Name: floral-dip transformation of arabidopsis thaliana to examine ptso2::&beta;-glucuronidase reporter gene expression
Uploaded: 2010-06-11T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::ÃŽÂ²-glucuronidase Reporter Gene Expression at JoVE.com

אנו מודים Chunxin וואנג לבניית pTSO2: גאס עבור תמונות באיור 1, דטלף ווייגל לשיתוף פרוטוקול גאס-חסינת תקלות, פג&#39;ה Sijacic, ואת קורטני הולנדר על הערות מועילות. מחקר במעבדה של צ&#39;L נתמכת על ידי המוסד האמריקני למדע (IOB0616096 ו MCB0744752). ZL נתמך בחלקו על ידי האוניברסיטה של ​​מרילנד תחנת ניסוי חקלאי.

I. Floral-לטבול הטרנספורמציה של thaliana ארבידופסיס <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כ 1 חודש לפני השינוי, לזרוע זרעי ארבידופסיס על 4-8 סירים (5 סירים מרובע אינץ&#39;) עם כ 10-15 צמחים לכל סיר. לקבלת צמחים עם פריון תקין, 4 סירים של צמחים לכל לבנות הפלסמיד יהי?...

<ol>
	<li>Clough, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+dip:+agrobacterium-mediated+germ+line+transformation.">Floral dip: agrobacterium-mediated germ line transformation.</a> Methods Mol Biol. 286, 91-91 (2005).</li><li>Clough, S. J., Bent, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+dip:+a+simplified+method+for+Agrobacterium-mediated+transformation+of+Arabidopsis+thaliana.">Floral dip: a simplified method for Agrobacterium-mediated transformation of Arabidopsis thaliana.</a> Plant J. 16 (6), 735-735 (1998).</li><li>Wang, C., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arabidopsis+ribonucleotide+reductases+are+critical+for+cell+cycle+progression,+DNA+damage+repair,+and+plant+development.">Arabidopsis ribonucleotide reductases are critical for cell cycle progression, DNA damage repair, and plant development.</a> Plant Cell. 18 (2), 350-350 (2006).</li></ol>

היעילות של השינוי נקבע על ידי גורמים רבים ושונים, אשר נדון להלן: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בריאות הצמחים ואת גילם הם בעלי חשיבות ראשונית. בערך אחד הצמחים ישנים חודש לייצר מספר רב של בלוטות פרחים בשלה הם אידיאליים. זמירה את יורה העיקרית לעודד מ?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>6-benzyladenine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>852430</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silwet-77</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Crompton Corp.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Toxic, wear gloves</td>
</tr>
<tr>
<td>Murashige and Skoog Basal medium (MS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M5519</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gamborg's vitamin solution 1000X</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1019</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>X-Gluc (5-bromo-4-chloro-3-indolyl &beta;-D-glucuronide cyclohexamine salt</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biosynth</td>
<td>B-7300</td>
<td>Toxic, light sensitive keep in the dark</td>
</tr>
<tr>
<td>Micropore 3M Tape</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>19027761</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

floral-dip transformation of arabidopsis thaliana to examine ptso2::&beta;-glucuronidase reporter gene expression

היכולת להכניס גנים זרים לתוך אורגניזם היא הבסיס הביולוגיה והביוטכנולוגיה המודרנית. בשנת הצמח פורח מודל<em&gt; ארבידופסיס thaliana</em&gt;, פרחים, לטבול שיטת הטרנספורמציה<sup&gt; 1-2</sup&gt; החליף את כל השיטות הקודמות בגלל הפשטות שלה, יעילות, ועלות נמוכה. באופן ספציפי, יורה פריחה צעיר<em&gt; ארבידופסיס</emצמחים&gt; הם טבול בתמיסה של<em&gt; Agrobacterium tumefaciens</em&gt; נושא בונה פלסמיד מסוים. לאחר טבילה, הצמחים הם חזרו לצמיחה נורמלית זרעים תשואה, אחוז קטן מהם הופכים עם גן זר יכול להיבחר על מדיום המכיל אנטיביוטיקה. שיטה זו פרחוני לטבול הקלו באופן משמעותי<em&gt; ארבידופסיס</em&gt; מחקר תרמו רבות להבנת תפקוד הגן צמח. במחקר זה, אנו משתמשים פרחים לטבול שיטה להפוך את גן הכתב,<em&gt; Β-glucuronidase (גאס)</em&gt;, תחת שליטתו של<em&gt; TSO2</em&gt; האמרגן.<em&gt; TSO2</em&gt;, קידוד עבור reductase ribonucleotide (RNR) למקטע קטן<sup&gt; 3</sup&gt;, הוא מחזור התא גן מוסדר חיוני ביוסינתזה dNDP בשלב-S של מחזור התא. בחינת<em&gt; גאס</em&gt; ביטוי מהונדס<em&gt; ארבידופסיס</em&gt; שתילים מראה כי<em&gt; TSO2</em&gt; בא לידי ביטוי באופן פעיל בחלוקת הרקמות. שיטה ניסיונית דיווח וחומרים ניתן להתאים בקלות בתיכון רמות המכללה לא רק למחקר אלא גם עבור החינוך.

