Name: in vivo imaging of transgenic leishmania parasites in a live host
Uploaded: 2010-07-27T17:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host at JoVE.com

وقد تم تمويل هذا العمل في جزء من المنحة مراجعة الاستحقاق من وزارة شؤون المحاربين القدامى ، من خلال منح المعاهد الوطنية للصحة AI045540 ، AI067874 ، AI076233 - 01 وAI080801 (الوزارة) ، وAI29646 (SMB). تم تنفيذ العمل في جزء من التمويل خلال التصوير المقطعي وJG بواسطة T32 NIH AI07511.

1. العدوى من الحيوانات الصغيرة مع الليشمانية المعدلة وراثيا 1. خطوط الطفيلي الليشمانية المعدلة وراثيا النيابة. ويفضل التعبير عن الطفيليات يتم إنشاؤها باستخدام luciferase episomal أو ناقلات دمج...

<ol>
	<li>Capul, A. A., Barron, T., Dobson, D. E., Turco, S. J., Beverley, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+functionally+divergent+UDP-Gal+nucleotide+sugar+transporters+participate+in+phosphoglycan+synthesis+in+Leishmania+major.">Two functionally divergent UDP-Gal nucleotide sugar transporters participate in phosphoglycan synthesis in Leishmania major.</a> J Biol Chem. 282, 14006-14017 (2007).</li><li>LeBowitz, J. H., Coburn, C. M., McMahon-Pratt, D., Beverley, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+stable+Leishmania+expression+vector+and+application+to+the+study+of+parasite+surface+antigen+genes.">Development of a stable Leishmania expression vector and application to the study of parasite surface antigen genes.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 87, 9736-9740 (1990).</li><li>Mureev, S., Kushnir, S., Kolesnikov, A. A., Breitling, R., Alexandrov, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Construction+and+analysis+of+Leishmania+tarentolae+transgenic+strains+free+of+selection+markers.">Construction and analysis of Leishmania tarentolae transgenic strains free of selection markers.</a> Mol Biochem Parasitol. 155, 71-83 (2007).</li><li>Chakkalath, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Priming+of+a+beta-galactosidase+(beta-GAL)-specific+type+1+response+in+BALB/c+mice+infected+with+beta-GAL-transfected+Leishmania+major.">Priming of a beta-galactosidase (beta-GAL)-specific type 1 response in BALB/c mice infected with beta-GAL-transfected Leishmania major.</a> Infect Immun. 68, 809-814 (2000).</li><li>Sacks, D. L., Perkins, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+an+infective+stage+of+Leishmania+promastigotes.">Identification of an infective stage of Leishmania promastigotes.</a> Science. 223, 1417-1419 (1984).</li><li>da Silva, R., Sacks, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metacyclogenesis+is+a+major+determinant+of+Leishmania+promastigote+virulence+and+attenuation.">Metacyclogenesis is a major determinant of Leishmania promastigote virulence and attenuation.</a> Infect Immun. 55, 2802-2806 (1987).</li><li>Spath, G. F., Beverley, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lipophosphoglycan-independent+method+for+isolation+of+infective+Leishmania+metacyclic+promastigotes+by+density+gradient+centrifugation.">A lipophosphoglycan-independent method for isolation of infective Leishmania metacyclic promastigotes by density gradient centrifugation.</a> Exp Parasitol. 99, 97-103 (2001).</li><li>Scott, P., Caspar, P., Sher, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+against+Leishmania+major+in+BALB/c+mice+by+adoptive+transfer+of+a+T+cell+clone+recognizing+a+low+molecular+weight+antigen+released+by+promastigotes.">Protection against Leishmania major in BALB/c mice by adoptive transfer of a T cell clone recognizing a low molecular weight antigen released by promastigotes.</a> J Immunol. 144, 1075-1079 (1990).</li><li>Belkaid, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+interleukin+(IL)-10+in+the+persistence+of+Leishmania+major+in+the+skin+after+healing+and+the+therapeutic+potential+of+anti-IL-10+receptor+antibody+for+sterile+cure.">The role of interleukin (IL)-10 in the persistence of Leishmania major in the skin after healing and the therapeutic potential of anti-IL-10 receptor antibody for sterile cure.