Name: labeling and imaging cells in the zebrafish hindbrain
Uploaded: 2010-07-25T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain at JoVE.com

Bu çalışma, R. Brewster (1R01GM085290-01A1) verilen bir NIH hibe ile desteklendi.

1.Microinjection <ol><li> Sulandırınız plazmid kodlama membran hedefli Yeşil Floresan Protein (mGFP Richard Harland nezaket) 40 ng / ml &#39;lik bir konsantrasyon. DNA Qiagen Maxi Hazırlık Seti kullanarak saflaştırılmış plazmid (Richard Harland mGFP/PCS2 +, nezaket) doğrusallaştırma tarafından hazırlanmıştır. Çözümü için fenol kırmızısı (1 / 10 toplam hacmi seyreltilmiş) eklenmesi çözüm görselleştirmek için tercih edilir. Buz üzerinde DNA çözüm tutun. </li><li> Kademeli bir slayt...

<ol>
	<li>N&#252;sslein-Volhard, C., Dahm, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Zebrafish Practical approach series. , (2002).</li><li>Hong, E., Brewster, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-cadherin+is+required+for+the+polarized+cell+behaviors+that+drive+neurulation+in+the+zebrafish.">N-cadherin is required for the polarized cell behaviors that drive neurulation in the zebrafish.</a> Development. 133, 3895-3905 (2006).</li><li>Andersen, E., Asuri, N., Clay, M., Halloran, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Imaging+of+Cell+Motility+and+Actin+Cytoskeleton+of+Individual+Neurons+and+Neural+Crest+Cells+in+Zebrafish+Embryos.">Live Imaging of Cell Motility and Actin Cytoskeleton of Individual Neurons and Neural Crest Cells in Zebrafish Embryos.</a> J Vis Exp. , (2010).</li></ol>

Sonuç olarak, etiketleme teknikleri zebrafish embriyo morfogenetik süreçleri tek bir hücre analizi için izin olarak tanımlanmıştır. Bu protokolün temel vurgu nöral tüp kontrolü altındaki her yerde bir organizatörü mGFP kullanarak görüntüleme etiketli hücreleri için yöntemler. Andersen ve arkadaşları tarafından yeni bir kağıt bu geçici ifade test okuyucuların ek uygulamalar için başvurmalıdır. 3.

A correction was made to <a href="http://www.jove.com/index/Details.stp?ID=1976">Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain</a>. There was an error in the authors affiliations. The authors have been corrected to:
Pradeepa Jayachandran1, Elim Hong2, Rachel Brewster1 1Department of Biological Sciences, University of Maryland, Baltimore County 2Center for Neuroscience, Children's National Medical Center
instead of:
Pradeepa Jayachandran1, Elim Hong2, Rachel Brewster2 1Center for Neuroscience, Children's National Medical Center 2Department of Biological Sciences, University of Maryland Baltimore County

A correction to the author affiliations has been made for the article Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain.

Erratum: Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain

Çözümler <ul><li> Hank Stock # 1: 8.0 g NaCl, 0,4 g KCl 100 ml dd H 2 O </li><li> Hank Stock # 2: 0,358 g Na 2 HPO 4 Susuz, 100 ml GKD 2 O 0.60 g KH 2 PO 4 </li><li> Hank Stock # 4: 50 ml GKD 2 O 0.72 g CaCl 2 </li><li> Hank Stock # 5: 50 ml dd H 2 O 1.23 g MgSO 4 x7H 2 O </li><li> 1 X Fosfat Tamponu:% 0.8 NaCl,% 0,02 KCl 0,02 M PO4, pH 7,3 </li><li> Engelleme Çözüm:% 2 normal keçi serumu,% 1 sığır serum albumini (BSA),% 1 dimethysulfoxide (DMSO) </li></ul>

