Name: in situ quantification of pancreatic beta-cell mass in mice
Uploaded: 2010-06-07T17:00:00
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연구는에서 지원하는 미국 보건 서비스 그랜트 DK - 081527, DK - 072473 시카고 당뇨병 연구 및 교육 센터 (동물 모델 코어) 대학 및 Kovler 가족 재단에서 선물 DK - 20595.

1 부 : 표본의 준비 <ol><li> 해부 현미경 아래에 마우스를 놓고 여전히 첨부된 십이지장과 비장과 함께 전체 췌장을 제거하고 미리 무게 유리 슬라이드에 장기 장소. 그것은 췌장에 바인딩된 어디 측면을 따라 자사의 결합 조직을 절단하여 십이지장을 제거합니다. 췌장이 완전히 슬라이드에 고립된 때까지 췌장에있는 비장과 여분의 지방을 잘라 제거합니다. (췌장 지방은 췌장 조직의 약간 어두운...

<ol>
	<li>Miller, K., Kim, A., Kilimnik, G., Moka, U., Jo, J., Periwal, V., Hara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+formation+during+the+neonatal+development+in+mice.">Islet formation during the neonatal development in mice.</a> PloS One. 4, E7739-E7739 (2009).</li><li>Kilimnik, G., Kim, A., Jo, J., Miller, K., Hara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+pancreatic+islet+distribution+in+situ+in+mice.">Quantification of pancreatic islet distribution in situ in mice.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 297, E1331-E1338 (2009).</li><li>Hara, M., Wang, X., Kawamura, T., Bindokas, V. P., Dizon, R. F., Alcoser, S. Y., Magnuson, M. A., Bell, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+with+green+fluorescent+protein-labeled+pancreatic+beta+-cells.">Transgenic mice with green fluorescent protein-labeled pancreatic beta -cells.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 284, E177-E183 (2003).</li><li>Hara, M., Dizon, R. F., Glick, B. S., Lee, C. S., Kaestner, K. H., Piston, D. W., Bindokas, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+pancreatic+beta-cells+in+the+intact+pancreas.">Imaging pancreatic beta-cells in the intact pancreas.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 290, E1041-E1047 (2006).</li></ol>

손상 췌장에서 아일 레츠와 베타 세포 클러스터의 가상 슬라이스 이미지의 분석 아일 레츠의 전체 분포의 대규모보기를 제공합니다. 개발 및 시간이 지남에 따라 전체 아일릿 분포의 변화에​​ 따라서 공부하고 비교할 수 있습니다. 이러한 예제는 췌장 아일릿 형성 (1) 우리의 분석에 증명됩니다. 여러 시간 지점 (P1 - P21)에서 신생아 쥐 pancreata의 포괄적인 분석 아일 레츠는 분열에 의해 형성되는...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Miltex</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>14001-13</td>
<td>01n2</td>
</tr>
<tr>
<td>Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>F.S.T</td>
<td>14072-10</td>
<td>02s5	</td>
</tr>
<tr>
<td>Large glass slide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>71862-01</td>
<td>75x51x1.2mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Large cover glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ted Pella, Inc</td>
<td>260462</td>
<td>50x75mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Glass Slide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>12-550-15</td>
<td>25x75x1.0mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Cover glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>12-458-5M</td>
<td>75x25mm</td>
</tr>
<tr>
<td>Cover glass</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Erie Scientific</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>25mm circle</td>
</tr>
<tr>
<td>Fluorescent microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus IX-81</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissection microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Olympus SZX12</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Investigator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>MicroBrightField</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>MIP-GFP mice</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Jackson Laboratory</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

