Name: floral-dip transformation of arabidopsis thaliana to examine ptso2::&beta;-glucuronidase reporter gene expression
Uploaded: 2010-06-11T17:00:00
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도움이 의견을 거스 - 절대 안전한 프로토콜 Paja Sijacic과 코트니 Hollender를 공유하기위한 거스와 그림 1, Detlef 위겔의 사진을 : 우리는 pTSO2 구축을위한 Chunxin 왕 감사합니다. Z. L S 실험실에서 연구는 미국 국립 과학 재단 (IOB0616096 및 MCB0744752)에 의해 지원됩니다. ZL는 부분적으로 메릴랜드 농업 실험 역 대학에 의해 지원됩니다.

I. 꽃 - 물놀이 Arabidopsis thaliana의 변화 <ol><li> 이전 변환에 약 1 개월, 냄비에 약 10-15 식물 4-8 냄비 (5 인치 사각형 냄비)에 Arabidopsis 씨를 뿌리다. 정상 다산과 식물, 플라스미드 구조마다 식물의 4 냄비는 충분합니다. 하나는 감소 다산과 돌연변이 Arabidopsis를 변환하는 경우, 그에 따라 냄비의 수를 증가시킵니다. </li><li> 식물은 표준 약관 (22 16 시간 조명과 어두운 8 시간 ° C)에?...

<ol>
	<li>Clough, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+dip:+agrobacterium-mediated+germ+line+transformation.">Floral dip: agrobacterium-mediated germ line transformation.</a> Methods Mol Biol. 286, 91-91 (2005).</li><li>Clough, S. J., Bent, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+dip:+a+simplified+method+for+Agrobacterium-mediated+transformation+of+Arabidopsis+thaliana.">Floral dip: a simplified method for Agrobacterium-mediated transformation of Arabidopsis thaliana.</a> Plant J. 16 (6), 735-735 (1998).</li><li>Wang, C., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arabidopsis+ribonucleotide+reductases+are+critical+for+cell+cycle+progression,+DNA+damage+repair,+and+plant+development.">Arabidopsis ribonucleotide reductases are critical for cell cycle progression, DNA damage repair, and plant development.</a> Plant Cell. 18 (2), 350-350 (2006).</li></ol>

변환 효율은 아래 설명하는 여러 가지 요인에 의해 결정됩니다 : <ol><li> 식물의 건강과 자신의 나이가 기본 중요합니다. 다수의 미숙 꽃 봉오리를 생산 약 한 달쯤 식물 이상적입니다. 변환하기 전에 보조 촬영 형성 3-4일 권장하는 기본 골인을 트리밍하는 것은 변환 효율을 증가합니다. 이전 식물 transformants을 일으키다하지만 낮은 비율로합니다. </li><li> 식물의 불임은 중요하다. 하나는 감소 다...

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		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>6-benzyladenine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>852430</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silwet-77</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Crompton Corp.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Toxic, wear gloves</td>
</tr>
<tr>
<td>Murashige and Skoog Basal medium (MS)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>M5519</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gamborg's vitamin solution 1000X</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sigma</td>
<td>G1019</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>X-Gluc (5-bromo-4-chloro-3-indolyl &beta;-D-glucuronide cyclohexamine salt</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Biosynth</td>
<td>B-7300</td>
<td>Toxic, light sensitive keep in the dark</td>
</tr>
<tr>
<td>Micropore 3M Tape</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>19027761</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

floral-dip transformation of arabidopsis thaliana to examine ptso2::&beta;-glucuronidase reporter gene expression

유기체로 외국 유전자를 도입하는 능력은 현대 생물학과 생명 공학에 대한 기초입니다. 모델 꽃 공장에서<em&gt; Arabidopsis thaliana</em&gt; 꽃 - 딥 변환 방법<sup&gt; 1-2</sup&gt; 때문에 간단, 효율성 및 저렴한 비용의 이전의 모든 방법을 대체하고 있습니다. 젊은 꽃의 특히, 골인<em&gt; Arabidopsis</em&gt; 식물의 솔루션에 담근 아르<em&gt; Agrobacterium tumefaciens</em&gt; 구체적인 플라스미드 구조를 들고. 마른 후, 식물이 정상적인 성장과 항복 씨앗, 외국 유전자로 변환하고 항생제를 포함하는 매체에 대해 선택할 수있는 작은 비율로 반환됩니다. 크게 촉진이 꽃 - 물놀이 방법<em&gt; Arabidopsis</em&gt; 연구와 식물 유전자 기능에 대한 우리의 이해에 크게 공헌했습니다. 본 연구에서는, 우리는 기자의 유전자를 변형하는 꽃 - 수영 방법을 사용<em&gt; β - glucuronidase (거스)</em&gt;의 통제하에<em&gt; TSO2</em&gt; 발기인.<em&gt; TSO2</em&gt; Ribonucleotide 환원 효소 (RNR) 작은 subunit에 대한 코딩<sup&gt; 3</sup&gt; 세포주기의 S - 단계에서 dNDP 생합성에 필수적인 세포주기 규제 유전자입니다. 심사<em&gt; 거스</em유전자 변형&gt;의 표현<em&gt; Arabidopsis</em&gt; 모종가를 보여줍니다<em&gt; TSO2</em&gt;를 적극적으로 조직을 나누어 표현입니다. 보고된 실험 방법 및 자료를 쉽게 고등학교 및 대학 수준의 연구뿐만 아니라 교육뿐만 아니라 적용할 수 있습니다.

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Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::ÃƒÅ½Ã‚Â²-glucuronidase Reporter Gene Expression

이 문서의 꽃 - 수영 방법을 보여줍니다<em&gt; Agrobacterium tumefaciens</em의&gt; - 중재 변환<em&gt; Arabidopsis thaliana</em&gt;. 세포주기 조절 발기인 - 기자를 소개함으로써,<em&gt; pTSO2 : β - glucuronidase (거스)</em&gt;로<em&gt; Arabidopsis</em&gt; 우리는 하나가 유전자 변형 모종의 거스 기자 표현식을 감지하는 방법을 보여줍니다.

의 꽃 - 물놀이 변환 Arabidopsis thaliana 검사 pTSO2 : β - glucuronidase 리포터 유전자 발현

The ability to introduce foreign genes into an organism is the foundation for modern biology and biotechnology. In the model flowering plant Arabidopsis ...

Research

JoVE Journal

Biology

Floral-dip Transformation of Arabidopsis thaliana to Examine pTSO2::&beta;-glucuronidase Reporter Gene Expression

The Preparation of Primary Hematopoietic Cell Cultures From Murine Bone Marrow for Electroporation

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연구

생물학

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