Name: isolation of human umbilical arterial smooth muscle cells (huasmc)
Uploaded: 2010-07-03T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells HUASMC at JoVE.com

<p class="jove_content"> El hospital Amato Lusitano, Castelo Branco en Portugal. <br /> El hospital Sousa Martins, Guarda Portugal. </p>

<ol><li> Las arterias son obtenidos a partir de piezas de la UC de 3.7 cm. </li><li> Gelatina de Wharton que rodea a las arterias se retiró cuidadosamente cortando con unas tijeras. </li><li> Una aguja de extremo romo de un diámetro exterior de 0,6-1mm se insertó unos 7 mm de un extremo de las arterias disecadas. </li><li> Para quitar la sangre que queda dentro de los vasos, las arterias están en posición vertical y perfundidos con, aproximadamente de 20 a 40 ml, solución salina fisiológica (PSS), utilizando una jeringa de 20 ml conectad...

<ol>
	<li>Van Rijen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gap+junctions+in+human+umbilical+cord+endothelial+cells+contain+multiple+connexins.">Gap junctions in human umbilical cord endothelial cells contain multiple connexins.</a> <em style='font-style: italic'>The American journal of physiology</em>. <b>272</b> (1 PT 1), C117-C117 (1997).</li><li>Mart&#237;n de Llano, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procedure+to+consistently+obtain+endothelial+and+smooth+muscle+cell+cultures+from+umbilical+cord+vessels.">Procedure to consistently obtain endothelial and smooth muscle cell cultures from umbilical cord vessels.</a> <em style='font-style: italic'>Translational Research</em>. <b>149</b> (1), 1-9 (2007).</li><li>Jaffe, E. A., Nachman, R. L., Becker, C. G., Minick, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culture+of+human+endothelial+cells+derived+from+umbilical+veins.+Identification+by+morphologic+and+immunologic+criteria.">Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphologic and immunologic criteria.</a> <em style='font-style: italic'>J Clin Invest</em>. <b>52</b> (11), 2745-2756 (1973).</li><li>Cairr&#227;o, E., Santos-Silva, A., Alvarez, E., Correia, I., Verde, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+human+umbilical+artery+smooth+muscle+cells+expressing+functional+calcium+channels.">Isolation and culture of human umbilical artery smooth muscle cells expressing functional calcium channels.</a> <em style='font-style: italic'>In Vitro Cellular &#38; Developmental Biology-Animal</em>. <b>45</b> (3), 175-184 (2009).</li></ol>

<p class="jove_content"> El SMC se puede utilizar como modelo para futuros ensayos con fármacos constrictor, para aislar y caracterizar la estructura tipo L-canales de calcio, para estudiar los aspectos celulares y moleculares de la función vascular y para su uso en la ingeniería de tejidos. SMC y EC son fundamentales para el desarrollo de nuevos biomateriales que se pueden utilizar en la producción de vasos sanguíneos semi sintéticos para su uso en seres humanos. </p>

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM-F12</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>095K8311</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biochrom-AG</td>
<td>0117T</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RPMI 1640</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>3103806</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Collagen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>067K2302</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Antibiotic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>10 &mu;L/ 1 mL of medium</td>
</tr>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sterilized</td>
</tr>
<tr>
<td>Needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Diameter of 0.6-1mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>10 - 20 mL</td>
</tr>
<tr>
<td>Physiological Saline Solution (PSS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>20-40 mL per artery</td>
</tr>
<tr>
<td>Collagenase type I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>047K1052</td>
<td>3 mL per artery</td>
</tr>
<tr>
<td>Hank's Buffered Salt Solution(HBSS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Diluted collagenase </td>
</tr>
<tr>
<td>Phosphate buffered saline solution (PBS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Warmed to 37&deg;C</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

isolation of human umbilical arterial smooth muscle cells (huasmc)

<p class="jove_content">El cordón umbilical humano (UC) es una muestra biológica que se puede obtener fácilmente justo después del nacimiento. Esta muestra biológica es que la mayoría de las veces, descartados y su cobro no implica ningún riesgo añadido para la salud del recién nacido o de s madre. Además, no se plantean problemas éticos. La UC está compuesto por una vena y dos arterias de la que tanto las células endoteliales (EC)<sup&gt; 1</sup&gt; Y células musculares lisas (CML)<sup&gt; 2</sup&gt;, Dos de los principales componentes celulares de los vasos sanguíneos, se puede aislar. En este proyecto, el SMC se han obtenido tras el tratamiento enzimático de las arterias de la UC en consecuencia el procedimiento experimental descrito previamente por Jaffe<em&gt; Et al</em<sup&gt; 3</sup&gt;. Tras el aislamiento de células que se mantienen en t-flash con DMEM-F12 suplementado con 5% de suero fetal bovino y se cultivaron durante varios pasajes. Las células mantienen sus características fenotípicas, morfológicas y otras en las diferentes generaciones. El objetivo de este estudio fue aislar las células del músculo liso con el fin de usarlos como modelos para futuros ensayos con fármacos constrictor, aislar y caracterizar la estructura tipo L-canales de calcio, para estudiar los aspectos celulares y moleculares de la función vascular<sup&gt; 4</sup&gt; Y para su uso en la ingeniería de tejidos.</p>

