Name: measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum
Uploaded: 2010-03-29T18:05:00
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<p class="jove_content"> 저자는 촬영에 대한 기술과 미스터 폴 목사는 수행 미스 로라 매튜스를 감사하고 싶습니다. 이 프로젝트는 사우스 오스트 레일 리아 대학, 연구소의 의학 프로그램에 의해 투자되었다. </p>

<p class="jove_title"> 5 배 Veronal 버퍼 살린 (VBS)의 준비 </p><ol><li> Veronal 버퍼 살린 (VBS)를 준비하려면, 별도의 세 가지 솔루션을 준비해야합니다. </li><li> 증류수의 350ml에 나트륨 Barbitone의 NaCl과 0.94gm의 21.25gm을 용해하여 용액 1을 준비합니다. NaCl과 나트륨 Barbitone의 최종 농도는 각각 1.02M과 13mM 있습니다. </li><li> 뜨거운 증류수의 125ml에 Barbitone의 1.44gm을 용해하여 용액 2를 준비합니다. Barbitone의 최종 농도는 62.5mM입니다. </...

<ol>
	<li>Goldsby, R. A., Kindt, T. J., Osborne, B. A., Kuby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Immunology</em>. , (2003).</li></ol>

<p class="jove_content"> CH <sub>50</sub> 검정은 많은 interferences의 적용을받습니다. 일부 SRBC는 활동을 보완하기 위해 무관 자연 haemolysis의 결과로, 다른 사람보다 더 연약하고 있습니다. 토끼 항체의 친화도는 많은에서 많은 한 제조 업체에서 다른 다릅니다, 이것은 SRBC에 바인딩 항체의 양을 영향을 미칩니다. 또한, 항체 코팅 SRBC의 다양한 양의와 세포 항체 결과 SRBC을 sensitizing의 과정. 표본 수집 및 저장 오류의 중요한 잠?...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sheep red blood cells</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CSL</td>
<td>2490201</td>
<td>Use at 1% final</td>
</tr>
<tr>
<td>Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Human serum</td>
</tr>
<tr>
<td>Rabbit Anti-Sheep Haemolytic serum (RBCs), Unconjugated</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AdB Serotec</td>
<td>C12HSB</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96 well flat bottom plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sarstedt</td>
<td>83.1839</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Veronal buffered saline</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use at 1x final</td>
</tr>
<tr>
<td>Waterbath</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plate reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>37&deg;C room/incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum

<p class="jove_content">보완 시스템은 세포 용해를 대상으로 이끌 활성화되고 opsonisation 통해 phagocytosis을 용이하게 단백질의 그룹입니다. 개인 보완 구성 요소가 있지만 이것은 경로의 활동에 같은 정보를 제공하지 않습니다 계량하실 수 있습니다. CH<sub&gt; 50</sub&gt; 클래식 보완 경로 (그림 1)의 정품 인증에 대한 심사 분석하고 그것은 경로의 모든 구성 요소의 감소, 부재 및 / 또는 비활성으로 구분합니다. CH<sub&gt; 50</sub&gt; 토끼 안티 양 적혈구 세포 항체 (haemolysin)로 사전 코팅 양 적혈구 (SRBC)을 lyse하는 고전 경로의 혈청 보완 구성 요소의 기능 능력을 테스트합니다. 항체 - 코팅 SRBC은 시험 혈청, 보완의 고전 경로가 활성화되고 haemolysis 결과 incubated 때. 보완 구성 요소가 없을 경우, CH<sub&gt; 50</sub&gt; 레벨 제로합니다, 전통적인 경로 중 하나 이상의 구성 요소가 감소하는 경우, CH<sub&gt; 50</sub&gt;가 감소됩니다. 최적 sensitized SRBC의 고정 볼륨은 각 혈청 희석에 추가됩니다. 부화 후, 혼합물은 centrifuged되고 haemolysis의 정도는 540nm에서 뜨는로 출시 헤모글로빈의 흡광도를 측정하여 계량입니다. 보완 활동의 금액은 항체 코팅 SRBC을 lyse에 혈청 검사의 다양한 dilutions의 용량을 검사에 의해 결정됩니다. 이 비디오는 고전적인 보완 경로의 보완 활동의 수준을 분석에 관련된 실험 단계를 설명합니다.</p>

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Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum

<p class="jove_content">고전 경로는 항체에 의해 활성화되고 대상 세포 용해에 culminates 있습니다. CH<sub&gt; 50</sub&gt; 검정은 혈청 샘플의 보완 활동의 측정을 제공합니다. 이 비디오는 CH를 결정에 관련된 단계를 설명합니다<sub&gt; 50</sub&gt; 혈청 샘플의 결과의 계산 및 해석.</p>

50 % Haemolytic 보완 (CH 측정<sub> 50</sub혈청>) 활동

The complement system is a group of proteins that when activated lead to target cell lysis and facilitates phagocytosis through opsonisation. Individual ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH<sub>50</sub>) Activity of Serum

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

보완 고갈에 의해 특정 세포 집단의 고갈

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

연구

면역학 및 감염병학

Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay

Haemagglutination 분석을 사용하여 혈청의 반응성 및 Titre를 결정

Haemagglutination is a specific form of agglutination and is used when antibodies bind to red blood cells, which act as a particulate antigen. Red blood ...

Measuring Calpain Activity in Fixed and Living Cells by Flow Cytometry

유동세포계측법로 고정하고 살아있는 세포에서 Calpain 활동을 측정

Calpains are ubiquitous intracellular, calcium-sensitive, neutral cysteine proteases 1. Calpains play crucial roles in many physiological processes, ...

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with <em>Listeria monocytogenes</em>

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

감염된 마우스에 세균 하중과 면역 응답 측정<em> 리스테리아 monocytogenes</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Determining the Phagocytic Activity of Clinical Antibody Samples

임상 항체 샘플 Phagocytic 활동 결정

Antibody-driven phagocytosis is induced via the engagement of Fc receptors on professional phagocytes, and can contribute to both clearance as well as ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from <em>Ixodes scapularis</em> Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Ixodes Scapularis 진드기의 타액, 침샘 및 Hemolymph 컬렉션

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

적혈구에 대한 항체에 의한 보체 활성의 정량 검출하는 방법

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

마우스에 현지 아나필락시스 측정

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Measuring Granulocyte and Monocyte Phagocytosis and Oxidative Burst Activity in Human Blood

인간의 혈액에서 측정 과립구와 단핵구 식균 작용 및 산화 버스트 활동

The granulocyte and monocyte phagocytosis and oxidative burst (OB) activity assay can be used to study the innate immune system. This manuscript provides ...

Assays for Studying the Role of Vitronectin in Bacterial Adhesion and Serum Resistance

세균성 접착 및 혈 청 저항에 Vitronectin의 역할을 공부에 대 한 분석

Bacteria utilize complement regulators as a means of evading the host immune response. Here, we describe protocols for evaluating the role vitronectin ...

50 % Haemolytic 보완 (CH 측정 50) 활동

50 % Haemolytic 보완 (CH 측정_{50) 활동}