Name: measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum
Uploaded: 2010-03-29T18:05:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum at JoVE.com

<p class="jove_content"> Yazar Miss Lora Matthews sinematografi teknikleri ve Bay Paul Shepherd gerçekleştirmek için teşekkür etmek istiyorum. Bu proje, Güney Avustralya Üniversitesi, Tıp Laboratuarı programı tarafından finanse edildi. </p>

<p class="jove_title"> 5x veronal Tamponlu Salin (VBS) hazırlanması </p><ol><li> Veronal Tamponlu Salin (VBS) hazırlamak için, üç ayrı çözüm hazırlıklı olması gerekiyor. </li><li> Distile su 350ml Sodyum barbital NaCl ve 0.94gm 21.25gm çözme çözüm 1 hazırlayın. NaCl ve sodyum barbital son konsantrasyonları sırasıyla 1.02m ve 13mm. </li><li> Barbital, 125ml sıcak distile su 1.44gm eriterek çözüm 2 hazırlayın. Barbital son konsantrasyon 62.5mm. </li><li> Distile su 100 ml CaCl <sub>2</sub> MgCl <sub>2</sub> ve 4.41gm...

<ol>
	<li>Goldsby, R. A., Kindt, T. J., Osborne, B. A., Kuby, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Immunology</em>. , (2003).</li></ol>

<p class="jove_content"> CH <sub>50</sub> testinin pek çok etkileşimler tabi. Bazı SRBC tamamlayan ilişkisiz spontan hemoliz, diğerlerine göre daha kırılgan. Tavşan antikoru yakınlığı çok çok ve bir üreticiden diğerine değişir; bu SRBC bağlar antikor miktarını etkiler. Ayrıca, farklı miktarlarda antikor kaplama SRBC hücrelerinde antikor sonuçları ile SRBC duyarlılaştırıcı süreci. Örnek toplama ve depolama hatası önemli bir potansiyel kaynak vardır. Kompleman örneğin C1q, C3, C4 ve C5 son derece dayanıksı...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Sheep red blood cells</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CSL</td>
<td>2490201</td>
<td>Use at 1% final</td>
</tr>
<tr>
<td>Serum</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Human serum</td>
</tr>
<tr>
<td>Rabbit Anti-Sheep Haemolytic serum (RBCs), Unconjugated</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>AdB Serotec</td>
<td>C12HSB</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>96 well flat bottom plate</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sarstedt</td>
<td>83.1839</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Veronal buffered saline</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Use at 1x final</td>
</tr>
<tr>
<td>Waterbath</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plate reader</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>37&deg;C room/incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

measuring the 50% haemolytic complement (ch<sub>50</sub>) activity of serum

<p class="jove_content">Kompleman sistemi, hücre parçalama hedef yol opsonisation yoluyla aktif ve fagositoz kolaylaştırır proteinlerin bir grup. Bireysel kompleman, ancak bu yolun aktivite olarak herhangi bir bilgi sağlamaz belirlenebilir. CH<sub&gt; 50</sub&gt; Klasik kompleman yolunun (Şekil 1) aktivasyonu için bir tarama testi ve yolun herhangi bir bileşenin azaltılması, yokluğu ve / veya hareketsizlikten duyarlıdır. CH<sub&gt; 50</sub&gt;, Tavşan anti-koyun, kırmızı kan hücreleri antikor (haemolysin) ile ön kaplı koyun kırmızı kan hücreleri (SRBC) lyse klasik yolun serum kompleman fonksiyonel kapasite testleri. Antikor kaplı SRBC testi serum, klasik kompleman yolağı aktive olur ve hemoliz sonuçları ile inkübe edilir. Tamamlayıcısı bileşeni yoksa, CH<sub&gt; 50</sub&gt; Seviyesi sıfır olacaktır; klasik yolu bir ya da daha fazla bileşen düşmüş iseniz, CH<sub&gt; 50</sub&gt; Azalacak. Optimal sensitize SRBC sabit bir hacmi her serum seyreltme eklenir. Inkübasyondan sonra, karışım santrifüj ve hemoliz derecesi 540nm süpernatantı salınan hemoglobin absorbansı ölçerek sayısal. Antikor kaplı SRBC lyse serum test çeşitli dilüsyonları kapasitesini inceleyerek tamamlayıcı aktivite miktarı belirlenir. Bu video klasik kompleman yolu tamamlayıcı aktivite düzeyini analiz ilgili deneysel adımlar özetlenir.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum at JoVE.com