</a> J Exp Med. 194, 1497-1506 (2001).</li><li>Wilson, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+suppression+of+IFN-gamma+in+hepatic+granulomas+correlates+with+tissue-specific+replication+of+Leishmania+chagasi.">Local suppression of IFN-gamma in hepatic granulomas correlates with tissue-specific replication of Leishmania chagasi.</a> J Immunol. 156, 2231-2239 (1996).</li><li>McElrath, M. J., Murray, H. W., Cohn, Z. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dynamics+of+granuloma+formation+in+experimental+visceral+leishmaniasis.">The dynamics of granuloma formation in experimental visceral leishmaniasis.</a> J Exp Med. 167, 1927-1937 (1988).</li><li>Ato, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+dendritic+cell+migration+and+impaired+resistance+to+Leishmania+donovani+infection+in+mice+deficient+in+CCL19+and+CCL21.">Loss of dendritic cell migration and impaired resistance to Leishmania donovani infection in mice deficient in CCL19 and CCL21.</a> J Immunol. 176, 5486-5493 (2006).</li><li>Ahmed, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intradermal+infection+model+for+pathogenesis+and+vaccine+studies+of+murine+visceral+leishmaniasis.">Intradermal infection model for pathogenesis and vaccine studies of murine visceral leishmaniasis.</a> Infect Immun. 71, 401-410 (2003).</li><li>Kamala, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hock+immunization:+a+humane+alternative+to+mouse+footpad+injections.">Hock immunization: a humane alternative to mouse footpad injections.</a> J Immunol Methods. 328, 204-214 (2007).</li><li>Lang, T., Goyard, S., Lebastard, M., Milon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescent+Leishmania+expressing+luciferase+for+rapid+and+high+throughput+screening+of+drugs+acting+on+amastigote-harbouring+macrophages+and+for+quantitative+real-time+monitoring+of+parasitism+features+in+living+mice.">Bioluminescent Leishmania expressing luciferase for rapid and high throughput screening of drugs acting on amastigote-harbouring macrophages and for quantitative real-time monitoring of parasitism features in living mice.</a> Cell Microbiol. 7, 383-392 (2005).</li><li>Brittingham, A., Miller, M. A., Donelson, J. E., Wilson, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+GP63+mRNA+stability+in+promastigotes+of+virulent+and+attenuated+Leishmania+chagasi.">Regulation of GP63 mRNA stability in promastigotes of virulent and attenuated Leishmania chagasi.</a> Mol Biochem Parasitol. 112, 51-59 (2001).</li><li>Roy, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Episomal+and+stable+expression+of+the+luciferase+reporter+gene+for+quantifying+Leishmania+spp.+infections+in+macrophages+and+in+animal+models.">Episomal and stable expression of the luciferase reporter gene for quantifying Leishmania spp. infections in macrophages and in animal models.</a> Mol Biochem Parasitol. 110, 195-206 (2000).</li><li>Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photonic+detection+of+bacterial+pathogens+in+living+hosts.">Photonic detection of bacterial pathogens in living hosts.</a> Mol Microbiol. 18, 593-603 (1995).</li><li>Hardy, J., Margolis, J. J., Contag, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+Biliary+Excretion+of+Listeria+monocytogenes.">Induced Biliary Excretion of Listeria monocytogenes.</a> Infect. Immun. 74, 1819-1827 (2006).</li><li>Lecoeur, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+Topical+Therapy+for+Leishmania+major+Localized+Cutaneous+Leishmaniasis+Using+a+Reliable+C57BL/6+Model.">Optimization of Topical Therapy for Leishmania major Localized Cutaneous Leishmaniasis Using a Reliable C57BL/6 Model.</a> PLoS Negl Trop Dis. 1, e34-e34 (2007).</li><li>Lang, T., Lecoeur, H., Prina, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Leishmania+development+in+their+host+cells.">Imaging Leishmania development in their host cells.</a> Trends Parasitol. 25, 464-473 (2009).</li></ol>

