Name: thin sectioning of slice preparations for immunohistochemistry
Uploaded: 2007-04-28T00:00:00
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<ol><li> Bereiten Form von Band für die OCT-Plattform. </li><li> Fill Form mit Oktober Einfrieren des Kryostaten oder mit zerkleinertem Trockeneis. </li><li> Entfernen Sie das Klebeband aus der ganzen gefrorenen OCT-Plattform. </li><li> Richten Sie Markierungen auf dem Gefrierpunkt Spannfutter und Kryostat Montage der Bühne und Schloss im Futter. </li><li> Schnitt durch OCT-Plattform bis die Oberfläche ist flach. </li><li> Entfernen Sie tauchte OCT-Plattform und am Kryostaten Einfrieren der Bühne. </li><li> Legen Sie Gewebeprobe (bisher mit...

<ol>
	<li>Scoutern, C. W., O'Connor, R., Cunningham, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perfusion+fixation+of+research+animals.">Perfusion fixation of research animals.</a> <em style='font-style: italic'>Microsc. Today</em>. <b>14</b>, 26-33 (2006).</li><li>Cunningham, M. G., Connor, C. M., Zhang, K., Benes, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diminished+serotonergic+innervation+of+adult+medial+prefrontal+cortex+after+6-OHDA+lesions+in+the+newborn+rat.">Diminished serotonergic innervation of adult medial prefrontal cortex after 6-OHDA lesions in the newborn rat.</a> <em style='font-style: italic'>Brain Res. Dev. Brain Res</em>. <b>157</b>, 124-131 (2005).</li></ol>

<p> Das Protokoll hier vorgestellten bietet den Forschern eine prägnante, leicht zu folgen skizzieren, wie dünn Kryostatschnitte von kleinen, schwer zu verwalten, Gewebeteile, wie Biopsien und Hirnschnitten für weitere Studien durchgeführt werden, wie erhalten verschiedenen Färbemethoden, in-situ-Hybridisierung oder Immunhistochemie. </p>

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		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
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		<tbody>
		
<tr>
<td>O. C. T.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ted Pella, Inc</td>
<td>27050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glycerol Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>30% Glycerol Solution in PBS w/v
</td>
</tr>
<tr>
<td>Sucrose Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>30% Sucrose Solution in PBS w/v</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

thin sectioning of slice preparations for immunohistochemistry

<p class="jove_content">Viele Untersuchungen in den Neurowissenschaften sowie anderen Disziplinen, auch mit der Analyse kleine, aber makroskopische Stücke oder Abschnitte von Gewebe, die erhalten wurden, frisch entfernt oder ausgeschnitten, aber lebensfähig gehalten, wie in Scheibe Vorbereitungen des Hirngewebes. Nachfolgende mikroskopische Untersuchungen dieses Materials kann eine Herausforderung sein, da die Gewebeproben kann schwierig zu handhaben. Hier gezeigt wird ein Verfahren zur Gewinnung dünne Kryostatschnitte des Gewebes mit einer Dicke von 0,2 bis 5,0 mm, die reichen können. Wir routinemäßig Schnitt 400 Mikron dick Vibratom Hirnschnitten seriell in 5-10 Mikrometer koronalen Kryostatschnitte. Die Scheiben sind in der Regel zunächst für Elektrophysiologie Experimente verwendet und dann verlangen, mikroskopische Analyse der Zytoarchitektur der Region, aus der die Aufnahmen wurden nicht beobachtet. Wir haben ein einfaches Gerät, das kontrollierte und reproduzierbare Herstellung und Positionierung der Gewebeschnitt erlaubt konstruiert. Dieses Gerät besteht aus einem Zylinder 5 cm in der Länge mit einem Durchmesser von 1,2 cm, die als Bühne für das Einfrieren der Scheibe dient. Ein Ring eng gleitet über den Zylinder bietet Mauern um die Scheibe so dass das Gewebe in dem Gefrierpunkt Verbindung eingetaucht werden (zB OCT). Dies ist dann schnell mit zerstoßenem Trockeneis eingefroren und die daraus resultierenden Wafer Position leicht für Kryostat Schnitte. Dünne Schnitte werden können Tau-montiert auf beschichtete Objektträger, damit weitere Untersuchungen durchgeführt, wie verschiedene Färbemethoden werden, in-situ-Hybridisierung oder Immunhistochemie, wie hier gezeigt.</p>

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Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry

<p class="jove_content">Das vorliegende Verfahren ermöglicht reproduzierbare Kryostat Schnitte von kleinen, schwer zu verwalten, Gewebeteile, wie Biopsien und Hirnschnitten. Wir verwenden ein einfaches Aluminium Einfrieren der Bühne um die Behandlung von Gewebe-und ein Standard-Kryostat routinemäßig produzieren 5-10 Mikrometer Serienschnitte von 400 Mikrometer dicken Hirnschnitten zu erleichtern.</p>

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