labeling and imaging cells in the zebrafish hindbrain

Anahtar erken omurgalı embriyo şekli morfogenetik süreçleri anlamak için yüksek çözünürlükte görüntü hücrelerinin yeteneği. Zebra balığı embriyosu, enjeksiyon, mozaik ifade plazmid DNA sonuçlarının tek hücreler veya küçük hücre kümeleri görünüm için izin<sup&gt; 1</sup&gt;. Biz her yerde bir organizatörü kontrol altında plazmid DNA kodlaması membran hedefli Yeşil Floresan Protein (mGFP) enjeksiyon, neurulation geçiren görüntüleme hücreleri için nasıl kullanılabileceğini açıklar. Bu protokol Orta bölümleri ve aynı zamanda gerçek zamanlı olarak yüksek çözünürlükte görüntüleme etiketli hücreleri için metodoloji. Bu protokol, genç zebrafish embriyolara mGFP DNA enjeksiyon gerektirir. Embriyolar sonra vibratome kesit, antikor konfokal mikroskop ile etiketleme ve görüntüleme için işlenir. Alternatif olarak, mGFP ifade canlı embriyolarının zaman atlamalı konfokal mikroskopi kullanılarak görüntülenebilir. Biz daha önce nöral tüp oluşumu zebrafish embriyoların Beyin bölgedeki hücresel sürücü davranışlarını analiz etmek için bu basit yaklaşım kullanıldı.<sup&gt; 2</sup&gt;. Canlı görüntüleme neurulation sırasında yer alan hücresel dinamiklerinin daha iyi anlaşılmasını sağlayan bu yaklaşım ise sabit hazırlıklar tamamlanır hücre şekil ve nöral tüp organizasyon daha önce benzeri görülmemiş bir görünüm için izin verdi.

Watch this Scientific Journal Video about Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain at JoVE.com

Labeling and Imaging Cells in the Zebrafish Hindbrain

Erken embriyo şekli morfogenetik süreçleri anlamanın anahtarı, yüksek çözünürlükte görüntü hücrelerinin yeteneği. Biz burada tüm zebrafish embriyolar membran hedefli Yeşil Floresan Protein hücrelerin tek hücreler veya küçük kümeler etiketleme için kullanılan bir tekniktir açıklar.

Zebra balığı Beyin Etiketleme ve Görüntüleme Hücreleri

Key to understanding the morphogenetic processes that shape the early vertebrate embryo is the ability to image cells at high resolution. In zebrafish ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Gelişmekte olan Zebra balığı önbeyin klonal olarak ilişkilidir Sinir Progenitör Hücreler Zaman atlamalı Canlı Görüntüleme

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Bozulmamış Duyu Organ Öncü Hücreler Canlı hücre Görüntüleme Drosophila Pupa

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Electroporation of the Hindbrain to Trace Axonal Trajectories and Synaptic Targets in the Chick Embryo

Civciv Embriyo aksonal Yörüngeler ve Synaptic Hedefler Trace için Beyin elektroporasyon

Electroporation of  the chick embryonic neural tube has many advantages such as being quick and efficient  for the expression of foreign genes into ...

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Merkez Sinir Sistemi Tek Hücreler Etiketleme<em&gt; Drosophila melanogaster</em

In this  article we describe how to individually label neurons in the embryonic CNS of Drosophila melanogaster by juxtacellular injection of the ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

Floresan Boyalar Yetişkin Zebra balığı Retina Ganglion Hücreleri retrograd Etiketleme

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

The Mouse Hindbrain As a Model for Studying Embryonic Neurogenesis

Embriyonik Neurogenesis çalışmak için bir Model olarak fare arka beyin

The mouse embryo forebrain is the most commonly employed system for studying mammalian neurogenesis during development. However, the highly folded ...

Ablation of a Neuronal Population Using a Two-photon Laser and Its Assessment Using Calcium Imaging and Behavioral Recording in Zebrafish Larvae

Ablasyon nöronal nüfusunun iki fotonlu lazer ve kalsiyum görüntüleme ve davranış kayıt zebra balığı larva kullanarak kendi değerlendirme kullanma

To identify the role of a subpopulation of neurons in behavior, it is essential to test the consequences of blocking its activity in living animals. Laser ...

In Vivo Calcium Imaging of Lateral-line Hair Cells in Larval Zebrafish

Larva zebra balığı sonradan içini kaplamak saç hücrelerinin vivo kalsiyum görüntüleme

Sensory hair cells are mechanoreceptors found in the inner ear that are required for hearing and balance. Hair cells are activated in response to sensory ...

Labeling and Imaging of Amyloid Plaques in Brain Tissue Using the Natural Polyphenol Curcumin

Doğal Polifenol Curcumin Kullanarak Beyin Dokusunda Amiloid Plakların Etiketlenmesi ve Görüntülenmesi

Deposition of amyloid beta protein (A&#946;) in extra- and intracellular spaces is one of the hallmark pathologies of Alzheimer&#39;s disease (AD). ...

In vivo Imaging of Fully Active Brain Tissue in Awake Zebrafish Larvae and Juveniles by Skull and Skin Removal

Kafatası ve Deri Temizleme ile Uyanık Zebra Balığı Larvaları ve Yavrularında Tam Aktif Beyin Dokusunun In vivo Görüntülemesi

Understanding the ephemeral changes that occur during brain development and maturation requires detailed high-resolution imaging in space and time at ...