في الجسم الحي للنظام التصوير (IVIS) يوفر طريقة لتصوير الحيوان أو في الجسم الحي كله نماذج التصوير العدوى التجريبية لأشكال مختلفة من داء الليشمانيات. 18،16 وSPP الليشمانيا. ويمكن هندستها الطفيليات للتعبير عن يراعة luciferase على المستوى الذي يتم اكتشافه ف?...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>D-Luciferin Potassium Salt </td>
<td>Reagent</td>
<td>Caliper LifeSciences (Formerly Xenogen)</td>
<td>122796</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>IVIS Imaging System 200 Series</td>
<td>Equipment</td>
<td>Caliper LifeSciences</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Other IVIS models that can be used include: Lumina II, Lumina XR, Kinetic, and Spectrum. </td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

in vivo imaging of transgenic leishmania parasites in a live host

أنواع متميزة<em&gt; الليشمانيا ،</em&gt; طفيلي الأسرة<em&gt; المثقبيات</em&gt; ، عادة ما تسبب مختلف مظاهر الأمراض التي تصيب البشر. الأشكال الأكثر شيوعا لمرض الليشمانيا الحشوية هي (VL) والليشمانيا الجلدية (CL). وتستخدم على نطاق واسع نماذج الماوس من هذا الداء ، ولكن القياس الكمي للأعباء المرض الطفيلي خلال الفئران يتطلب يتم التخلص الفئران في أوقات مختلفة بعد العدوى. ومن ثم يتم قياس الأحمال إما عن طريق الطفيلي المجهري ، مما يحد من مقايسة التخفيف ، أو التضخيم من الحمض النووي qPCR الطفيلي. و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير النظام (IVIS) يحتوي على مجموعة من البرامج المتكاملة التي تسمح للكشف عن إشارة bioluminescent المرتبطة الخلايا في الكائنات الحية. على حد سواء لتقليل استخدام الحيوان ومتابعة العدوى طوليا في الأفراد ، في النماذج الحية للتصوير<em&gt; الليشمانية</em&gt; النيابة. أنشئت VL تسبب أو CL. وكانت المهندسة للتعبير عن luciferase الطفيليات ، وعرضت هذه الفئران إما في الوريد أو intradermally. الكمية قياسات تلألؤ بيولوجي القيادة luciferase المعدلة وراثيا من<em&gt; الليشمانية</emوأدلى&gt; الطفيليات داخل الماوس باستخدام IVIS. ولا يمكن تصوير الفئران الفردية عدة مرات خلال دراسات طولية ، مما يسمح لنا لتقييم التباين بين الحيوانات في التجارب الأولية قائح الطفيلي ، وتقييم تكاثر الطفيليات في الأنسجة الماوس. تم الكشف عن الطفيليات مع حساسية عالية في مواقع الجلدي. على الرغم من أنه من المحتمل جدا أن إشارة (الفوتونات / ثانية / الطفيل) أقل في الأجهزة الحشوية أعمق من الجلد ، ولكن مقارنات كمية من الإشارات لم تكن قد فعلت في مقابل سطحية المواقع العميقة تم. فمن الممكن أن الأرقام لا يمكن الطفيلي بين المواقع الجسم يمكن مقارنته بشكل مباشر ، وإن كان يمكن مقارنة الأحمال الطفيلية في أنسجة نفسه بين الفئران. أمثلة من نوع واحد visceralizing (<em&gt; L. الطفلية الشاغاسية</em&gt;) ونوع واحد مما تسبب داء الليشمانيا الجلدي (<em&gt; L. المكسيكية</emوترد&gt;). ويمكن استخدام هذا الإجراء IVIS لرصد وتحليل نماذج حيوانية صغيرة من طائفة واسعة من<em&gt; الليشمانية</em&gt; الأنواع تسبب أشكال مختلفة من الليشمانيات الإنسان.

