Name: floral-dip transformation of arabidopsis thaliana to examine ptso2::&beta;-glucuronidase reporter gene expression
Uploaded: 2010-06-11T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::ÃŽÂ²-glucuronidase Reporter Gene Expression at JoVE.com

نشكر تشون وانغ لبناء pTSO2 : GUS والصور في الشكل 1 ، ديتليف يجل لتقاسم بروتوكول GUS - مضمونة ، Sijacic Paja ، وكورتني Hollender للتعليقات مفيدة. ويدعم البحوث في المختبر Z. L ق من قبل مؤسسة العلوم الوطنية الأميركية (وIOB0616096 MCB0744752). معتمد جزئيا ZL من جامعة ميريلاند محطة التجربة الزراعية.

أولا الزهور وتراجع تحويل thaliana Arabidopsis <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ما يقرب من 1 الشهر قبل التحول ، وعلى زرع بذور Arabidopsis 4-8 القدور (5 الأواني بوصة مربعة) مع ما يقرب من 10-15 النباتات في وعاء. للنباتات ذات الخصوبة الطبيعية ، 4 والأواني من النباتات...

<ol>
	<li>Clough, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+dip:+agrobacterium-mediated+germ+line+transformation.">Floral dip: agrobacterium-mediated germ line transformation.</a> Methods Mol Biol. 286, 91-91 (2005).</li><li>Clough, S. J., Bent, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+dip:+a+simplified+method+for+Agrobacterium-mediated+transformation+of+Arabidopsis+thaliana.">Floral dip: a simplified method for Agrobacterium-mediated transformation of Arabidopsis thaliana.</a> Plant J. 16 (6), 735-735 (1998).</li><li>Wang, C., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arabidopsis+ribonucleotide+reductases+are+critical+for+cell+cycle+progression,+DNA+damage+repair,+and+plant+development.">Arabidopsis ribonucleotide reductases are critical for cell cycle progression, DNA damage repair, and plant development.</a> Plant Cell. 18 (2), 350-350 (2006).</li></ol>

يتم تحديد كفاءة التحول العديد من العوامل المختلفة ، التي تناقش أدناه : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صحة النباتات وسنهم وذات أهمية قصوى. واحد تقريبا في الشهر إنتاج المصانع القديمة العديد من البراعم الزهرية غير ناضجة مثالية. وسوف يطلق النار على ال...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>6-benzyladenine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>852430</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silwet-77</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Crompton Corp.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Toxic, wear gloves</td>
</tr>
<tr>
<td>Murashige and Skoog Basal medium (MS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M5519</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gamborg's vitamin solution 1000X</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1019</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>X-Gluc (5-bromo-4-chloro-3-indolyl &beta;-D-glucuronide cyclohexamine salt</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biosynth</td>
<td>B-7300</td>
<td>Toxic, light sensitive keep in the dark</td>
</tr>
<tr>
<td>Micropore 3M Tape</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>19027761</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

floral-dip transformation of arabidopsis thaliana to examine ptso2::&beta;-glucuronidase reporter gene expression

القدرة على إدخال جينات أجنبية إلى كائن حي هو الأساس للبيولوجيا الحديثة والتكنولوجيا الحيوية. في النموذج النباتات المزهرة<em&gt; thaliana Arabidopsis</em&gt; ، والأزهار وتراجع التحول الأسلوب<sup&gt; 1-2</supاستبدلت&gt; جميع الطرق السابقة بسبب بساطته ، والكفاءة ، والتكلفة المنخفضة. على وجه التحديد ، ويطلق النار من الشباب المزهرة<em&gt; Arabidopsis</emوانخفض&gt; النباتات في حل<em&gt; الأجرعية المورمة</em&gt; تحمل يبني البلازميد محددة. بعد غمس ، يتم إرجاع النباتات للنمو الطبيعي وبذور المحصول ، ونسبة صغيرة منها تتحول مع الجين الأجنبية ويمكن اختيار لتحتوي على مضادات حيوية في المتوسط. هذا الأسلوب من الزهور وتراجع بشكل ملحوظ سهلت<em&gt; Arabidopsis</emساهم&gt; البحوث وإلى حد كبير في فهمنا وظيفة الجين المصنع. في هذه الدراسة ، ونحن نستخدم الزهور وتراجع طريقة لتحويل الجينات المراسل ،<em&gt; β غلوكورونيداز (GUS)</em&gt; ، تحت سيطرة<em&gt; TSO2</em&gt; المروج.<em&gt; TSO2</em&gt; الترميز لاختزال ريبونوكليوتيد (RNR) الوحيدات الصغيرة<sup&gt; 3</sup&gt; ، هو جين ينظم دورة الخلية الأساسية للdNDP الحيوي في المرحلة - S من دورة الخلية. فحص<em&gt; GUS</em&gt; التعبير في المعدلة وراثيا<em&gt; Arabidopsis</em&gt; تبين أن الشتلات<em&gt; TSO2</emوأعرب عن&gt; في تقسيم بنشاط الأنسجة. يمكن أن يكون الأسلوب التجريبي وذكرت ومواد تتكيف بسهولة ، ليس فقط للبحث ولكن أيضا من أجل التعليم في المدارس الثانوية والمستويات الجامعية.

