Name: systemic and local drug delivery for treating diseases of the central nervous system in rodent models
Uploaded: 2010-08-16T17:00:00
Duration: 11 min 51 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Systemic and Local Drug Delivery for Treating Diseases of the Central Nervous System in Rodent Models at JoVE.com

NS65819 (CDJ, TO), NS049720 (CDJ), CA097257 (CDJ, TO), CIRM DR1-01.426 Vi vill tacka Raquel Santos för tekniskt stöd.

1. Systemisk delivery-metoder Även systemisk leverans av läkemedel är inte den mest effektiva metoden för att uppnå höga koncentrationer i CNS, systemisk leveranser är bekväma och väl accepteras av patienterna. Här kommer vi att visa korrekta förfaranden för tre som rutinmässigt används systembehandling metoder: intravenös injektion, intraperitoneal injektion och oral sondmatning. A. intravenös injektion (svansvenen Injection) <ol><li> Innan handläggningen bör kroppsvikt varje musen registreras. Som med alla prekliniska studier, skall kroppsvikten kontrolleras regelbundet (två gånger i veckan eller mer) för att utvärdera potentiella läkemedelstoxicitet. Inte mer än 1% av musens kroppsvikt i volym ska injiceras vid ett enskilt tillfälle. Till exempel bör inte mer än 0,2 mL av vätska injiceras i en 20g mus. Alla vätskor injiceras intravenöst bör steriliseras genom en lämplig metod. </li><li> Musen ska värmas i 5-10 minuter med hjälp av antingen en värmedyna eller en värmelampa för att vidga svansvenen. Om du använder en värme lampa, övervaka musen hela tiden för att undvika hypertermi. </li><li> Musen överförs till en hållare, som håller fast musen samtidigt som tillgång till svansvenen (se video). I musen svansen finns fyra synliga fartyg: fartyg på dorsala och laterala sidor är nerver, och fartyget på den ventrala sidan är en artär. För att komma åt svansvenen är svansen på musen hålls på den mest distala punkten och roteras 90 grader så att venen är vänt uppåt. Injektionsstället rengörs med en alkoholservett och en 28g insulin spruta in, fasade sidan uppåt, i en ven (se video). Om nålen är rätt placerad i venen, bör det röra sig fritt och utan tryck. Långsamt injicerar drogen med jämnt tryck på 5-10 sekunder. Om en blåsa visas på svansen, stoppa injicerar, eftersom detta indikerar att nålen inte längre är i venen. </li><li> Efter injektion, tryck lätt på injektionsstället tills blödningen stannar. Detta tar normalt 30-60 sekunder. Övervaka musen i 5-10 minuter efter injektion för att försäkra att det inte finns någon ytterligare blödning. </li></ol> B. intraperitoneal injektion <ol><li> Innan injektionen, bör preparatet sättas in i en spruta kopplad till en 28g nål. Se till att det finns utrymme i sprutan för att dra tillbaka kolven innan injektionen (t ex om injicerar 200μL, se till att sprutan kapaciteten är 300μL eller högre). </li><li> Ta bort musen ur buren genom sin svans och placera den på en strukturerad yta, så att musen har något att greppa. En bur lock är vanligen tillräcklig. Låt musen för att sträcka ut sin kropp och sedan använda din icke-dominanta handen, ta tag i huden på baksidan av musen, var noga med att försiktigt nypa så mycket hud som möjligt mellan tummen och pek-och långfingret (se video). Vänd musen över så att buken av musen är vänt uppåt. Om musen kan röra sig fritt huvudet, släpp greppet och försök igen, för att undvika att bli biten under injektionen. </li><li> Med din dominanta hand, ta upp sprutan och för in nålen i 30 graders vinkel i den nedre vänstra kvadranten av musen (se video). Håll musen lätt inverterade hjälper att flytta organ från injektionsstället. För att säkerställa att nålen är i intraperitoneala rummet, dra tillbaka sprutkolven. Om