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host at JoVE.com

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

و<em&gt; في الجسم الحي</emيستخدم&gt; التصوير نظام لتوليد القياسات الكمية للعدوى الفئران مع الأوالي Trypanosomatid<em&gt; الليشمانية</em&gt;. هذا هو أسلوب غير الغازية وغير قاتلة للكشف عن الطفيليات معربا عن luciferase داخل أنسجة كثيرة طوال المزمنة<em&gt; الليشمانية</em&gt; النيابة. العدوى.

في الجسم الحي التصوير الطفيليات الليشمانية المعدلة وراثيا في مضيف لايف

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

Non-invasive Imaging of Leukocyte Homing and Migration in vivo

غير الغازية تصوير الزاجل كريات بيضاء والهجرة في الجسم الحي</em

Two-photon (2P) microscopy is a high resolution imaging technique that has been broadly adapted by biologists.  The value of 2P microscopy is that it ...

Use of an Optical Trap for Study of Host-Pathogen Interactions for Dynamic Live Cell Imaging

استخدام اعتراض البصرية لدراسة التفاعلات المرضي المضيف الحيوي للخلية الحية التصوير

Dynamic live cell imaging allows direct visualization of real-time interactions between cells of the immune system1, 2; however, the lack of spatial and ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

تحريض الطعم ضد المضيف المرض و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; مراقبة الخلايا T باستخدام نموذج MHC المطابقة الفئران

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

الثقافات المشيمة وساقطي الجهاز الإنسان لدراسة العدوى في واجهة الأم والجنين

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Quantification of Intracellular Growth Inside Macrophages is a Fast and Reliable Method for Assessing the Virulence of Leishmania Parasites

Quantification of Intracellular Growth Inside Macrophages is a Fast and Reliable Method for Assessing the Virulence of Leishmania Parasites

التحديد الكمي "النمو داخل الخلايا داخل الضامة" هو سريع وطريقة يمكن الاعتماد عليها لتقييم الفوعة طفيليات الليشمانيا

The lifecycle of Leishmania, the causative agent of leishmaniasis, alternates between promastigote and amastigote stages inside the insect and vertebrate ...

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

في فيفو تصوير للأنواع الأكسجين التفاعلية في الفاري الجرح النموذجي

The generation of reactive oxygen species (ROS) is a hallmark of inflammatory processes, but in excess, oxidative stress is widely implicated in various ...

Human Colonoid Monolayers to Study Interactions Between Pathogens, Commensals, and Host Intestinal Epithelium

مونولاييرس كولونويد البشرية لدراسة التفاعلات بين العوامل الممرضة، كومينسالس، وظهاره الأمعاء المضيف

Human 3-dimensional (3D) enteroid or colonoid cultures derived from crypt base stem cells are currently the most advanced ex vivo model of the intestinal ...

In Vivo Infection with Leishmania amazonensis to Evaluate Parasite Virulence in Mice

In Vivo Infection with Leishmania amazonensis to Evaluate Parasite Virulence in Mice

في Vivo العدوى مع الأمازون الليشمانيا لتقييم الفش الطفيلي في الفئران

Leishmania spp. are protozoan parasites that cause leishmaniases, diseases that present a wide spectrum of clinical manifestations from cutaneous to ...

Live Imaging of Chemokine Receptors in Zebrafish Neutrophils During Wound Responses

التصوير الحي لمستقبلات الكيموكين في عدلات الزرد أثناء استجابات الجرح

Leukocyte guidance by chemical gradients is essential for immune responses. Neutrophils are the first cells to be recruited to sites of tissue damage ...

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

عدوى الإشريكية القولونية المتكررة في المسالك البولية الناجمة عن التعرض للمثانة المهبلية Gardnerella في الفئران

Recurrent urinary tract infections (rUTI) caused by uropathogenic Escherichia coli (UPEC) are common and costly. Previous articles describing models of ...