Watch this Scientific Journal Video about Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::ÃŽÂ²-glucuronidase Reporter Gene Expression at JoVE.com

Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::ÃƒÅ½Ã‚Â²-glucuronidase Reporter Gene Expression

מאמר זה ממחיש את הפרחים, טובלים שיטת<em&gt; Agrobacterium tumefaciens</em&gt; בתיווך הטרנספורמציה של<em&gt; ארבידופסיס thaliana</em&gt;. על ידי החדרת תא מחזור מוסדר האמרגן, כתב,<em&gt; PTSO2: β-glucuronidase (גאס)</em&gt; אל<em&gt; ארבידופסיס</em&gt; אנו מדגים כיצד מזהה ביטוי גאס הכתב שתילים מהונדס.

Floral-לטבול טרנספורמציה של ארבידופסיס thaliana לבדיקת PTSO2: β-glucuronidase Gene Expression Reporter

The ability to introduce foreign genes into an organism is the foundation for modern biology and biotechnology. In the model flowering plant Arabidopsis ...

Research

JoVE Journal

Biology

Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::&beta;-glucuronidase Reporter Gene Expression

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

הכנת ראשי בתרביות תאים hematopoietic ממח העצם Murine עבור electroporation

It is becoming increasingly apparent that electroporation is the most effective way to introduce plasmid DNA or siRNA into primary cells. The Gene Pulser ...

Using the Gene Pulser MXcell Electroporation System to Transfect Primary Cells with High Efficiency

שימוש ג&#39;ין Pulser מערכת MXcell electroporation כדי Transfect תאים ראשוניים עם יעילות גבוהה

Using an Automated Cell Counter to Simplify Gene Expression Studies: siRNA Knockdown of IL-4 Dependent Gene Expression in Namalwa Cells

שימוש מונה תא אוטומטי כדי לפשט את הביטוי מחקרים ג&#39;ין: siRNA מציאה הביטוי IL 4-Gene תלויים תאים Namalwa

The use of siRNA mediated gene knockdown is continuing to be an important tool in studies of gene expression.  siRNA studies are being conducted not only ...

Investigating Tissue- and Organ-specific Phytochrome Responses using FACS-assisted Cell-type Specific Expression Profiling in Arabidopsis thaliana

Investigating Tissue- and Organ-specific Phytochrome Responses using FACS-assisted Cell-type Specific Expression Profiling in Arabidopsis thaliana

חקירת רקמות ו איברים ספציפיים התגובות Phytochrome באמצעות FACS בסיוע נייד מסוג פרופיל ביטוי ספציפי ארבידופסיס thaliana</em

Light mediates an array of developmental and adaptive processes throughout the life cycle of a plant. Plants utilize light-absorbing molecules called ...

In vitro Reconstitution of the Active T. castaneum Telomerase

In vitro Reconstitution of the Active T. castaneum Telomerase

ב הכינון במבחנה של ט פעילים castaneum שהטלומרז

Efforts to isolate the catalytic subunit of telomerase, TERT, in sufficient quantities for structural studies, have been met with limited success for more ...

Histochemical Staining of Arabidopsis thaliana Secondary Cell Wall Elements

Histochemical Staining of Arabidopsis thaliana Secondary Cell Wall Elements

הכתמה histochemical של<em&gt; Thaliana ארבידופסיס</em&gt; תא המשני בוול אלמנטים

Arabidopsis thaliana is a model organism commonly used to understand and manipulate various cellular processes in plants, and it has been used extensively ...

Analysis of Global RNA Synthesis at the Single Cell Level following Hypoxia

ניתוח של גלובל RNA סינתזה ברמת התא בודד הבאות היפוקסיה

Hypoxia or lowering of the oxygen availability is involved in many physiological and pathological processes. At the molecular level, cells initiate a ...

Floral-Dip Transformation of Flax (Linum usitatissimum) to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformation of Flax Linum usitatissimum to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

טרנספורמציה הפרחוני-Dip של פשתן (<em&gt; Linum usitatissimum</em&gt;) כדי ליצור progenies טרנסגניים עם שיעור שינוי גבוה

Agrobacterium-mediated plant transformation via floral-dip is a widely used technique in the field of plant transformation and has been reported to be ...

Visualizing Stromule Frequency with Fluorescence Microscopy

חזותי תדר Stromule עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי

Stromules, or "stroma-filled tubules", are narrow, tubular extensions from the surface of the chloroplast that are universally observed in plant cells but ...

Spatiotemporal Investigation of ERL1 Dynamics via Confocal Imaging

Image-Based Methods to Study Membrane Trafficking Events in Stomatal Lineage Cells

Image-Based Methods to Study Membrane Trafficking Events in Stomatal Lineage Cells (Video) | JoVE 

In eukaryotic cells, membrane components, including proteins and lipids, are spatiotemporally transported to their destination within the endomembrane ...