Name: thin sectioning of slice preparations for immunohistochemistry
Uploaded: 2007-04-28T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry at JoVE.com

<ol><li> Voorbereiden mal van tape voor oktober platform. </li><li> Vul de vorm met oktober Freeze binnen de cryostaat of met behulp van gemalen droog ijs. </li><li> Verwijder de tape van rond bevroren oktober platform. </li><li> Lijn markeringen op bevriezing chucks and cryostaat montage fase en lock in Chuck. </li><li> Doorsnede van oktober platform totdat het oppervlak is vlak. </li><li> Verwijder dook oktober platform en leg ze op cryostaat bevriezing podium. </li><li> Plaats weefselmonster (voorheen gecryopreserveerd met 30% glycerol of su...

<ol>
	<li>Scoutern, C. W., O'Connor, R., Cunningham, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perfusion+fixation+of+research+animals.">Perfusion fixation of research animals.</a> <em style='font-style: italic'>Microsc. Today</em>. <b>14</b>, 26-33 (2006).</li><li>Cunningham, M. G., Connor, C. M., Zhang, K., Benes, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diminished+serotonergic+innervation+of+adult+medial+prefrontal+cortex+after+6-OHDA+lesions+in+the+newborn+rat.">Diminished serotonergic innervation of adult medial prefrontal cortex after 6-OHDA lesions in the newborn rat.</a> <em style='font-style: italic'>Brain Res. Dev. Brain Res</em>. <b>157</b>, 124-131 (2005).</li></ol>

<p> Het protocol hier gepresenteerde biedt onderzoekers met een beknopte, gemakkelijk te volgen schetsen van hoe dun cryostaatcoupes van de kleine, moeilijk te beheren, weefsel stukken, zoals biopsieën en de hersenen plakjes voor verdere studies moeten worden uitgevoerd, zoals het verkrijgen van verschillende kleuringsmethoden, in situ hybridisatie, of immunohistochemie. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>O. C. T.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ted Pella, Inc</td>
<td>27050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glycerol Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>30% Glycerol Solution in PBS w/v
</td>
</tr>
<tr>
<td>Sucrose Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>30% Sucrose Solution in PBS w/v</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

thin sectioning of slice preparations for immunohistochemistry

<p class="jove_content">Veel onderzoek in de neurowetenschappen, evenals andere disciplines, te betrekken het bestuderen van kleine, maar macroscopische stukken of delen van weefsel die bewaard zijn gebleven, vers verwijderd of weggesneden maar bleef levensvatbaar, zoals in het stukje voorbereiding van het hersenweefsel. Latere microscopisch onderzoek van dit materiaal kan lastig zijn, omdat het weefsel monsters kunnen worden moeilijk te hanteren. Aangetoond hier is een methode voor het verkrijgen van dunne cryostaatcoupes van weefsel met een dikte die kan variëren +0,2 tot +5,0 mm. We routinematig geknipt 400 micron dikke Vibratome hersencoupes serieel in 50-10 micron coronale cryostaat secties. De schijfjes worden doorgaans het eerst gebruikt voor elektrofysiologie experimenten en vervolgens vereisen microscopische analyse van de cytoarchitecture van de regio waar de opnames werden waargenomen. We hebben geconstrueerd een eenvoudig apparaat dat gecontroleerde en reproduceerbare voorbereiding en positionering van het weefsel slice toelaat. Dit apparaat bestaat uit een cilinder 5 cm lang met een diameter van 1,2 cm, die dienst doet als een beslissing tot bevriezing podium voor de slice. Een ring schuift precies over de cilinder het verstrekken van muren rond de slice waardoor het weefsel te worden ondergedompeld in de vrieskou verbinding (bijv. LGO). Dit is dan snel bevroren met gemalen droog ijs en de daaruit voortvloeiende wafer kan eenvoudig worden positie voor cryostaat snijden. Dunne secties kunnen ontdooien gemonteerd op gecoate dia&#39;s te laten verdere studies moeten worden uitgevoerd, zoals diverse kleuringsmethoden, in situ hybridisatie, of immunohistochemie, zoals hier aangetoond.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry at JoVE.com

Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry

<p class="jove_content">De huidige methode maakt het mogelijk reproduceerbaar cryostaat opdeling van de kleine, moeilijk te beheren, weefsel stukken, zoals biopsieën en hersenen plakjes. Wij gebruiken een eenvoudige aluminium bevriezing stadium bij het verwerken van weefsel en een standaard cryostaat om routinematig produceren 5-10 micron seriële secties van 400 micron dikke sneden hersenen te vergemakkelijken.</p>

Dun snijden van Slice voorbereidingen voor immunohistochemie

Many investigations in neuroscience, as well as other disciplines, involve studying small, yet macroscopic pieces or sections of tissue that have been ...

Research

JoVE Journal

Biology

Horizontal Slice Preparation of the Retina

Horizontale Snijd Voorbereiding van de Retina

Traditionally the vertical slice and the whole-mount preparation of the retina have been used to study the function of retinal circuits. However, many of ...

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

Organotypische Slice Cultuur van E18 Rat Brains

Organotypic slice cultures from embryonic rodent brains are widely used to study brain development. While there are often advantages to an in-vivo system, ...

Preparation of Gene Gun Bullets and Biolistic Transfection of Neurons in Slice Culture

De voorbereiding van Gene Gun Bullets and biolistische Transfectie van Neuronen in Slice Cultuur

Biolistic transfection is a physical means of transfecting cells by bombarding tissue with high velocity DNA coated particles. We provide a detailed ...

<em>Drosophila</em> Larval NMJ Immunohistochemistry

Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry

<em>Drosophila</em> larven NMJ Immunohistochemie

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

Preparation of Adult <em>Drosophila</em> Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

De voorbereiding van Adult<em> Drosophila</em> Ogen voor Thin Sectioning en microscopisch onderzoek

Drosophila has long been used as model system to study development, mainly due to the ease with which it is genetically tractable. Over the years, a ...

<em>Drosophila</em> Pupal Abdomen Immunohistochemistry

Drosophila Pupal Abdomen Immunohistochemistry

<em>Drosophila</em> popstadium Buik Immunohistochemie

The Drosophila pupal abdomen is an established model system for the study of epithelial morphogenesis and the development of sexually dimorphic ...

Production of Tissue Microarrays, Immunohistochemistry Staining and Digitalization Within the Human Protein Atlas

Productie van Weefsel Microarrays, Immunohistochemie vlekken en Digitalisering Binnen het menselijke eiwit Atlas

The  tissue microarray (TMA) technology provides the means for high-throughput  analysis of multiple tissues and cells. The technique is used within the ...

Optimized Protocol for Retinal Wholemount Preparation for Imaging and Immunohistochemistry

Geoptimaliseerd protocol voor Retina Wholemount Voorbereiding voor Imaging en Immunohistochemistry

Working with delicate tissue can be a complicating factor when performing immunohistochemical assessment. Here, we present a method that utilizes a ...

Spatiotemporal Mapping of Motility in <em>Ex Vivo</em> Preparations of the Intestines

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Spatiotemporele Mapping van Motiliteit in<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Bereidingen van de darmen

Multiple approaches have been used to record and evaluate gastrointestinal motility including: recording changes in muscle tension, intraluminal pressure, ...

Detection of Modified Forms of Cytosine Using Sensitive Immunohistochemistry

Detectie van gemodificeerde vormen van cytosine behulp Sensitive Immunohistochemie

Methylation of cytosine bases (5-methylcytosine, 5mC) occurring in vertebrate genomes is usually associated with transcriptional silencing. ...