Name: measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum
Uploaded: 2010-03-29T18:05:00
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<p class="jove_content">著者は、映画撮影のためのテクニックと氏ポールシェパードを実行するためのミスローラマシューズに感謝したいと思います。このプロジェクトは、南オーストラリア大学、研究室医学のプログラムによって資金を供給された。 </p>

<p class="jove_title"> 5倍のベロナール緩衝生理食塩水の調製（VBS） </p><ol><li>ベロナール緩衝生理食塩水（VBS）を準備するには、3つの別々のソリューションが用意する必要があります。 </li><li>蒸留水の350ミリリットルでナトリウムBarbitoneのNaClおよび0.94gmの21.25gmを溶解して溶液1を準備します。 NaClおよびナトリウムBarbitoneの最終濃度は、それぞれ1.02Mと13mmです。 </li><li>熱い蒸留水の125​​ミリリットルでBarbitoneの1...

<ol>
	<li>Goldsby, R. A., Kindt, T. J., Osborne, B. A., Kuby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Immunology</em>. , (2003).</li></ol>

<p class="jove_content"> CH <sub>50</sub>アッセイは、多くの干渉の対象となります。いくつかのSRBCでの活動を補完する関係がない自発的な溶血の結果、他のものより壊れやすいものです。ウサギの抗体の親和性はロットし、1つのメーカーによって異なりますが、これはSRBCに結合する抗体の量に影響を与えます。また、抗体のコーティングの異なる量のSRBCによる細胞内で抗体の結果とSRBC感作のプロセス。検体採取と保...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sheep red blood cells</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CSL</td>
<td>2490201</td>
<td>Use at 1% final</td>
</tr>
<tr>
<td>Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Human serum</td>
</tr>
<tr>
<td>Rabbit Anti-Sheep Haemolytic serum (RBCs), Unconjugated</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AdB Serotec</td>
<td>C12HSB</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96 well flat bottom plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sarstedt</td>
<td>83.1839</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Veronal buffered saline</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use at 1x final</td>
</tr>
<tr>
<td>Waterbath</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plate reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>37&deg;C room/incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum

<p class="jove_content">補体系は、細胞溶解をターゲットにつながる活性化とopsonisationを通して食作用を促進するタンパク質のグループです。個々の補体成分は、しかし、これは経路の活性などの情報を提供しない定量することができる。 CH<sub&gt; 50</sub&gt;古典的補体経路（図1）の活性化のためのスクリーニングアッセイであり、経路の任意のコンポーネントの削減、不在および/または非アクティブに敏感です。 CH<sub&gt; 50</sub&gt;ウサギ抗ヒツジ赤血球抗体（溶血素）をプレコートヒツジ赤血球（SRBC）を溶解するために古典経路の血清補体成分の機能的能力をテストします。抗体でコーティングされたSRBCは試験血清、補体古典経路が活性化され、溶血の結果とインキュベートされている場合。補体成分が存在しない場合、CH<sub&gt; 50</sub&gt;レベルはゼロになります。古典経路の1つまたは複数のコンポーネントが減少している場合は、CH<sub&gt; 50</sub&gt;縮小されます。最適に感作されたSRBCの固定量は、各血清希釈に追加されます。インキュベーション後、混合物を遠心分離し、溶血の程度は540nmで上清中に放出されたヘモグロビンの吸光度を測定することによって定量される。補体活性の量は、抗体コーティングされたSRBCを溶解するために血清検査の種々の希釈物の容量を調べることによって決定されます。このビデオでは、古典的補体経路の補体活性のレベルを分析に関わる実験的な手順を説明します。</p>

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Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum

<p class="jove_content">古典経路は、抗体によって活性化し、標的細胞の溶解で最高潮に達しますれる。 CH<sub&gt; 50</sub&gt;アッセイは、血清サンプルの補体活性の尺度を提供する。このビデオでは、CHを決定する際に必要な手順を示しています<sub&gt; 50</sub&gt;血清サンプルの、結果の計算と解釈する。</p>

50パーセント溶血補体（CHの測定<sub> 50</sub血清中>）活動

The complement system is a group of proteins that when activated lead to target cell lysis and facilitates phagocytosis through opsonisation. Individual ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH<sub>50</sub>) Activity of Serum

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

補体の枯渇により特定の細胞集団の枯渇

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay

赤血球凝集アッセイを用いて血清の反応性と力価の決定

Haemagglutination is a specific form of agglutination and is used when antibodies bind to red blood cells, which act as a particulate antigen. Red blood ...

Measuring Calpain Activity in Fixed and Living Cells by Flow Cytometry

フローサイトメトリーで固定し、生細胞におけるカルパイン活性の測定

Calpains are ubiquitous intracellular, calcium-sensitive, neutral cysteine proteases 1. Calpains play crucial roles in many physiological processes, ...

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with <em>Listeria monocytogenes</em>

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

に感染したマウスにおける細菌負荷と免疫応答の測定<em>リステリア菌</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Determining the Phagocytic Activity of Clinical Antibody Samples

臨床抗体サンプルの貪食活性を決定する

Antibody-driven phagocytosis is induced via the engagement of Fc receptors on professional phagocytes, and can contribute to both clearance as well as ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from <em>Ixodes scapularis</em> Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

マダニScapularisダニの唾液、唾液腺、および体液コレクション

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

赤血球上の抗体誘導性補体活性化の定量的検出のための方法

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

マウスにおけるローカルアナフィラキシーの測定

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Measuring Granulocyte and Monocyte Phagocytosis and Oxidative Burst Activity in Human Blood

ヒト血液中の測定顆粒球と単球食作用および酸化バースト活動

The granulocyte and monocyte phagocytosis and oxidative burst (OB) activity assay can be used to study the innate immune system. This manuscript provides ...

Assays for Studying the Role of Vitronectin in Bacterial Adhesion and Serum Resistance

細菌の付着と血清抵抗性ビトロネクチンの役割を研究するための試金

Bacteria utilize complement regulators as a means of evading the host immune response. Here, we describe protocols for evaluating the role vitronectin ...

50パーセント溶血補体（CHの測定 50）活動

50パーセント溶血補体（CHの測定_50）活動