Measuring the 50% Haemolytic Complement CH50 Activity of Serum

<p class="jove_content">Klasik yolu antikor tarafından aktif ve hedef hücre parçalama içinde sona eriyor. CH<sub&gt; 50</sub&gt; Testi serum örneğinde kompleman aktivitesi bir ölçüsüdür sağlar. Bu video CH belirlenmesinde yer alan adımları gösteriyor<sub&gt; 50</sub&gt; Serum numune sonuçları hesaplama ve yorumlama.</p>

Ölçüm% 50 Hemolitik Kompleman (CH<sub> 50</subSerum) Faaliyet

The complement system is a group of proteins that when activated lead to target cell lysis and facilitates phagocytosis through opsonisation. Individual ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Measuring the 50% Haemolytic Complement (CH<sub>50</sub>) Activity of Serum

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

Kompleman tükenmesi Özel Hücre Populasyonlarının tükenmesi

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay

Hemaglütinasyon Testi kullanarak Reaktivite ve Serum Titre Belirlenmesi

Haemagglutination is a specific form of agglutination and is used when antibodies bind to red blood cells, which act as a particulate antigen. Red blood ...

Measuring Calpain Activity in Fixed and Living Cells by Flow Cytometry

Sabit ve Yaşam Hücreler Sitometrisi ile Calpain Aktivitesi Ölçme

Calpains are ubiquitous intracellular, calcium-sensitive, neutral cysteine proteases 1. Calpains play crucial roles in many physiological processes, ...

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with <em>Listeria monocytogenes</em>

Measuring Bacterial Load and Immune Responses in Mice Infected with Listeria monocytogenes

Ile Enfekte Fare Bakteriyel Yük ve Bağışıklık Yanıtları Ölçüm<em> Listeria monocytogenes</em

Listeria monocytogenes (Listeria) is a Gram-positive facultative intracellular pathogen1. Mouse studies typically employ intravenous injection of ...

Determining the Phagocytic Activity of Clinical Antibody Samples

Klinik Antikor Örnekleri fagositik Aktivitesi Belirlenmesi

Antibody-driven phagocytosis is induced via the engagement of Fc receptors on professional phagocytes, and can contribute to both clearance as well as ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from <em>Ixodes scapularis</em> Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Kırmızı kan hücreleri üzerinde antikor kaynaklı kompleman aktivasyon sayısal tespiti için Yöntemler

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Measuring Local Anaphylaxis in Mice

Farelerde Yerel Anafilaksi Ölçme

Allergic responses are the result of the activation of mast cells and basophils, and the subsequent release of vasoactive and proinflammatory mediators. ...

Measuring Granulocyte and Monocyte Phagocytosis and Oxidative Burst Activity in Human Blood

İnsan Kanı Ölçüm Granülosit ve Monosit Fagositoz ve Oksidatif Burst Etkinlik

The granulocyte and monocyte phagocytosis and oxidative burst (OB) activity assay can be used to study the innate immune system. This manuscript provides ...

Assays for Studying the Role of Vitronectin in Bacterial Adhesion and Serum Resistance

Vitronectin bakteriyel yapışma ve Serum direnç rolü eğitim için deneyleri

Bacteria utilize complement regulators as a means of evading the host immune response. Here, we describe protocols for evaluating the role vitronectin ...

Ölçüm% 50 Hemolitik Kompleman (CH 50t

Ölçüm% 50 Hemolitik Kompleman (CH_50t