Watch this Scientific Journal Video about Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::ÃŽÂ²-glucuronidase Reporter Gene Expression at JoVE.com

Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::ÃƒÅ½Ã‚Â²-glucuronidase Reporter Gene Expression

هذه المقالة يوضح الأزهار وتراجع طريقة<em&gt; الأجرعية المورمة</em&gt; بوساطة تحويل<em&gt; thaliana Arabidopsis</em&gt;. من خلال إدخال خلية تنظيم دورة المروج ، المراسل ،<em&gt; pTSO2 : β غلوكورونيداز (GUS)</em&gt; ، في<em&gt; Arabidopsis</em&gt; ، ونحن يوضح كيف يمكن للمرء التعبير الصحفي بالكشف عن GUS في الشتلات وراثيا.

الأزهار وتراجع تحويل thaliana Arabidopsis لتفحص pTSO2 : β غلوكورونيداز التعبير مراسل جين

The ability to introduce foreign genes into an organism is the foundation for modern biology and biotechnology. In the model flowering plant Arabidopsis ...

Research

JoVE Journal

Biology

Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::&beta;-glucuronidase Reporter Gene Expression

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

التحضير لزراعة الخلايا المكونة للدم الابتدائية من نخاع عظام الفئران لElectroporation

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

Using the Gene Pulser MXcell Electroporation System to Transfect Primary Cells with High Efficiency

باستخدام الجينات Electroporation MXcell بولسير النظام لTransfect الخلايا الأولية ذات الكفاءة العالية

Using an Automated Cell Counter to Simplify Gene Expression Studies: siRNA Knockdown of IL-4 Dependent Gene Expression in Namalwa Cells

باستخدام خلية مكافحة الآلي لتبسيط دراسات التعبير الجيني : ضربة قاضية سيرنا من IL - 4 التعبير الجيني في الخلايا التابعة Namalwa

The use of siRNA mediated gene knockdown is continuing to be an important tool in studies of gene expression.  siRNA studies are being conducted not only ...

Investigating Tissue- and Organ-specific Phytochrome Responses using FACS-assisted Cell-type Specific Expression Profiling in Arabidopsis thaliana

Investigating Tissue- and Organ-specific Phytochrome Responses using FACS-assisted Cell-type Specific Expression Profiling in Arabidopsis thaliana

التحقيق في الأنسجة والجهاز محددة الردود فيتوكروم باستخدام نظام مراقبة الأصول الميدانية بمساعدة خلية من نوع التنميط معينة في التعبير thaliana Arabidopsis</em

Light mediates an array of developmental and adaptive processes throughout the life cycle of a plant. Plants utilize light-absorbing molecules called ...

In vitro Reconstitution of the Active T. castaneum Telomerase

In vitro Reconstitution of the Active T. castaneum Telomerase

إعادة إعماره في المختبر من أحدث T. castaneum تيلوميراز

Efforts to isolate the catalytic subunit of telomerase, TERT, in sufficient quantities for structural studies, have been met with limited success for more ...

Histochemical Staining of Arabidopsis thaliana Secondary Cell Wall Elements

Histochemical Staining of Arabidopsis thaliana Secondary Cell Wall Elements

تلطيخ النسيجية من<em&gt; نبات الأرابيدوبسيس thaliana</em&gt; الخليوي الثانوية ستريت عناصر

Arabidopsis thaliana is a model organism commonly used to understand and manipulate various cellular processes in plants, and it has been used extensively ...

Analysis of Global RNA Synthesis at the Single Cell Level following Hypoxia

تحليل الحمض النووي الريبي العالمي التجميعي على مستوى خلية واحدة نقص الأكسجة التالي

Hypoxia or lowering of the oxygen availability is involved in many physiological and pathological processes. At the molecular level, cells initiate a ...

Floral-Dip Transformation of Flax (Linum usitatissimum) to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformation of Flax Linum usitatissimum to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

الأزهار وتراجع التحول من الكتان (<em&gt; LINUM usitatissimum</em&gt;) لتوليد المعدلة وراثيا السلالات مع معدل التحويل عالية

Agrobacterium-mediated plant transformation via floral-dip is a widely used technique in the field of plant transformation and has been reported to be ...

Visualizing Stromule Frequency with Fluorescence Microscopy

تصور التردد Stromule مع مضان المجهر

Stromules, or "stroma-filled tubules", are narrow, tubular extensions from the surface of the chloroplast that are universally observed in plant cells but ...

Spatiotemporal Investigation of ERL1 Dynamics via Confocal Imaging

Image-Based Methods to Study Membrane Trafficking Events in Stomatal Lineage Cells

Image-Based Methods to Study Membrane Trafficking Events in Stomatal Lineage Cells (Video) | JoVE 

In eukaryotic cells, membrane components, including proteins and lipids, are spatiotemporally transported to their destination within the endomembrane ...