Name: experimental metastasis assay
Uploaded: 2010-08-24T17:10:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Experimental Metastasis Assay at JoVE.com

פרוטוקול זה נבדק אופטימיזציה תחילה במעבדה של ד&quot;ר ריצ&#39;רד היינס (MIT). המימון ניתן על ידי פרס NYSTEM IDEA (ל LX) ורות ל Kirschstein בפרס הלאומי לחקר שירות (כדי LX).

1. לדוגמא הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגדל תאים ומחוברות ~ 70% בתקשורת הספציפיים שלהם עם גורמי גדילה או FBS (למשל, DMEM עם FBS 10% MC-1 תאים). לשאוב התקשורת מהצלחת בעדינות לשטוף מספר פעמים עם 1 x PBS (8 g / L של NaCl, 0.2 גר &#39;/ L של KCl, 1.15 גר&#39; / L של Na 2 HPO 4 0...

<ol>
	<li>Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+changes+in+an+animal+melanoma+model+correlate+with+aggressiveness+of+human+melanoma+metastases.">Gene expression changes in an animal melanoma model correlate with aggressiveness of human melanoma metastases.</a> Mol Cancer Res. 6 (5), 760-760 (2008).</li><li>Clark, E. A., Golub, T. R., Lander, E. S., Hynes, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+analysis+of+metastasis+reveals+an+essential+role+for+RhoC.">Genomic analysis of metastasis reveals an essential role for RhoC.</a> Nature. 406 (6795), 532-532 (2000).</li><li>Xu, L., Begum, S., Hearn, J. D., Hynes, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GPR56,+an+atypical+G+protein-coupled+receptor,+binds+tissue+transglutaminase,+TG2,+and+inhibits+melanoma+tumor+growth+and+metastasis.">GPR56, an atypical G protein-coupled receptor, binds tissue transglutaminase, TG2, and inhibits melanoma tumor growth and metastasis.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (24), 9023-9023 (2006).</li><li>Kozlowski, J. M., Hart, I. R., Fidler, I. J., Hanna, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+human+melanoma+line+heterogeneous+with+respect+to+metastatic+capacity+in+athymic+nude+mice.">A human melanoma line heterogeneous with respect to metastatic capacity in athymic nude mice.</a> J Natl Cancer Inst. 72 (4), 913-913 (1984).</li><li>Kang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+multigenic+program+mediating+breast+cancer+metastasis+to+bone.">A multigenic program mediating breast cancer metastasis to bone.</a> Cancer Cell. 3 (6), 537-537 (2003).</li></ol>

גרורה היא הגורם המוביל למוות בקרב חולי סרטן. היא כוללת ארבעה צעדים מרכזיים: ניתוק של תאים סרטניים מ לוקוסים העיקרי שלהם, כניסתם למחזור (intravasation), יציאתם מן המחזור (extravasation), הישרדות וצמיחה באיבר מרוחק. גרורות האדם נחשב תהליך איטי לידי ביטוי לעתים קרובות, לאחר שנים של חבי...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>DMEM</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>10313-021</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>FBS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hyclone</td>
<td>SH30088.03</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>HBSS</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>14175-095</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>NaCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>S9888</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>KCl</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Mallinckrodt Chemicals</td>
<td>6838-04</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Na2 HPO4.7H2O</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Mallinckrodt Chemicals</td>
<td>7896-04</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>KH2PO4</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Mallinckrodt Chemicals</td>
<td>7100-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Phenol red</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma-Aldrich</td>
<td>P3532</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>EDTA-Na</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>EMD Biosciences</td>
<td>4010</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypan Blue</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15250-061</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Trypsin 2.5%</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>15090-046</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ethanol</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ultrapure</td>
<td>200-CSGP</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>50 ml Falcon Tube</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>89039-656</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microcentrifuge Tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Axygen Scientific</td>
<td>MCT-175-C</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Falcon 70&#181;m Cell Strainer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Biosciences</td>
<td>352350</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>5ml Falcon Culture Tube</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>60818-576</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hemacytometer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hausser Scientific</td>
<td>15170-208</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1 ml syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Biosciences</td>
<td>329650</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>30 &frac12; gauge needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD Biosciences</td>
<td>305106</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Mouse restrainer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Plas Labs Inc.</td>
<td>551-BSRR</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Surgical scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-940</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>08-902</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissecting Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon</td>
<td>SMZ1500</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Benchtop Centrifuge</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Thermoscientific</td>
<td>75003491</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