någon vätska eller blod syns i sprutan, då nålen inte är i intraperitoneal utrymme och bör tas bort. Om ingen vätska sugs upp i sprutan, sedan injicera sprutan innehåll med ett jämnt tryck över 1-5 sekunder och släpp. </li><li> Övervaka musen i 5-10 minuter efter injektion för att säkerställa att musen återgår till normal aktivitetsnivå. </li></ol> C. oral sondmatning <ol><li> Innan injektionen, spela in vikten på musen. Den maximala volym som kan levereras via oral sondmatning är 10mL per kilo kroppsvikt. Till exempel skulle den maximala volymen för en 20 g mus vara 200μL. Försök att injicera större volymer kan resultera i reflux, vilket kommer att ge upphov till ofullständig drug delivery. Om det är nödvändigt att administrera större volymer än vad som anges ovan kan så många som tre doser ges under 24 timmar. </li><li> För att undvika att punktera matstrupen är det viktigt att mäta längden på sondmatning nål för varje mus. Håll ett 18g SKARVNINGSTIPS böjda sondmatning nålen i sista revbenet av musen, och sedan markera längden på spetsen av musens huvud med en permanent spritpenna (se video). Under sondmatning, kommer detta märke vara ett stopp punkt som du sätter i nålen i munnen på musen. </li><li> Tygla musen med samma handtag som för en intraperitoneal injektion. Sätt in sondmatning nål i munnen, under tungan, och AdvaNCE nålen genom svalget. Stick inte in nålen förbi stannar märket. Nålen ska gå smidigt utan några påtryckningar (se video). Om du stöter på trycket, stoppa och dra tillbaka nålen för att undvika att injicera vätska i lungorna. </li><li> Med nålen på plats, tryck in kolven under 1-5 sekunder och ta sedan bort nålen i samma vinkel att den blev inmatad. Övervaka musen i 5-10 minuter, mycket uppmärksam på eventuella tecken på ansträngd andning vilket kan tyda på att vätska har kommit in i lungorna. </li></ol> 2. Lokal leverans Akut Konvektion-utökade A. Probe Konstruktion En reflux-resistenta CED kanyl för gnagare är ännu inte kommersiellt tillgängliga. Här kommer vi att demonstrera en metod för kanyl konstruktion som var anpassad från en metod som först beskrevs av Krauze et al (Krauze 2005). <ul><li> Kanylen har tre delar (figur 1): 100uM diameter kiseldioxid slang genom vilken infusate flöden, en styv metall nål till strukturstöd och flexibla teflon slangar för lastning av infusate. </li><li> För att få stel metall-nål, använd en öppen eld för att smälta plast på en Surflo IV kateter (24g stylet) och använder pincett bort metallen nålen. Resten av katetern kan kasseras. Skär en längd av kiseldioxid slang (OD 0.163mm), något längre än metall nålen, med en enda kant rakblad. Roll kvarts slang i en liten droppe cyanoakrylat baserade snabbverkande lim (t.ex. Krazy lim), noga med att inte få någon limma på ändarna av slangen. Sätt kvarts slangen i metallen nålen och låt torka i 5 minuter. </li><li> När torr, bör kiseldioxid slangen vara väl fäst vid nålen. Ändarna på kvarts skulle trimmas så att 2mm av sticker kiseldioxid slang från den spetsiga änden av nålen och 3 mm i sticker kiseldioxid slang från den platta änden (se video). </li><li> Skär en del av teflon slangar 20 cm i längd. Rulla metall nål i en liten droppe lim, återigen noga med att inte få lim på ändarna av kiseldioxid slang eftersom detta kommer att täppa till kanylen. Sätt in nålen i teflon slang till ett djup av 1 cm. Låt torka i 1 minut. Med hjälp av en limpistol, applicera en droppe het lim för att skarven mellan metallen nålen och Teflon slang (se video). Se till att hela det gemensamma är täckt på alla sidor och låt torka minst 1 timme. Kanyler kan göras upp till en vecka i förväg och förvaras i rumstemperatur. </li></ul> B. Infusion