Name: thin sectioning of slice preparations for immunohistochemistry
Uploaded: 2007-04-28T00:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry at JoVE.com

<ol><li> Förbered mögel från tejp för oktober plattform. </li><li> Fyll formen med oktober Frysning inom kryostat eller genom att använda krossad torris. </li><li> Ta bort tejpen runt frysta oktober plattform. </li><li> Passa märken på frysning chuck och kryostat montering scen och lås i Chuck. </li><li> Sektion genom oktober plattformen tills ytan är platt. </li><li> Ta bort återuppstod oktober plattform och plats på kryostat frysning scenen. </li><li> Placera vävnadsprov (tidigare frysförvarade med 30% glycerol eller sackaros i P...

<ol>
	<li>Scoutern, C. W., O'Connor, R., Cunningham, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perfusion+fixation+of+research+animals.">Perfusion fixation of research animals.</a> <em style='font-style: italic'>Microsc. Today</em>. <b>14</b>, 26-33 (2006).</li><li>Cunningham, M. G., Connor, C. M., Zhang, K., Benes, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diminished+serotonergic+innervation+of+adult+medial+prefrontal+cortex+after+6-OHDA+lesions+in+the+newborn+rat.">Diminished serotonergic innervation of adult medial prefrontal cortex after 6-OHDA lesions in the newborn rat.</a> <em style='font-style: italic'>Brain Res. Dev. Brain Res</em>. <b>157</b>, 124-131 (2005).</li></ol>

<p> Protokollet presenteras här ger forskare med en kortfattad och lätt att följa konturerna av hur man kan få tunna kryostatsnitt av små, svåra att hantera, vävnad bitar, t ex biopsier och skivor hjärnan för vidare studier som ska utföras, t.ex. olika färgning metoder, in situ hybridisering, eller immunohistokemi. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>O. C. T.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ted Pella, Inc</td>
<td>27050</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glycerol Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>30% Glycerol Solution in PBS w/v
</td>
</tr>
<tr>
<td>Sucrose Solution</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>30% Sucrose Solution in PBS w/v</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

thin sectioning of slice preparations for immunohistochemistry

<p class="jove_content">Många undersökningar inom neurovetenskap, liksom andra discipliner, involvera studera små, men ändå makroskopiska bitar eller delar av vävnad som har bevarats, nyligen bort, eller exciderad men höll livskraftiga som i bit beredningar av hjärnvävnad. Efterföljande mikroskopiska studier av detta material kan vara en utmaning, eftersom vävnadsprover kan vara svårt att hantera. Visade här är en metod för att få tunna kryostatsnitt av vävnad med en tjocklek som kan variera från 0,2 till 5,0 mm. Vi skär rutinmässigt 400 mikron tjocka skivor Vibratome hjärnan seriellt till 5-10 mikron coronal kryostatsnitt. De skivor som vanligtvis först används för elektrofysiologi experiment och sedan kräver mikroskopisk analys av cytoarchitecture i regionen där inspelningarna observerades. Vi har konstruerat en enkel anordning som möjliggör kontrollerade och reproducerbara förberedelse och placering av vävnad skiva. Denna enhet består av en cylinder 5 cm i längd med en diameter på 1,2 cm, vilket fungerar som en frysning steg för segmentet. En ring glider tätt över cylindern ger väggarna runt segmentet gör att vävnaden att vara nedsänkt i frysning förening (t.ex. oktober). Detta är sedan snabbt fryses med krossad torris och den resulterande rån kan vara läge lätt för kryostat snittning. Tunna sektioner kan tina-monteras på bestruket diabilder att tillåta ytterligare studier som skall utföras, såsom olika färgning metoder, in situ hybridisering, eller immunohistokemi, vilket visas här.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry at JoVE.com

Thin Sectioning of Slice Preparations for Immunohistochemistry

<p class="jove_content">Denna metod gör det möjligt reproducerbara kryostat sektionering av små, svåra att hantera, vävnad bitar, t ex biopsier och skivor hjärnan. Vi använder ett enkelt steg aluminium frysning för att underlätta hanteringen av vävnad och en standard kryostat att rutinmässigt producera 5-10 micron seriella delar från 400 mikron tjocka hjärnan skivor.</p>

Tunna Sektionering av Slice Förberedelser för Immunohistokemi

Many investigations in neuroscience, as well as other disciplines, involve studying small, yet macroscopic pieces or sections of tissue that have been ...

Research

JoVE Journal

Biology

Horizontal Slice Preparation of the Retina

Horisontell Skiva Beredning av näthinnan

Traditionally the vertical slice and the whole-mount preparation of the retina have been used to study the function of retinal circuits. However, many of ...

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

Organotypic Slice Kultur av E18 råttors hjärnor

Organotypic slice cultures from embryonic rodent brains are widely used to study brain development. While there are often advantages to an in-vivo system, ...

Preparation of Gene Gun Bullets and Biolistic Transfection of Neurons in Slice Culture

Beredning av Bullets Gene Gun och Biolistic transfektion av nervceller i Slice Kultur

Biolistic transfection is a physical means of transfecting cells by bombarding tissue with high velocity DNA coated particles. We provide a detailed ...

<em>Drosophila</em> Larval NMJ Immunohistochemistry

Drosophila Larval NMJ Immunohistochemistry

<em>Drosophila</em> Larvernas NMJ Immunohistokemi

The Drosophila neuromuscular junction (NMJ) is an established model system used for the study of synaptic development and plasticity. The widespread use ...

Preparation of Adult <em>Drosophila</em> Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Preparation of Adult Drosophila Eyes for Thin Sectioning and Microscopic Analysis

Beredning av vuxna<em> Drosophila</em> Ögon för Thin Sektionering och mikroskopisk analys

Drosophila has long been used as model system to study development, mainly due to the ease with which it is genetically tractable. Over the years, a ...

<em>Drosophila</em> Pupal Abdomen Immunohistochemistry

Drosophila Pupal Abdomen Immunohistochemistry

<em>Drosophila</em> PUPP-Mage Immunohistokemi

The Drosophila pupal abdomen is an established model system for the study of epithelial morphogenesis and the development of sexually dimorphic ...

Production of Tissue Microarrays, Immunohistochemistry Staining and Digitalization Within the Human Protein Atlas

Produktion av Tissue Microarrays, immunohistokemi Staining och digitalisering inom Human Protein Atlas

The  tissue microarray (TMA) technology provides the means for high-throughput  analysis of multiple tissues and cells. The technique is used within the ...

Optimized Protocol for Retinal Wholemount Preparation for Imaging and Immunohistochemistry

Optimerad Protokoll för Retinal Wholemount Förberedelse för Imaging och Immunohistokemi

Working with delicate tissue can be a complicating factor when performing immunohistochemical assessment. Here, we present a method that utilizes a ...

Spatiotemporal Mapping of Motility in <em>Ex Vivo</em> Preparations of the Intestines

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Spatiotemporal Kartläggning av motilitet i<em&gt; Ex vivo</em&gt; Förberedelser tarm

Multiple approaches have been used to record and evaluate gastrointestinal motility including: recording changes in muscle tension, intraluminal pressure, ...

Detection of Modified Forms of Cytosine Using Sensitive Immunohistochemistry

Detektering av modifierade former av cytosin Använda Sensitive Immunohistokemi

Methylation of cytosine bases (5-methylcytosine, 5mC) occurring in vertebrate genomes is usually associated with transcriptional silencing. ...