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Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells HUASMC

<p class="jove_content">El cordón umbilical se utilizan para aislar las células musculares lisas de diferentes maneras. En este trabajo se utilizó el tratamiento enzimático de células aisladas de músculo liso.</p>

El aislamiento de los Derechos Humanos de la arteria umbilical células musculares lisas (HUASMC)

The human umbilical cord (UC) is a biological sample that can be easily obtained just after birth. This biological sample is, most of the time, discarded ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells (HUASMC)

Isolation of Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC)

Isolation of Human Umbilical Vein Endothelial Cells HUVEC

El aislamiento de las células endoteliales de vena umbilical (HUVEC)

Angiogenesis is a complex multi-step process, where in response to angiogenic stimuli, new vessels are created from the existing vasculature. These steps ...

Investigación

Biología

Focal Ca<sup>2+</sup> Transient Detection in Smooth Muscle

Focal Ca2+ Transient Detection in Smooth Muscle

Focal Ca<sup> 2 +</sup> Detección de transitorios en el músculo liso

Ca2+ imaging of smooth muscle provides insight into cellular mechanisms that may not result in changes of membrane potential, such as the release of Ca2+ ...

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells MSCs and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells ECFCs

Aislamiento y suero animal expansión libre de cordón umbilical humano derivado de células mesenquimales del estroma (MSC) y endoteliales formadoras de colonias Células Progenitoras (ECFCs)

The umbilical cord is a rich source for progenitor cells with high proliferative potential including mesenchymal stromal cells (also termed mesenchymal ...

Exploring Arterial Smooth Muscle Kv7 Potassium Channel Function using Patch Clamp Electrophysiology and Pressure Myography

Exploración del músculo liso arterial KV7 función del canal de potasio mediante electrofisiología Patch Clamp y miografía presión

Contraction  or relaxation of smooth muscle cells within the walls of resistance arteries  determines the artery diameter and thereby controls flow of ...

Isolation, Culture, and Transplantation of Muscle Satellite Cells

Aislamiento, cultivo y trasplante de células musculares satélite

Muscle satellite cells are a stem cell population required for postnatal skeletal muscle development and regeneration, accounting for 2-5% of sublaminal ...

Isolation of Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells from Neonatal Mice

El aislamiento de la arteria pulmonar células musculares lisas de los ratones recién nacidos

Pulmonary hypertension is a significant cause of morbidity and mortality in infants. Historically, there has been significant study of the signaling ...

Isolation of Blood-vessel-derived Multipotent Precursors from Human Skeletal Muscle

Aislamiento de Vaso sanguíneo derivado Multipotentes Precursores de músculo esquelético humano

Since the discovery of mesenchymal stem/stromal cells (MSCs), the native identity and localization&#160;of MSCs have been obscured by their retrospective ...

Two-photon Imaging of Intracellular Ca<sup>2+</sup> Handling and Nitric Oxide Production in Endothelial and Smooth Muscle Cells of an Isolated Rat Aorta

Two-photon Imaging of Intracellular Ca2+ Handling and Nitric Oxide Production in Endothelial and Smooth Muscle Cells of an Isolated Rat Aorta

De dos fotones de imágenes de Ca intracelular<sup&gt; 2 +</sup&gt; Manejo y producción de óxido nítrico en el endotelio y las células del músculo liso de la aorta de rata aislada

Calcium is a very important regulator of many physiological processes in vascular tissues. Most endothelial and smooth muscle functions highly depend on ...

Isolation of Murine Coronary Vascular Smooth Muscle Cells

Aislamiento de murino coronaria células musculares lisas vasculares

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs ...

Preparation and Utilization of Freshly Isolated Human Detrusor Smooth Muscle Cells for Characterization of 9-Phenanthrol-Sensitive Cation Currents

Preparación y utilización de células musculares lisas de detrusor humano recién aisladas para la caracterización de corrientes de cationes sensibles al 9-Phenanthrol

Detrusor smooth muscle (DSM) cells present within the urinary bladder wall ultimately facilitate urine storage and voiding. Preparation of the viable, ...