Förfarande <ul><li> För att förbereda den kirurgiska området, bör alla ytor skall sprutas med ett desinfektionsmedel, t.ex. en 2% klorhexidin lösning. Sterila kirurgiska handskar bör användas under förfarandet. Ytorna täcks sedan med absorberande draperier. Följande varor bör placeras i operationsområdet: <ul><li> Värmedyna för att bibehålla temperaturen mus kroppen </li><li> Två små petriskålar, en som innehåller 3% väteperoxid, och en innehållande 2% klorhexidin </li><li> Steril gasbinda och bomull kompresser </li><li> Sterila skalpeller (nummer 21) </li><li> Sterila 22g nålar </li><li> Mus stereotaxic ram </li><li> Kontrollerad hastighet sprutpump </li><li> Autoklaveras mus hud häftapparat, häftklamrar och klammerborttagare </li></ul></li><li> För att ställa upp de CED kanyl, bifoga en 1 ml spruta med Teflon slang hjälp av en uppsättning plastspruta adaptrar. Kanylen skall fästas på stereotaxic ramen så att den är vinkelrät mot den kirurgiska ytan (se video). För att desinficera kanylen, fyller 1 ml spruta med 70% etanol och tryck in kolven för att köra etanol genom kanylen. Upprepa denna process med steril koksaltlösning, och kontrollera eventuella läckage kring kanylen lederna. Att desinficera utsidan av kanylen, torka försiktigt med en 70% etanol torka. </li><li> Fyll kanylen med steril koksaltlösning och sedan dra tillbaka sprutan så att en liten luftbubbla dras in i kanylen. Denna luftbubbla kommer att skilja infusate från koksaltlösning i kanylen. Sedan skjuta upp din infusate (se video). Anslut sprutan till sprutpumpen och fylla pumpen genom att kort kör kanylen. </li><li> Stillsam musen med hjälp av en injiceras bedövningsmedel och förbereda huden genom att badda flera gånger (5-10 sekunder) med en bit steril gasbinda doppas i 2% klorhexidin lösning. Oftalmologiska salva ska appliceras på musen för att upprätthålla tillräcklig fuktighet under förfarandet. Med en steril skalpell, skapa en sagittal snitt längs mitten av skallen, ungefär 1,5 cm lång (se video). Skallen Ytan är då rengöras med en bomullspinne indränkt i en 3% väteperoxid lösning. Var noga med att undvika att bli väteperoxid i ögonen på musen. Den sutur linjer av skallen bör vara uppenbart vid det här laget: om de inte syns, torka försiktigt rent skallen med en frESH bomullsduk dränkt i 3% väteperoxid lösning. </li><li> Identifiera bregma (figur 2) och sedan mäta 2mm till höger och 1 mm bakre delen av denna struktur för att lokalisera infusionsstället. Använda sterila 22g nål försiktigt skapa ett hål i skallen på denna punkt genom att vrida nålen mot skallen (se video). Undvik att tvinga nålen nedåt mot skallen. </li><li> Vid det här laget bör musen placeras i stereotaxic ramen och börja få inandas anestesi (se video). Administrera narkos på en låg nivå (1%), och noggrant övervaka musen för förändringar i andningsfrekvens, justera narkos därefter. </li><li> Placera kanylen över skallen hålet och sedan sänka 3mm under skallen ytan. Börja infusionen, med följande priser och löptider: <table border="0"><tbody><tr><td> 0,1 mikroliter / min i 5 minuter </td><td rowspan="5"><img src="/files/ftp_upload/1992/1992tablefigure.png" alt="Totalt Volym 10 ul" /></td></tr><tr><td> 0,2 mikroliter / min i 5 minuter </td></tr><tr><td> 0,5 mikroliter / min i 5 minuter </td></tr><tr><td> 0,8 ml / min för 7,5 minuter </td></tr><tr><td> OFF under 1 minut </td></tr></tbody></table></li><li> I slutet av infusionen, sakta ut kanylen och torka av skallen med 3% väteperoxid. Applicera sterilt ben vax för att hålet (se video). Använd pincett, dra ihop huden över skallen och krampa att stänga. Buprenorfin bör ges för postoperativ smärtlindring. </li><li> Övervaka musen postoperativt