Name: isolation of human umbilical arterial smooth muscle cells (huasmc)
Uploaded: 2010-07-03T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells HUASMC at JoVE.com

<p class="jove_content"> Sjukhus Amato Lusitano, Castelo Branco Portugal. <br /> Sjukhus Sousa Martins, Guarda Portugal. </p>

<ol><li> Artärer erhålls från UC bitar 3-7 cm. </li><li> Wharton gelé som omger blodkärlen var försiktigt bort genom att klippa den med sax. </li><li> Ett trubbigt slut nål i en yttre diameter på 0,6-1mm sattes in ca 7 mm från ena änden av dissekeras artärerna. </li><li> För att ta bort blod kvar inuti fartyg, är artärerna vertikalt hålls och perfusion med cirka 20 till 40 ml, fysiologisk koksaltlösning (PSS), med hjälp av en 20-mL spruta kopplad till en nål. Om det behövs, var detta tvättsteg upprepas flera gånger. </li><l...

<ol>
	<li>Van Rijen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gap+junctions+in+human+umbilical+cord+endothelial+cells+contain+multiple+connexins.">Gap junctions in human umbilical cord endothelial cells contain multiple connexins.</a> <em style='font-style: italic'>The American journal of physiology</em>. <b>272</b> (1 PT 1), C117-C117 (1997).</li><li>Mart&#237;n de Llano, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Procedure+to+consistently+obtain+endothelial+and+smooth+muscle+cell+cultures+from+umbilical+cord+vessels.">Procedure to consistently obtain endothelial and smooth muscle cell cultures from umbilical cord vessels.</a> <em style='font-style: italic'>Translational Research</em>. <b>149</b> (1), 1-9 (2007).</li><li>Jaffe, E. A., Nachman, R. L., Becker, C. G., Minick, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culture+of+human+endothelial+cells+derived+from+umbilical+veins.+Identification+by+morphologic+and+immunologic+criteria.">Culture of human endothelial cells derived from umbilical veins. Identification by morphologic and immunologic criteria.</a> <em style='font-style: italic'>J Clin Invest</em>. <b>52</b> (11), 2745-2756 (1973).</li><li>Cairr&#227;o, E., Santos-Silva, A., Alvarez, E., Correia, I., Verde, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+human+umbilical+artery+smooth+muscle+cells+expressing+functional+calcium+channels.">Isolation and culture of human umbilical artery smooth muscle cells expressing functional calcium channels.</a> <em style='font-style: italic'>In Vitro Cellular &#38; Developmental Biology-Animal</em>. <b>45</b> (3), 175-184 (2009).</li></ol>

<p class="jove_content"> SMC kan användas som modeller för framtida analyser med constrictor droger, att isolera och strukturellt präglar L-typ kalciumkanaler, för att studera cellulära och molekylära aspekter av vaskulär funktion och använda dem i vävnadsteknik. SMC och ECS är grundläggande för utvecklingen av nya biomaterial som kan användas i produktionen av semi syntetiskt blodkärl för att användas på människa. </p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM-F12</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>095K8311</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biochrom-AG</td>
<td>0117T</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>RPMI 1640</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gibco</td>
<td>3103806</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Collagen</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>067K2302</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Antibiotic</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>10 &mu;L/ 1 mL of medium</td>
</tr>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sterilized</td>
</tr>
<tr>
<td>Needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Diameter of 0.6-1mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>10 - 20 mL</td>
</tr>
<tr>
<td>Physiological Saline Solution (PSS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>20-40 mL per artery</td>
</tr>
<tr>
<td>Collagenase type I</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>047K1052</td>
<td>3 mL per artery</td>
</tr>
<tr>
<td>Hank's Buffered Salt Solution(HBSS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Diluted collagenase </td>
</tr>
<tr>
<td>Phosphate buffered saline solution (PBS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Warmed to 37&deg;C</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

isolation of human umbilical arterial smooth muscle cells (huasmc)

<p class="jove_content">Den mänskliga navelsträng (UC) är ett biologiskt prov som enkelt kan erhållas strax efter födseln. Denna biologiska prov, för det mesta, kasseras och insamlingen inte innebär någon extra risk för det nyfödda barnet eller modern hälsa. Dessutom inga etiska frågor väcks. UC är komponerad av en ven och två artärer som både endotelcellerna (ECS)<sup&gt; 1</sup&gt; Och glatta muskelceller (SMC)<sup&gt; 2</sup&gt; Kan två av de viktigaste cellulära komponenterna i blodkärl, isoleras. I detta projekt SMC erhölls efter enzymatisk behandling av UC artärerna därför den experimentella procedur som tidigare beskrivits av Jaffe<em&gt; Et al</em<sup&gt; 3</sup&gt;. Efter cell isolering de hölls i t-blixt med DMEM-F12 kompletterad med 5% fetalt bovinserum och odlades i flera passager. Celler behöll sin morfologiska och andra fenotypiska egenskaper i olika generationer. Syftet med denna studie var att isolera glatta muskelceller i syfte att använda dem som modeller för framtida analyser med constrictor droger, isolera och strukturellt präglar L-typ kalciumkanaler, för att studera cellulära och molekylära aspekter av den vaskulära funktionen<sup&gt; 4</sup&gt; Och använda dem i vävnadsteknik.</p>