experimental metastasis assay

גרורה היא הגורם המוביל למוות בקרב חולי סרטן. כדי להבין את המנגנון של גרורות, assay גרורות ניסיוני הוקם באמצעות עכברים immunodeficient. מאמר זה מתאר את ההליכים הכרוכים assay זה, כולל הכנת המדגם, הזרקה תוך ורידית, ותאי culturing של גרורות בריאות. בקצרה, מספר שנקבע מראש של תאים סרטניים אנושיים היו מוכנים<em&gt; במבחנה</em&gt; ו מוזרק ישירות לתוך מחזור הדם של עכברים immunodeficient בוורידים הזנב שלהם. מספר קטן של תאים לשרוד את הטלטלה במחזור ולגדול כמו גרורות באיברים פנימיים, כגון הריאות. הם הזריקו לעכברים גזור לאחר תקופה מסוימת. הפצה הרקמה של גרורות נקבע תחת מיקרוסקופ לנתח. מספר גרורות ברקמה מסוימת נחשבת וזה ישירות בקורלציה עם היכולת גרורתי של תאים סרטניים מוזרקים. גרורות שקמה מבודדות תרבותי<em&gt; במבחנה</em&gt; כמו שורות תאים, אשר לעיתים קרובות להראות יכולות משופרות גרורתי מ קו הורית כאשר הזריקו לעכברים immunodeficient שוב. אלה נגזרים גרורתי מאוד להיות כלי שימושי עבור זיהוי גנים או מסלולים מולקולריים המווסתים התקדמות גרורתית.

Watch this Scientific Journal Video about Experimental Metastasis Assay at JoVE.com

Experimental Metastasis Assay

מאמר זה מתאר את הנהלים של assay גרורות ניסיוני המשמש כדי לקבוע את פוטנציאל גרורתי של שורות תאים סרטניים אנושיים.

גרורה ניסויית Assay

Metastasis is the leading cause of death in cancer patients.  To understand the mechanism of metastasis, an experimental metastasis assay was established ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Quantitative Analysis of Cancer Metastasis using an Avian Embryo Model

ניתוח כמותי של גרורות סרטן באמצעות דגם העובר העופות

During metastasis cancer cells disseminate from the primary tumor, invade into surrounding tissues, and spread to distant organs. Metastasis is a complex ...

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

ב Assay עמילות חוץ גופית mesothelial כי מודלים השלבים המוקדמים של גרורות סרטן השחלות

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer related deaths in the United States1. Despite a positive initial response to therapies, 70 to 90 ...

Models of Bone Metastasis

מודלים של גרורות עצם

Bone metastases are a common occurrence in several malignancies, including breast, prostate, and lung. Once established in bone, tumors are responsible ...

Experimental Human Pneumococcal Carriage

תובלת pneumococcal אנוש ניסויית

Experimental human pneumococcal carriage (EHPC) is scientifically important because nasopharyngeal carriage of Streptococcus pneumoniae is both the major ...

The In ovo CAM-assay as a Xenograft Model for Sarcoma

The In ovo CAM-assay as a Xenograft Model for Sarcoma

<em&gt; באוב</em&gt; CAM-assay כXenograftmodel לסרקומה

Sarcoma is a very rare disease that is heterogeneous in nature, all hampering the development of new therapies. Sarcoma patients are ideal candidates for ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

מודל Murine orthotopic של אדם סרטן ערמונית גרורה

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

Primary Tumor and MEF Cell Isolation to Study Lung Metastasis

גידול ראשוני ובידוד תא MEF לחקר ריאות גרורה

In breast tumorigenesis, the metastatic stage of the disease poses the greatest threat to the affected individual. Normal breast cells with altered ...

Chick Heart Invasion Assay for Testing the Invasiveness of Cancer Cells and the Activity of Potentially Anti-invasive Compounds

חומוס לב הפלישה Assay עבור בדיקת הפולשנות של תאי סרטן והפעילות של תרכובות פוטנציאלית אנטי-פולשנית

The goal of the chick heart assay is to offer a relevant organ culture method to study tumor invasion in three dimensions. The assay can distinguish ...

A "Patient-Like" Orthotopic Syngeneic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma Metastasis

&quot;מטופל כמו&quot; Orthotopic syngeneic עכבר הדגם של Hepatocellular Carcinoma גרורה

The majority of cancer-related deaths are caused by the metastasis of the cancer rather than the primary tumor itself. Yet, the underlying mechanisms of ...

Quantitation of Intra-peritoneal Ovarian Cancer Metastasis

כימות של גרורות סרטן השחלות תוך הצפק

Epithelial ovarian cancer (EOC) is the leading cause of death from gynecologic malignancy in the United States.  Mortality is due to diagnosis of 75% of ...