tills det återfår medvetandet och rörlighet. På grund av längden på förfarandet kan det ta upp till en timme för musen att återfå full aktivitet. Under denna tid placerar musen buren på en värmedyna för att undvika hypotermi, och inte hysa återhämtar musen med andra aktiva möss. </li><li> Hud klammer bör tas bort en vecka efter operationen. </li></ul> C. I Vivo Imaging Fluorescerande-märkta infusate kan avbildas efter CED administration och kan övervakas för ändringar i signalstyrka samt signal-plats. Oftast är det bäst att vänta 2-3 timmar efter infusionen till bilden, så att musen för att återhämta sig från infusionen. <ul><li> För anestesi under avbildning, använd en låg nivå av en inhalerad narkos. Placera musen, ryggsidan upp, i en avbildning station (t.ex. IVIS Lumina, klave Life Sciences, Alameda, Kalifornien). Använda ett lämpligt filter inställning för fluor som håller på att avbildas, förvärva en bild. För CED bör en framgångsrik infusion visar att de flesta av materialet i hjärnan nära infusionsstället (Figur 3). </li></ul> 3. Representativa resultat Brist på negativ reaktion på administrationen av terapi är en viktig indikator på framgångsrik injektion. Till exempel följande svansvenen injektion bör ingen förändring i utseende (t.ex. storlek, färg) av svansen. En bubbla eller blåsa efter svansvenen injektion skulle tyda subkutan snarare än intravenös, leverans av behandlingen. För intraperitoneal injektion kan en bula på huden eller missfärgning av buken visar subkutan injektion eller skador på inre strukturer. I oral sondmatning, arbetade en mus med andning eller hosta kan tyda på att vätska sprutas in i lungorna, snarare än till magsäcken. För CED är neurologiska funktion viktig för att bedöma god administration av behandlingen. En mus som uppvisar anfall eller hemipares kan ha fått en felaktig infusion. Om en fluorescerande infusate används kan in vivo imaging tillämpas för bedömning av god administration (Figur 3). Om infusate inte är lokaliserad till injektionsstället, var infusionen inte lyckat. <img src="/files/ftp_upload/1992/1992fig1.jpg" alt="Figur 1" /> Figur 1: CED kanyl och kirurgiska Set-up. De grundläggande delarna av konvektion utökad leverans kirurgiska set-up visas. En mikroinfusion pump (A) är ansluten till infusionen kanylen (B, visas förstorad på högsta). En stereotaxic ram (C) används för att placera sonden. Denna bild ingår inte värme-och bedövningsmedel utrustning används även under förfarandet. <img src="/files/ftp_upload/1992/1992fig2.jpg" alt="Figur 2" /> Figur 2: Mus Skull Suture Lines. Den CED infusionsstället (röd stjärna) kan lokaliseras genom att identifiera korsningen mellan sagittala och koronala suturer (den bregma) och sedan mäta 2mm i sidled och 1 mm bakre delen av bregma. <img src="/files/ftp_upload/1992/1992fig3.jpg" alt="Figur 3" /> Figur 3: representativa resultat från framgångsrika CED. Liposomes märkt med ett långt rött fluorescerande färg var infunderas i musen hjärnan genom CED och avbildat både in vivo och ex vivo. En framgångsrik infusion visar en fluorescerande signal lokaliserad till infusionsstället både in vivo (A) och ex vivo (B). Signalen ska vara lokaliserad till infunderas halvklotet utan läckage till kontralaterala hemisfären. <img src="/files/ftp_upload/1992/1992fig4.jpg" alt="Figur 4" /> Figur 4: representativ bild av Framgångsrik CED i Rat hjärnstammen. Fluorescerande-märkta liposomer var infunderas i råttan hjärnstammen. Hos råttor, kan så mycket som 20μL infunderas. Den ökade tjockleken på råtta skallen och djup injektion uteslutet in vivo imaging, men korrekt infusion plats kunde verifieras genom ex vivo avbildning av dissekeras hjärnan.