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells HUASMC at JoVE.com

Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells HUASMC

<p class="jove_content">Navelsträngen används för att isolera glatta muskelceller av olika sätt. I detta arbete använde vi enzymatisk behandling till isolerade glatta muskelceller.</p>

Isolering av mänskliga Umbilical arteriella glatta muskelceller (HUASMC)

The human umbilical cord (UC) is a biological sample that can be easily obtained just after birth. This biological sample is, most of the time, discarded ...

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells (HUASMC)

Isolation of Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC)

Isolation of Human Umbilical Vein Endothelial Cells HUVEC

Isolering av mänskliga Endothelial Umbilical Vein Cells (HUVEC)

Angiogenesis is a complex multi-step process, where in response to angiogenic stimuli, new vessels are created from the existing vasculature. These steps ...

Focal Ca<sup>2+</sup> Transient Detection in Smooth Muscle

Focal Ca2+ Transient Detection in Smooth Muscle

Focal Ca<sup> 2 +</sup> Övergående Påvisande i glatt muskulatur

Ca2+ imaging of smooth muscle provides insight into cellular mechanisms that may not result in changes of membrane potential, such as the release of Ca2+ ...

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells (ECFCs)

Isolation and Animal Serum Free Expansion of Human Umbilical Cord Derived Mesenchymal Stromal Cells MSCs and Endothelial Colony Forming Progenitor Cells ECFCs

Isolering och Animal Serum Fri ökningen av mänsklig Navelsträngen Härledda mesenkymala stromaceller (MSC) och Endothelial kolonibildande progenitorceller (ECFCs)

The umbilical cord is a rich source for progenitor cells with high proliferative potential including mesenchymal stromal cells (also termed mesenchymal ...

Exploring Arterial Smooth Muscle Kv7 Potassium Channel Function using Patch Clamp Electrophysiology and Pressure Myography

Exploring arteriella glatta muskel KV7 Funktion kaliumkanal med Elektrofysiologi Patch Clamp och tryck Myography

Contraction  or relaxation of smooth muscle cells within the walls of resistance arteries  determines the artery diameter and thereby controls flow of ...

Isolation, Culture, and Transplantation of Muscle Satellite Cells

Isolering, kultur, och transplantation av muskelsatellitceller

Muscle satellite cells are a stem cell population required for postnatal skeletal muscle development and regeneration, accounting for 2-5% of sublaminal ...

Isolation of Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells from Neonatal Mice

Isolering av lungartären glatta muskelceller från neonatala möss

Pulmonary hypertension is a significant cause of morbidity and mortality in infants. Historically, there has been significant study of the signaling ...

Isolation of Blood-vessel-derived Multipotent Precursors from Human Skeletal Muscle

Isolering av blod-kärl-härledda multi prekursorer från Human Skeletal Muscle

Since the discovery of mesenchymal stem/stromal cells (MSCs), the native identity and localization&#160;of MSCs have been obscured by their retrospective ...

Two-photon Imaging of Intracellular Ca<sup>2+</sup> Handling and Nitric Oxide Production in Endothelial and Smooth Muscle Cells of an Isolated Rat Aorta

Two-photon Imaging of Intracellular Ca2+ Handling and Nitric Oxide Production in Endothelial and Smooth Muscle Cells of an Isolated Rat Aorta

Två-foton Imaging av intracellulär Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; Hantering och kväveoxidproduktion i Endothelial och glatta muskelceller av en isolerad råttaorta

Calcium is a very important regulator of many physiological processes in vascular tissues. Most endothelial and smooth muscle functions highly depend on ...

Isolation of Murine Coronary Vascular Smooth Muscle Cells

Isolering av murin Coronary vaskulära glatta muskelceller

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs ...

Preparation and Utilization of Freshly Isolated Human Detrusor Smooth Muscle Cells for Characterization of 9-Phenanthrol-Sensitive Cation Currents

Beredning och användning av nyligen isolerade mänskliga detrusor glatta muskelceller för karakterisering av 9-Feanthrol-Känsliga Katjonströmmar

Detrusor smooth muscle (DSM) cells present within the urinary bladder wall ultimately facilitate urine storage and voiding. Preparation of the viable, ...