in situ quantification of pancreatic beta-cell mass in mice

건강과 질병의 특정 세포 인구의 변화를 추적하는 것은 생명 의학 연구의 중요한 목표입니다. 모니터링 췌장 베타 세포 증식과 아일릿 성장의 과정은 특히 도전이다. 우리는 ImageJ (rsb.info.nih.gov / 엘제이 /)에 대해 작성된 매크로와 형광 - 태그 베타 세포와 유전자 변형 생쥐의 췌장 손상에서 베타 세포의 분포를 캡처하는 방법을 개발했습니다. 췌장 해부 및 조직 삭제에 따라, 전체 췌장은 어떤 후 GFP - 태그 베타 세포 검사 있으며, 가상의 슬라이스로 캡처합니다. 분석 총 베타 세포 지역 아일릿 번호 및 각 아일릿과 베타 세포의 작은 클러스터에 대한 특정 매개 변수와 위치에 대한 참조와 크기 분포의 부량을 포함합니다. 아일 레츠의 전체 분포는 3 차원에 역모를, 각 아일릿의 크기와 모양에 대한 배포의 정보를 한 눈에 전체 베타 세포 분야에서 변화의 양적 및 질적 비교를 허용하실 수 있습니다.

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In situ Quantification of Pancreatic Beta-cell Mass in Mice

다음 프로토콜은 가상 슬라이스 이미지에 대한 췌장 해부 과정을 설명하고, 전체 췌장에있는 모든 GFP - 태그 베타 세포의 후속 부량.

마우스의 췌장 베타 세포 질량의 원위치 부량에서

Tracing changes of specific cell populations in health and disease is an important goal of biomedical research. The process of monitoring pancreatic ...

Research

JoVE Journal

Biology

In situ Quantification of Pancreatic Beta-cell Mass in Mice

Transplantation of Pancreatic Islets Into the Kidney Capsule of Diabetic Mice

당뇨병 마우스의 신장 캡슐으로 췌장 아일 레츠의 이식

Our protocol was developed to cleanly and easily deliver islets or cells under the kidney capsule of diabetic or normal mice.  We found that it was easier ...

연구

생물학

Quantification of &gamma;H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

Quantification of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Response to Ionising Radiation

Ionising 방사선에 대한 응답으로 γH2AX Foci의 부량

DNA double-strand breaks (DSBs), which are induced by either endogenous metabolic processes or by exogenous sources, are one of the most critical DNA ...

Computer-assisted Large-scale Visualization and Quantification of Pancreatic Islet Mass, Size Distribution and Architecture

컴퓨터를 이용한 대규모 시각화 및 췌장 아일릿 질량, 크기 유통과 건축의 부량

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Quantification of Proteins Using Peptide Immunoaffinity Enrichment Coupled with Mass Spectrometry

펩타이드 면역 친 화성 농축을 사용하여 단백질의 양을 정함은 질량 분광법과 함께

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신근 Digitorum의 Longus 근육의 근육 기능의 평가<em&gt; 예 생체</em&gt;와 Tibialis 앞쪽에 근육<em&gt; 현장에서</em&gt; 마우스에

Body  movements are mainly provided by mechanical function of skeletal muscle. Skeletal  muscle is composed of numerous bundles of myofibers that are ...

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형광을 사용하여 mRNA의 분자의 시각화 및 분석<em&gt; 제자리에서</em에서&gt; 하이브리드<em&gt; 사카 cerevisiae의</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

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Absolute quantification of target proteins within complex biological samples is critical to a wide range of research and clinical applications. This ...

High Resolution Quantification of Crystalline Cellulose Accumulation in Arabidopsis Roots to Monitor Tissue-specific Cell Wall Modifications

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에서 결정 셀룰로오스 축적의 높은 해상도 정량<em&gt; 애기 장대</em&gt; 뿌리 조직 특이 세포 벽 수정을 모니터링하는

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관측 및 텔로미어의 정량 및 반복 시퀀스 사용하여 형광<em&gt; 현장에서</emPNA 프로브에와&gt; 하이브리드 (FISH)<em&gt; 예쁜 꼬마 선충</em

Telomere is a ribonucleoprotein structure that protects chromosomal ends from aberrant fusion and degradation. Telomere length is maintained by telomerase ...

Analysis of Beta-cell Function Using Single-cell Resolution Calcium Imaging in Zebrafish Islets

Zebrafish 독도에서 단일 셀 해상도 칼슘 이미징 사용 하 여 베타 세포 기능 분석

Pancreatic beta-cells respond to increasing blood glucose concentrations by secreting the hormone insulin. The dysfunction of beta-cells leads to ...