<ol>
	<li>Bobo, R. H., Laske, D. W., Akbasak, A., Morrison, P. F., Dedrick, R. L., Oldfield, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Convection-enhanced+delivery+of+macromolecules+in+the+brain.">Convection-enhanced delivery of macromolecules in the brain.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 91, 2076-2080 (1994).</li><li>Degen, J. W., Walbridge, S., Vortmeyer, A. O., Oldfield, E. H., Lonser, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+efficacy+of+convection-enhanced+delivery+of+gemcitabine+or+carboplatin+in+a+malignant+glioma+model+in+rats.">Safety and efficacy of convection-enhanced delivery of gemcitabine or carboplatin in a malignant glioma model in rats.</a> J Neurosurg. 99, 893-898 (2003).</li><li>Dickinson, P. J., LeCouteur, R. A., Higgins, R. J., Bringas, J. R., Roberts, B., Larson, R. F., Yamashita, Y., Krauze, M. T., Noble, C. O., Drummond, D. C., Kirpotin, D. B., Park, J. W., Berger, M. S., Bankiewicz, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Canine+model+of+convection-enhanced+delivery+of+liposomes+containing+CPT-11+monitored+with+real-time+magnentic+resonance+imaging:+laboratory+investigation.">Canine model of convection-enhanced delivery of liposomes containing CPT-11 monitored with real-time magnentic resonance imaging: laboratory investigation.</a> J Neurosurg. 108, 989-998 (2008).</li><li>Gill, S. S., Patel, N. K., Hotton, G. R., O'Sullivan, K., McCarter, R., Bunnage, M., Brooks, D. J., Svendsen, C. N., Heywood, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+brain+infusion+of+glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+in+Parkinson+disease.">Direct brain infusion of glial cell line-derived neurotrophic factor in Parkinson disease.</a> Nature Medicine. 9, 589-595 (2003).</li><li>Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivery+of+novel+therapeutic+agents+in+tumors:+physiological+barriers+and+strategies.">Delivery of novel therapeutic agents in tumors: physiological barriers and strategies.</a> J Natl Cancer Inst. 81, 570-576 (1989).</li><li>Krauze, M. T., Saito, R., Noble, C. O., Tamas, M., Bringas, J., Park, J. W., Berger, M. S., Bankiewicz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflux-free+cannula+for+convection-enhanced+high-speed+delivery+of+therapeutic+agents.">Reflux-free cannula for convection-enhanced high-speed delivery of therapeutic agents.</a> J Neurosurg. 103, 923-929 (2005).</li><li>Krauze, M. T., Vandenberg, S. R., Yamashita, Y., Saito, R., Forsayeth, J., Noble, C. O., Park, J. W., Bankiewicz, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+of+real-time+convection-enhanced+delivery+of+liposomes+to+primate+brain:+a+long-term+retrospective.">Safety of real-time convection-enhanced delivery of liposomes to primate brain: a long-term retrospective.</a> Exp Neurol. 210, 638-644 (2008).</li><li>Murad, G. J., Walbridge, S., Morrison, P. F., Garmestani, K., Degen, J. W., Brechbiel, M. W., Oldfield, E. H., Lonser, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time,+image-guided,+convection-enhanced+delivery+of+interleukin+13+bound+to+pseudomonas+exotoxin.">Real-time, image-guided, convection-enhanced delivery of interleukin 13 bound to pseudomonas exotoxin.</a> Clin Cancer Res. 12, 3145-3151 .</li><li>Ozawa, T., James, C. D., Van Meir, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Brain+Tumor+Cell+and+Tumor+Tissue+Transplantation+Models.">Human Brain Tumor Cell and Tumor Tissue Transplantation Models.</a> CNS Cancer: Models, Markers, Prognostic Factors, Targets, and Therapeutic Approaches. , 147-162 (2009).</li><li>Szerlip, N. J., Walbridge, S., Yang, L., Morrison, P. F., Degen, J. W., Jarrell, S. T., Kouri, J., Kerr, P. B., Kotin, R., Oldfield, E. H., Lonser, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+imaging+of+convection-enhanced+delivery+of+viruses+and+virus-sized+particles.">Real-time imaging of convection-enhanced delivery of viruses and virus-sized particles.</a> J Neurosurg. 107, 560-567 (2007).</li><li>Yamashita, Y., Krauze, M. T., Kawaguchi, T., Noble, C. O., Drummond, D. C., Park, J. W., Bankiewicz, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Convection-enhanced+delivery+of+a+topoisomerase+I+inhibitor+(nanoliposomal+topotecan)+and+a+topoisomerase+II+inhibitor+(pegylated+liposomal+doxorubicin)+in+intracranial+brain+tumor+xenografts.">Convection-enhanced delivery of a topoisomerase I inhibitor (nanoliposomal topotecan) and a topoisomerase II inhibitor (pegylated liposomal doxorubicin) in intracranial brain tumor xenografts.</a> Neuro Oncol. 9, 20-28 (2007).</li></ol>

