Name: labeling and imaging cells in the zebrafish hindbrain
Uploaded: 2010-07-25T17:00:00
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यह काम एक NIH आर Brewster (1R01GM085290 01A1) को सम्मानित किया अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.

1.Microinjection <ol><li> पतला प्लाज्मिड झिल्ली लक्षित एन्कोडिंग ग्रीन प्रतिदीप्त प्रोटीन (mGFP, रिचर्ड Harland के सौजन्य से) 40 एनजी / एमएल के एक एकाग्रता के लिए. डीएनए प्लाज्मिड (रिचर्ड Harland mGFP/PCS2 + शिष्टाचार) शुद्ध Qiagen मैक्सी तैय?...

<ol>
	<li>N&#252;sslein-Volhard, C., Dahm, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Zebrafish Practical approach series. , (2002).</li><li>Hong, E., Brewster, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-cadherin+is+required+for+the+polarized+cell+behaviors+that+drive+neurulation+in+the+zebrafish.">N-cadherin is required for the polarized cell behaviors that drive neurulation in the zebrafish.</a> Development. 133, 3895-3905 (2006).</li><li>Andersen, E., Asuri, N., Clay, M., Halloran, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Imaging+of+Cell+Motility+and+Actin+Cytoskeleton+of+Individual+Neurons+and+Neural+Crest+Cells+in+Zebrafish+Embryos.">Live Imaging of Cell Motility and Actin Cytoskeleton of Individual Neurons and Neural Crest Cells in Zebrafish Embryos.</a> J Vis Exp. , (2010).</li></ol>

अंत में, लेबलिंग तकनीक यहाँ वर्णित zebrafish भ्रूण में morphogenetic प्रक्रियाओं की एकल कोशिका विश्लेषण के लिए अनुमति देते हैं. इस प्रोटोकॉल के प्राथमिक एक सर्वव्यापी प्रमोटर के नियंत्रण के अधीन तंत्रिका mGFP का उपयो?...

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=1976">Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain</a>. There was an error in the authors affiliations. The authors have been corrected to:
Pradeepa Jayachandran1, Elim Hong2, Rachel Brewster1 1Department of Biological Sciences, University of Maryland, Baltimore County 2Center for Neuroscience, Children's National Medical Center
instead of:
Pradeepa Jayachandran1, Elim Hong2, Rachel Brewster2 1Center for Neuroscience, Children's National Medical Center 2Department of Biological Sciences, University of Maryland Baltimore County

A correction to the author affiliations has been made for the article Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain.

Erratum: Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain

समाधान <ul><li> हांक स्टॉक # 1: 8.0 g NaCl, 100 मिलीलीटर dd एच 2 हे में 0.4 छ KCl </li><li> हांक स्टॉक # 2: .358 छ ना 2 HPO 4 निर्जल, 0.60 छ के.एच. 2 100 मिलीलीटर DDH 2 हे में 4 पीओ </li><li> हांक स्टॉक # 4: 50 मिलीलीटर DDH 2 हे में 0.72 जी 2 CaCl </li><li> हांक स्टॉक # 5: 1.23 छ MgSO 4 x7H 2 50 मिलीलीटर dd एच 2 हे हे </li><li> 1 एक्स फास्फेट बफर: 0.8% NaCl, 0.02% KCl, 0.02 एम PO4, 7.3 पीएच </li><li> अवरुद्ध समाधान: 2% सामान्य बकरी सीरम, 1% गोजातीय सीरम albumin (BSA), 1% dimethysulfoxide (DMSO) </li></ul>

labeling and imaging cells in the zebrafish hindbrain

Morphogenetic प्रक्रियाओं है कि जल्दी हड्डीवाला भ्रूण के आकार को समझने के लिए कुंजी उच्च संकल्प छवि कोशिकाओं करने की क्षमता है. Zebrafish भ्रूण, मोज़ेक अभिव्यक्ति में प्लास्मिड डीएनए परिणामों के इंजेक्शन, एकल कक्षों या कक्षों के छोटे समूहों के दृश्य के लिए अनुमति<sup&gt; 1</sup&gt;. हम वर्णन कैसे एक सर्वव्यापी प्रमोटर के नियंत्रण के तहत प्लास्मिड डीएनए झिल्ली लक्षित हरी फ्लोरोसेंट प्रोटीन (mGFP) एन्कोडिंग का इंजेक्शन इमेजिंग neurulation के दौर से गुजर कोशिकाओं के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इस प्रोटोकॉल के लिए केन्द्रीय वर्गों में भी और वास्तविक समय में उच्च संकल्प इमेजिंग लेबल कोशिकाओं के लिए पद्धति है. इस प्रोटोकॉल युवा zebrafish भ्रूण में mGFP डीएनए के इंजेक्शन की जरूरत पर जोर देता है. भ्रूण तो vibratome सेक्शनिंग, एंटीबॉडी लेबलिंग और एक confocal खुर्दबीन के साथ इमेजिंग के लिए संसाधित कर रहे हैं. वैकल्पिक रूप से, जीना mGFP व्यक्त भ्रूण समय चूक confocal माइक्रोस्कोपी का उपयोग imaged किया जा सकता है. हम पहले इस सरल दृष्टिकोण का इस्तेमाल किया है करने के लिए सेलुलर व्यवहार है कि zebrafish भ्रूण के hindbrain क्षेत्र में न्यूरल ट्यूब गठन ड्राइव का विश्लेषण<sup2&gt;</sup&gt;. तय तैयारी सेल आकार और न्यूरल ट्यूब में संगठन की अभूतपूर्व दृश्य के लिए अनुमति दी है जबकि रहते इमेजिंग इस दृष्टिकोण सेलुलर गतिशीलता है कि neurulation के दौरान जगह लेने के एक बेहतर समझ को सक्षम करने पूरित.

