Name: transplantation of gfp-expressing blastomeres for live imaging of retinal and brain development in chimeric zebrafish embryos
Uploaded: 2010-07-19T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Transplantation of GFP-expressing Blastomeres for Live Imaging of Retinal and Brain Development in Chimeric Zebrafish Embryos at JoVE.com

وأيد هذه الدراسة من قبل المعاهد الوطنية للصحة (NIH) كور غرانت (5P30EY008098) والصناديق التالية لXW : المعاهد الوطنية للصحة والبحوث R01EY016099 المنحة لمنع العمى جائزة التطوير المهني. نشكر اثروب كيرا للحصول على مساعدة في مجال التصوير مبائر.

اليوم 1. إعداد 1. إعداد الصلبان الأسماك إعداد الصلبان البشرى من الزرد في المساء. لمنع التزاوج العشوائي قبل الوقت المطلوب ، استخدم فواصل لفصل الأسماك الإناث والذكور في أشرطة التزاوج. GFP - معربا عن ا...

<ol>
	<li>Zou, J., Lathrop, K., Sun, M., Wei, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intact+RPE+maintained+by+Nok+is+essential+for+retinal+epithelial+polarity+and+cellular+patterning+in+zebrafish.">Intact RPE maintained by Nok is essential for retinal epithelial polarity and cellular patterning in zebrafish.</a> Journal of Neuroscience. 28 (50), 13684-13695 (2008).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+guide+for+the+laboratory+use+of+zebrafish+(Danio+rerio).">A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio).</a> THE ZEBRAFISH BOOK. , (2007).</li><li>Ho, R. K., Kane, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-autonomous+action+of+zebrafish+spt-1+mutation+in+specific+mesodermal+precursors.">Cell-autonomous action of zebrafish spt-1 mutation in specific mesodermal precursors.</a> Nature. 348, 728-730 (1990).</li><li>Catalano, A., Raymond, P., Goldman, D., Wei, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+dou+yan+Mutation+Causes+Patterning+Defects+and+Extensive+Cell+Death+in+the+Retina.">Zebrafish dou yan Mutation Causes Patterning Defects and Extensive Cell Death in the Retina.</a> Developmental Dynamics. 236 (5), 1295-1236 (2007).</li></ol>

في هذا الفيديو ، ونحن يبرهن على وجود طريقة لزرع قسيم أرومي لتحليل وضع شبكية العين والدماغ في الزرد. ويمكن أيضا أن تستخدم هذا البروتوكول لتحليل تطور الأنسجة والأجهزة الأخرى عن طريق الإفراج عن ببساطة blastomeres المانحة إلى مواقع المناظرة في الأجنة المضيفة. وسم مع جزيئات GFP ...

E3 البيض المياه : <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 5 مم كلوريد الصوديوم </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.17 ملي بوكل </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.33 ملي CaCl 2 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.33 ملي MgSO 4 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0.1 ٪ الميثيلين الأزرق </li></ul>

transplantation of gfp-expressing blastomeres for live imaging of retinal and brain development in chimeric zebrafish embryos

تغيير الخلايا على نطاق واسع في مواقع وممتلكاتهم خلال مرحلة التطور الجنيني. وتنظم هذه التغييرات من التفاعلات بين الخلايا وبيئتها. أجنة خيالية ، والتي تتكون من خلايا جينية مختلفة عن الخلفية ، هي أدوات عظيمة لدراسة التفاعلات خلية خلية بوساطة الجينات في المصالح. شفافية الجنينية من الزرد في مراحل النمو المبكر تصاريح التصوير المباشر للالتشكل الأنسجة والأعضاء على المستوى الخلوي. هنا ، علينا أن نظهر بروتوكول لتوليد خيالية شبكية العين والدماغ في الأجنة الزرد والتصوير لأداء حية من خلايا المانحة. البروتوكول يشمل إعداد الإبر زرع ، وزرع GFP - معربا عن blastomeres المانحة لGFP سلبية المضيفين ، ودراسة سلوك الخلية المانحة تحت المجهر مبائر حية. مع تعديلات طفيفة ، ويمكن أيضا أن تستخدم هذا البروتوكول لدراسة التطور الجنيني من الأنسجة والأجهزة الأخرى في الزرد. وتناقش أيضا مزايا استخدام GFP إلى الخلايا المانحة التسمية.