Alla förfaranden visats här har godkänts av UCSF Institutional Animal Care och användning kommittén.

Prekliniska utvärderingen av effekten av terapeutiskt medel måste ta hänsyn till farmakologiska egenskaperna hos agenten och målvävnaden av intresse. Även systemisk administreringssätt i allmänhet mer lättköpt och bättre tolererade av patienter kräver selektiviteten i blod-hjärnbarriären ofta lokal leverans av terapi för behandling av CNS-sjukdomar. Här har vi visat en metod för direkt leverans till hjärnan: CED. Andra former av lokal leverans till hjärnan inkludera direkt administrering till cerebrospinalvätskan, intratumoral bolusinjektion och ventrikulär injektion. För dessa metoder är diffusibility av terapeutiska avgörande betydelse, med dålig spridning begränsar regionen täckningen till ett par millimeter från injektionsstället (Jain 1989, Bobo 1994). Däremot CED använder positivt tryck för att öka arealen läkemedelsdistribution (Bobo 1994), medan andra kan terapeutiska riktade till specifika neuroanatomiska strukturer. I vårt laboratorium har vi framgångsrikt utfört CED i hjärnstammen samt i caudatus putamen hos gnagare (Figur 4). Förmågan att leda CED i gnagarmodeller har blivit allt viktigare i samband med ökande intresse av att maximera terapeutisk effekt vid behandling av olika typer av CNS-sjukdom. CED kan användas för att leverera en mängd olika läkemedel, inklusive renade proteiner, små droger molekyl, och virus (Gill 2003, 2003 Degen, Szerlip 2007). Utbudet av sjukdomar som kan behandlas med CED inkluderar cancer i CNS (Yamashita 2007) samt neurodegenerativa sjukdomar som Parkinsons sjukdom (Gill 2003). Som CED forskningen fortsätter att expandera, behovet av in vivo-avbildning av CED administreras terapi är lika ökar. Medan fluorescerande avbildning visat här förmodligen inte skulle vara synliga genom mänsklig skalle, är andra metoder som använder samtidig infusion av MR-kontrastmedel (Dickinson 2008) locka intresse för att bedöma tillämpbarhet för övervakning infunderade lösningarna hos patienter med CNS-sjukdom.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>2% Chlorhexidine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>NC9756995</td>
<td>AKA &#x201C;Nolvasan&#x201D;</td>
</tr>
<tr>
<td>20g Needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Becton Dickinson</td>
<td>305175</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>28g Needle (with syringe)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>22-004-270</td>
<td>AKA Insulin Syringe</td>
</tr>
<tr>
<td>3% Hydrogen Peroxide</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>H312P-4</td>
<td>Store away from light</td>
</tr>
<tr>
<td>Cotton Swabs</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>23-400-100</td>
<td>Autoclave before use</td>
</tr>
<tr>
<td>Cyanoacrylate-based Adhesive</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>NC9592632</td>
<td>AKA &#x201C;Krazy Glue&#x201D;</td>
</tr>
<tr>
<td>Disposable Scalpels</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Feather</td>
<td>2975</td>
<td>No. 21</td>
</tr>
<tr>
<td>Gauze</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>22028563</td>
<td>Autoclave before use</td>
</tr>
<tr>
<td>Heating Pad</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dunlap</td>
<td>HP950</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>I.V. Catheter</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher</td>
<td>14-841-20</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Infusion Pump</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BASi</td>
<td>MD-1000, MD-1001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Living Image Software</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Caliper Life Sciences</td>
<td>Contact for Quote</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Ophthalmic Ointment</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cardinal Health</td>
<td>1272830</td>
<td>AKA &#x201C;Akwa Tears&#x201D;</td>
</tr>
<tr>
<td>Plastic Syringe Adaptors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Upchurch Scientific</td>
<td>P-604, P-200NX, P-215X, P-630</td>
<td>Fits on Luer Lock Syringes</td>
</tr>
<tr>
<td>Silica Tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Polymicro Technologies</td>
<td>2000020</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Skin Stapler, Staples, Remover</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting</td>
<td>59020</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereotaxic Frame</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Stoelting</td>
<td>51725</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Teflon Tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Upchurch Scientific</td>
<td>1520</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Xenogen Lumina</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Caliper Life Sciences</td>
<td>Contact for Quote</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