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Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain

Morphogenetic प्रक्रियाओं है कि जल्दी भ्रूण आकार को समझने के लिए कुंजी उच्च संकल्प छवि कोशिकाओं करने की क्षमता है. हम यहाँ पूरे zebrafish भ्रूण में झिल्ली लक्षित हरी फ्लोरोसेंट प्रोटीन के साथ एकल कक्षों या कक्षों छोटे समूहों लेबलिंग के लिए एक तकनीक का वर्णन.

और Zebrafish Hindbrain में लेबल इमेजिंग कक्ष

Key to understanding the morphogenetic processes that shape the early vertebrate embryo is the ability to image cells at high resolution. In zebrafish ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

समय चूक विकास Zebrafish अग्रमस्तिष्क में Clonally संबंधित तंत्रिका पूर्वपुस्र्ष कोशिकाओं की लाइव इमेजिंग

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

संवेदी अंग अग्रदूत साबित कोशिकाओं के बरकरार में लाइव सेल इमेजिंग ड्रोसोफिला Pupae

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Electroporation of the Hindbrain to Trace Axonal Trajectories and Synaptic Targets in the Chick Embryo

चिकी भ्रूण में axonal trajectories और Synaptic के लक्ष्य का पता लगाने के लिए hindbrain के electroporation

Electroporation of  the chick embryonic neural tube has many advantages such as being quick and efficient  for the expression of foreign genes into ...

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

केन्द्रीय तंत्रिका तंत्र में एकल कक्षों के लेबल<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

In this  article we describe how to individually label neurons in the embryonic CNS of Drosophila melanogaster by juxtacellular injection of the ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

फ्लोरोसेंट रंगों के साथ वयस्क zebrafish में रेटिनल नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं के प्रतिगामी लेबलिंग

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

The Mouse Hindbrain As a Model for Studying Embryonic Neurogenesis

भ्रूण Neurogenesis के अध्ययन के लिए एक मॉडल के रूप में माउस Hindbrain

The mouse embryo forebrain is the most commonly employed system for studying mammalian neurogenesis during development. However, the highly folded ...

Ablation of a Neuronal Population Using a Two-photon Laser and Its Assessment Using Calcium Imaging and Behavioral Recording in Zebrafish Larvae

Zebrafish लार्वा में कैल्शियम इमेजिंग और व्यवहार रिकॉर्डिंग का उपयोग करके एक दो-फोटॉन लेज़र और उसके मूल्यांकन का उपयोग करके एक न्यूरॉन जनसंख्या का पृथक

To identify the role of a subpopulation of neurons in behavior, it is essential to test the consequences of blocking its activity in living animals. Laser ...

In Vivo Calcium Imaging of Lateral-line Hair Cells in Larval Zebrafish

Vivo में लार्वा Zebrafish में पार्श्व लाइन बाल कोशिकाओं के कैल्शियम इमेजिंग

Sensory hair cells are mechanoreceptors found in the inner ear that are required for hearing and balance. Hair cells are activated in response to sensory ...

Labeling and Imaging of Amyloid Plaques in Brain Tissue Using the Natural Polyphenol Curcumin

मस्तिष्क ऊतक में एमिलॉयड प्लेक की लेबलिंग और इमेजिंग प्राकृतिक पॉलीफेनोल करक्यूमिन का उपयोग करते हुए

Deposition of amyloid beta protein (A&#946;) in extra- and intracellular spaces is one of the hallmark pathologies of Alzheimer&#39;s disease (AD). ...

In vivo Imaging of Fully Active Brain Tissue in Awake Zebrafish Larvae and Juveniles by Skull and Skin Removal

जाग ज़ेब्राफिश लार्वा और खोपड़ी और त्वचा हटाने द्वारा किशोरों में पूरी तरह से सक्रिय मस्तिष्क ऊतक के वीवो इमेजिंग में

Understanding the ephemeral changes that occur during brain development and maturation requires detailed high-resolution imaging in space and time at ...