Watch this Scientific Journal Video about Transplantation of GFP-expressing Blastomeres for Live Imaging of Retinal and Brain Development in Chimeric Zebrafish Embryos at JoVE.com

Transplantation of GFP-expressing Blastomeres for Live Imaging of Retinal and Brain Development in Chimeric Zebrafish Embryos

ندلل على بروتوكول لتوليد اجنة الزرد خيالية للسلوك التصوير العيش الخلوية خلال مرحلة التطور الجنيني.

زرع GFP - معربا عن Blastomeres للتصوير لايف التنمية الشبكية والدماغ في الجنين اسماك الزرد همي

Cells change extensively in their locations and property during embryogenesis. These changes are regulated by the interactions between the cells and their ...

Research

JoVE Journal

Biology

Two-photon axotomy and time-lapse confocal imaging in live zebrafish embryos

ثنائي الفوتون axotomy والوقت الفاصل بين التصوير مبائر يعيش في الأجنة الزرد

Zebrafish have long been utilized to study the cellular and molecular mechanisms of development by time-lapse imaging of the living transparent embryo.  ...

Live Imaging of the Zebrafish Embryonic Brain by Confocal Microscopy

يعيش تصوير الدماغ الجنينية اسماك الزرد بواسطة الميكروسكوب متحد البؤر

In this video, we demonstrate the method our lab has developed to analyze the cell shape changes and rearrangements required to bend and fold the ...

Generating Chimeric Zebrafish Embryos by Transplantation

توليد الأجنة اسماك الزرد همي بواسطة زرع

One of the most powerful tools used to gain insight into complex developmental processes is the analysis of chimeric embryos. A chimera is defined as an ...

Live Imaging of Cell Motility and Actin Cytoskeleton of Individual Neurons and Neural Crest Cells in Zebrafish Embryos

يعيش التصوير في القدرة على الحركة والهيكل الخلوي أكتين خلية من الخلايا العصبية الفردية والخلايا العصبية في الأجنة كريست اسماك الزرد

The zebrafish is an ideal model for imaging cell behaviors during development in vivo. Zebrafish embryos are externally fertilized and thus easily ...

Development of automated imaging and analysis for zebrafish chemical screens.

تطوير التصوير والتحليل الآلي للشاشات الكيميائية الزرد.

We demonstrate the application of image-based high-content screening (HCS) methodology to identify small molecules that can modulate the FGF/RAS/MAPK ...

Two-Photon-Based Photoactivation in Live Zebrafish Embryos

ثنائي الفوتون المستندة إلى تنشيط ضوئي في الأجنة الحية اسماك الزرد

Photoactivation of target compounds in a living organism has proven a valuable approach to investigate various biological processes such as embryonic ...

Dechorionation of Medaka Embryos and Cell Transplantation for the Generation of Chimeras

Dechorionation الجنين الميداكا وزرع الخلايا لتوليد الوهم

Medaka is a small egg-laying freshwater fish that allows both genetic and embryological analyses and is one of the three vertebrate model organisms in ...

Imaging Glycans in Zebrafish Embryos by Metabolic Labeling and Bioorthogonal Click Chemistry

Glycans التصوير في الأجنة التي وصفها اسماك الزرد الاستقلابية والكيمياء Bioorthogonal انقر

Imaging glycans in vivo has recently been enabled using a bioorthogonal chemical reporter strategy by treating cells or organisms with azide- or ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

يعيش التصوير من تخليص الخلية أفكارك أثناء<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; مرحلة التطور الجنيني

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...

Analysis of Oxidative Stress in Zebrafish Embryos

تحليل الاكسدة في الزرد الأجنة

High levels of reactive oxygen species (ROS) may cause a change of cellular redox state towards oxidative stress condition. This situation causes ...