systemic and local drug delivery for treating diseases of the central nervous system in rodent models

Grundlig preklinisk testning av centrala nervsystemet (CNS) Therapeutics ingår ett övervägande av administrationssätt och agent biodistribution i bedömningen av terapeutisk effekt. Mellan de två stora klassificeringar av förvaltningen, är lokala vs systemisk, systemisk leverans metoder ofta att föredra på grund av enkel administration. Dock kan systemiska leverans resultera i suboptimalt drogkoncentrationen uppnås i CNS, och leda till felaktiga slutsatser om agenten effekt. Lokala drug delivery-metoder är mer invasiva, men kan vara nödvändiga för att uppnå terapeutisk CNS-läkemedel nivåer. Här visar vi rätt teknik för tre sträckor på systemiska drug delivery: intravenös injektion, intraperitoneal injektion och oral sondmatning. Dessutom visar vi en metod för lokal leverans till hjärnan: konvektion utökad leverans (CED). Användningen av fluorescerande-märkta föreningar ingår för in vivo imaging och verifiering av korrekt Drug Administration. De metoder som presenteras med hjälp av musmodeller, men kan lätt anpassas för användning i råttor.

Watch this Scientific Journal Video about Systemic and Local Drug Delivery for Treating Diseases of the Central Nervous System in Rodent Models at JoVE.com

Systemic and Local Drug Delivery for Treating Diseases of the Central Nervous System in Rodent Models

Grundlig preklinisk testning av läkemedel som verkar på det centrala nervsystemet handlar ofta om att bedöma och jämföra droger biodistribution i samband med specifika administreringsvägar. Här är tre vanliga metoder för systemisk leverans (intravenös, intraperitoneal, och muntliga) samt en metod för lokal leverans (konvektion utökad leverans) påvisats hos möss.

Systemisk och lokal Drug Delivery för behandling av sjukdomar i centrala nervsystemet i gnagarmodeller

Thorough preclinical testing of central nervous system (CNS) therapeutics includes a consideration of routes of administration and agent biodistribution ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Multimodal Imaging of Stem Cell Implantation in the Central Nervous System of Mice

Multimodal Imaging av stamceller implanteras i centrala nervsystemet hos möss

During the past decade, stem cell transplantation has gained increasing interest as primary or secondary therapeutic modality for a variety of diseases, ...

Production of Lentiviral Vectors for Transducing Cells from the Central Nervous System

Produktion av Lentiviral vektorer för att omvandla Celler från det centrala nervsystemet

Efficient gene delivery in the central nervous system (CNS) is important in studying gene functions, modeling neurological diseases and developing ...

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Märkning av enstaka celler i det centrala nervsystemet hos<em&gt; Drosophila melanogaster</em

In this  article we describe how to individually label neurons in the embryonic CNS of Drosophila melanogaster by juxtacellular injection of the ...

Direct Intraventricular Delivery of Drugs to the Rodent Central Nervous System

Direkt Intraventrikulär tillförsel av läkemedel till Gnagare Centrala nervsystemet

Due to an inability to cross the blood brain barrier, certain drugs need to be directly delivered into the central nervous system (CNS). Our lab focuses ...

Immunohistochemical Analysis in the Rat Central Nervous System and Peripheral Lymph Node Tissue Sections

Immunohistokemisk analys i Rat centrala nervsystemet och perifera lymfkörtelvävnadssnitt

Immunohistochemistry (IHC) provides highly specific, reliable and attractive protein visualization. Correct performance and interpretation of an IHC-based ...

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

In vivo optogenetic Stimulering av gnagare centrala nervsystemet

The ability to probe defined neural circuits in awake, freely-moving animals with cell-type specificity, spatial precision, and high temporal resolution ...

Optical Clearing of the Mouse Central Nervous System Using Passive CLARITY

Optisk Clearing av Mouse centrala nervsystemet med passiv CLARITY

Traditionally, tissue visualization has required that the tissue of interest be serially sectioned and imaged, subjecting each tissue section to unique ...

A Computerized Test Battery to Study Pharmacodynamic Effects on the Central Nervous System of Cholinergic Drugs in Early Phase Drug Development

Ett datoriserat Test batteri att studera farmakodynamiska effekter på det centrala nervsystemet av kolinerga läkemedel i tidig fas läkemedelsutveckling

Investigating potential pharmacodynamic effects in an early phase of central nervous system (CNS) drug research can provide valuable information for ...

Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ

Quantitative Cell Biology of Neurodegeneration in Drosophila Through Unbiased Analysis of Fluorescently Tagged Proteins Using ImageJ

Kvantitativa cellbiologi för Neurodegeneration i Drosophila genom förutsättningslös analys av Fluorescently märkta proteiner med hjälp av ImageJ

With the rising prevalence of neurodegenerative diseases, it is increasingly important to understand the underlying pathophysiology that leads to neuronal ...

Electrophysiological Recording of The Central Nervous System Activity of Third-Instar Drosophila Melanogaster

Electrophysiological Recording of The Central Nervous System Activity of Third-Instar  Drosophila Melanogaster

Elektrofysiologiska inspelning av den centrala nervsystem aktiviteten av tredje-Instar Drosophila Melanogaster

The majority of the currently available insecticides target the nervous system and genetic mutations of invertebrate neural proteins oftentimes yield ...