद देना चाहूंगा. इस परियोजना दक्षिण ऑस्ट्रेलिया के विश्वविद्यालय, प्रयोगशाला मेडिसिन प्रोग्राम द्वारा वित्त पोषित किया गया था. </p>

<p class="jove_title"> 5x Veronal buffered खारा (VBS) की तैयारी </p><ol><li> Veronal buffered खारा (VBS) तैयार करने के लिए, तीन अलग अलग समाधान करने के लिए तैयार रहने की जरूरत है. </li><li> आसुत पानी की 350ml में NaCl और सोडियम Barbitone के 0.94gm 21.25gm भंग द्वारा तैयार समाधान 1. NaCl और सोडियम Barbito...

<ol>
	<li>Goldsby, R. A., Kindt, T. J., Osborne, B. A., Kuby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Immunology</em>. , (2003).</li></ol>

<p class="jove_content"> सीएच <sub>50</sub> परख कई interferences के अधीन है. कुछ SRBC अधिक दूसरों की तुलना में कमजोर हैं, सहज haemolysis है कि गतिविधि पूरक करने के लिए असंबंधित है में जिसके परिणामस्वरूप. खरगोश एंटीबॉडी की आत्मीयता से बहुत बहुत और एक निर्म?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sheep red blood cells</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CSL</td>
<td>2490201</td>
<td>Use at 1% final</td>
</tr>
<tr>
<td>Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Human serum</td>
</tr>
<tr>
<td>Rabbit Anti-Sheep Haemolytic serum (RBCs), Unconjugated</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AdB Serotec</td>
<td>C12HSB</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96 well flat bottom plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sarstedt</td>
<td>83.1839</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Veronal buffered saline</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use at 1x final</td>
</tr>
<tr>
<td>Waterbath</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plate reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>37&deg;C room/incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum

<p class="jove_content">प्रणाली पूरक प्रोटीन के एक समूह है कि जब सक्रिय सेल lysis लक्ष्य के लिए नेतृत्व और opsonisation माध्यम phagocytosis सुविधा है. व्यक्तिगत पूरक घटक मात्रा निर्धारित हो सकता है लेकिन इस मार्ग की गतिविधि के रूप में किसी भी जानकारी प्रदान नहीं करता है सकते हैं. दर्पण<sub&gt; 50</sub&gt; शास्त्रीय पूरक मार्ग (चित्र 1) के सक्रियण के लिए एक स्क्रीनिंग परख है और यह कमी, अभाव और / या मार्ग के किसी भी घटक की निष्क्रियता के प्रति संवेदनशील है. दर्पण<sub&gt; 50</sub&gt; शास्त्रीय भेड़ लाल रक्त कोशिकाओं (SRBC) पूर्व खरगोश विरोधी भेड़ लाल रक्त कोशिका एंटीबॉडी (haemolysin) के साथ लेपित lyse मार्ग के सीरम पूरक घटकों के कार्यात्मक क्षमता का परीक्षण. जब प्रतिरक्षी - लेपित SRBC परीक्षण सीरम, पूरक के शास्त्रीय मार्ग सक्रिय है और haemolysis परिणाम के साथ incubated हैं. यदि एक पूरक घटक अनुपस्थित है, दर्पण<sub&gt; 50</sub&gt; स्तर शून्य होगा, अगर शास्त्रीय मार्ग के एक या अधिक घटकों घट रहे हैं, दर्पण<sub&gt; 50</sub&gt; कम हो जाएगा. बेहतर अवगत SRBC की एक निश्चित मात्रा प्रत्येक सीरम कमजोर पड़ने के लिए जोड़ा जाता है. ऊष्मायन के बाद, मिश्रण और centrifuged haemolysis की डिग्री 540nm पर सतह पर तैरनेवाला में जारी हीमोग्लोबिन के absorbance को मापने के द्वारा मात्रा निर्धारित है. पूरक गतिविधि की राशि सीरम परीक्षण के विभिन्न dilutions की क्षमता की जांच करने के लिए एंटीबॉडी लेपित SRBC lyse द्वारा निर्धारित किया जाता है. यह वीडियो प्रयोगात्मक शास्त्रीय पूरक मार्ग के पूरक गतिविधि के स्तर का विश्लेषण करने में शामिल कदम की रूपरेखा.</p>

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Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum

<p class="jove_content">शास्त्रीय मार्ग एंटीबॉडी द्वारा सक्रिय है और लक्ष्य कक्ष lysis में खत्म. दर्पण<sub&gt; 50</sub&gt; परख एक सीरम नमूना के पूरक गतिविधि का एक उपाय प्रदान करता है. इस वीडियो में दर्पण का निर्धारण करने में शामिल कदम दर्शाता है<sub&gt; 50</sub&gt; एक सीरम नमूना, और परिणामों की गणना की व्याख्या.</p>

मापने 50% रक्तसंलायी पूरक (सीएच<sub> 50</subसीरम>) गतिविधि

The complement system is a group of proteins that when activated lead to target cell lysis and facilitates phagocytosis through opsonisation. Individual ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH<sub>50</sub>) Activity of Serum

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

विशिष्ट सेल आबादी के पूरक रिक्तीकरण द्वारा रिक्तीकरण

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay

जेट और सीरम के Titre एक Haemagglutination परख का उपयोग कर निर्धारण

Haemagglutination is a specific form of agglutination and is used when antibodies bind to red blood cells, which act as a particulate antigen. Red blood ...

Measuring Calpain Activity in Fixed and Living Cells by Flow Cytometry

फिक्स्ड और जीवित कोशिकाओं में प्रवाह cytometry द्वारा Calpain गतिविधि को मापने

Calpains are ubiquitous intracellular, calcium-sensitive, neutral cysteine proteases 1. Calpains play crucial roles in many physiological processes, ...

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with <em>Listeria monocytogenes</em>

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

से संक्रमित चूहों में बैक्टीरियल लोड और इम्यून प्रतिक्रियाएँ माप<em> लिस्टेरिया monocytogenes</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Determining the Phagocytic Activity of Clinical Antibody Samples

क्लीनिकल एंटीबॉडी नमूने के Phagocytic गतिविधि निर्धारण

Antibody-driven phagocytosis is induced via the engagement of Fc receptors on professional phagocytes, and can contribute to both clearance as well as ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from <em>Ixodes scapularis</em> Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

लार लार ग्रंथि, Ixodes Scapularis Ticks से और Hemolymph संग्रह

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

लाल रक्त कोशिकाओं पर एंटीबॉडी प्रेरित सक्रियण पूरक के मात्रात्मक जांच के लिए तरीके

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

चूहे में स्थानीय तीव्रग्राहिता मापने

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Measuring Granulocyte and Monocyte Phagocytosis and Oxidative Burst Activity in Human Blood

मानव रक्त में मापने कणांकुर और Monocyte phagocytosis और ऑक्सीडेटिव फट गतिविधि

The granulocyte and monocyte phagocytosis and oxidative burst (OB) activity assay can be used to study the innate immune system. This manuscript provides ...

Assays for Studying the Role of Vitronectin in Bacterial Adhesion and Serum Resistance

बैक्टीरियल आसंजन और सीरम प्रतिरोध में Vitronectin की भूमिका का अध्ययन करने के लिए परख

Bacteria utilize complement regulators as a means of evading the host immune response. Here, we describe protocols for evaluating the role vitronectin ...

मापने 50% रक्तसंलायी पूरक (सीएच 50) गतिविधि

मापने 50% रक्तसंलायी पूरक (सीएच_{50) गतिविधि}