Name: techniques for imaging ca2+ signaling in human sperm
Uploaded: 2010-06-16T17:00:00
Duration: 7 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm at JoVE.com

עבודה זו ממומנת על ידי קרן Wellcome, המועצה למחקר רפואי, החברה המלכותית, בירמינגהאם סיטי המדע ואת האמון מחקר פוריות. ברצוננו להודות סיוע מומחה לחקר הגלעד בבנייה שילוב אסדות הדמיה.

זרע מהזכרים פורייה ובריאה, עם ניתוח זרע נורמלית, מוכנים בדרך כלל כדלקמן הדמיה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דגימות הזרע מאוחסנים על 37 מעלות צלזיוס במשך דקות לא יותר מאשר 30. תאים מבודדים פלזמה הזרע על ידי לשחות לתוך פתרון בתוספת מלח מאוזנת של ארל (sEBSS: mm: 1.8 CaCl 2 .2 H 2 O, 5.37 KCl, 0.81 MgSO 4 0.7 H 2 O, 26.2 NaHCO 3, 1.0 לאא 2 PO 4. 2H 2 O, 116.4 NaCl, 55.6 D-גלוקוז, 2.73 pyruvate Na, Na 41.8 לקטט) בתוספת 0.3% de-lipidated/fatty פחם חומצה חינם שבר V BSA (באיכות של BSA הוא קריטי עבור capacitation מוצלחת של הזרע). 1 מ&quot;ל של sEBBS הוא pipetted לתוך כל סדרה של צינורות 5 מ&quot;ל ו underlayered בעדינות עם 0.3 מ&quot;ל של נוזל הזרע. לאחר הדגרה במשך שעה 1 (37 ° C; 6% CO 2) מעל 0.7 מ&quot;ל מוסרת בעדינות מהצינור כל ונקווה. 10 μl של השעיה הזרע הוא מדולל עם 90 μl של 1% (v / v) פורמלין כדי לשתק את התאים, אז זרע נספרים בתא Neubauer. צפיפות התאים בתרחיף הוא מותאם אז (עם sEBSS) עד 6 מיליון תאים / מ&quot;ל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המדגם נחלק אז צינורות רופף הכתיר וטופחו (37 ° C; 6% CO 2) אל aliquots של μl 200 ב עבור 5-6 שעות כדי לאפשר capacitation. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Coverslips (22x50 מ&quot;מ) בעבר שטופלו poly-D-ליזין. 10 μl של פתרון poly-D-ליזין (10% w / v) מוחל גם מספר טיפות קטנות למרכז coverslip. Poly-D-ליזין מותר אז לייבוש באוויר. זה יכול להיות על במה מחוממת צריכה להיות יבשה לחלוטין. Coverslip מצורף עם גריז ואקום סגורה, ייעודית, perfusable, פוליקרבונט הדמיה קאמרית (מידות 35 מ&quot;מ x 20 מ&quot;מ x 5 מ&quot;מ; יכולת ≈ 180 μl). דומה לחדר וורנר פולי RC20-D-ליזין, coverslip מצופה מהווה את הבסיס של החדר כאשר תאים נתפסים על מיקרוסקופ הפוך בקוטר 12 מ&quot;מ עגול coverslip צורות פני השטח העליון של החדר, המאפשר העברת אור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אורגון גרין BAPTA1-AM (OGB) או סידן גרין 1-AM משמשים התאים תיוג. OGB מוכן ידי המסת ב DMSO. Pluronic חומצה F127 (חומר ניקוי) נכלל DMSO כדי למנוע &quot;clumping&quot; של צבע. זה יכול להיות מוכן במעבדה (100 Pluronic מ&quot;ג 0.5 מ&quot;ל DMSO), מיד לפני השימוש, או ניתן לרכוש מוכנה מראש. 20 μl מתווסף aliquot 50 מיקרוגרם של OGB (2.5 מ&quot;ג / מ&quot;ל). בקבוקון אז יכול להיות מאוחסן קפוא מופשר לשימוש מאוחר יותר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר capacitation של הזרע (5-6 שעות ב sEBBS, 37 ° C; 6% CO 2) צינור נבחרה הדמיה 1.2 μl של פתרון OGB הוא הוסיף, נותן ריכוז סופי של 10 מיקרומטר. הצינור הוא מודגרות מכן 40 דקות נוספות, לאחר ההשעיה תא מוזרק בעדינות לתוך הנמל יבוא של חדר הדמיה עם טיפ p1000 פיפטה (כחול). החדר ממוקם בצד coverslip חממה, poly-D-ליזין מצופה למטה, עבור 20 דקות. תאים נוטים לשחות לאורך פני השטח של התא ו תדבק אזור poly-D-ליזין מצופה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החדר מותקן עכשיו על המיקרוסקופ, קשור למנגנון זלוף ו perfused דקות ב כ 0.5 מ&quot;ל /. משאבת הרים הזנות מלוחים לתוך החדר ואת הצפת מנמל היציאה הוסר על ידי משאבה יניקה עם מלכודת. הכנה נשאר בחושך דקות לפחות 10 תוך התאים רופף לצבוע תאיים יוסרו על ידי טפטוף של החדר. יציבות טמפרטורה היא חשיבות מכרעת כי תנודות קטנות לא רק להשפיע על התא Ca 2 + הומאוסטזיס, אך עשוי גם להשפיע על K d של צבע. הניסויים מבוצעים בדרך כלל על 25 מעלות צלזיוס, מושגת על ידי שמירה על טמפרטורת החדר החשוך ברמה זו. מצאנו כי שמירה על טמפרטורת החדר ברמה הנדרשת מספק יציבות טמפרטורה גבוהה יותר מאשר שימוש להתמקד במה טמפרטורה מבוקרת או תנור חימום מבוקר תרמוסטטית על יבוא מלח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תאים נתפסים תחת בניגוד שלב (40X או 60x הנפט טבילה) אובייקטיבי אזור הדמיה נבחרה. החלק של האזור poly-D-ליזין מצופה כי הוא סמוך לנמל כניסת עדיפה, שם זרימת מלוחים היא למינרית ועקבית. חשוב גם להשתמש אזור שבו צפיפות התאים מתאים (צפיפות יתר משפיע על איכות ושלמות של איסוף נתונים באמצעות האות מ תאים סמוכים) והיכן תאים מחוברים כראוי, אך פעילות flagellar ניכרת. תמונה בניגוד שלב נשמר. מיקרוסקופ הוא החליף אז למצב פלואורסצנטי (עירור 480 ננומטר, 540 ננומטר פליטה) וחשיפה הזמן מצטמצם למינימום הנדרש כדי לקבל תמונה ברורה הקרינה (בדרך כלל 5-20 מילישניות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הניסוי אשר נכתבו על ידי הפעלת בזמן רכישת התמונה סדרה תוכנה (IQ). בדרך כלל תמונות נרכשים בבית הרץ 0.1 ואת התאורה מוגבל לתקופות הרכישה של התמונה רק באמצעות Softwaמחדש תריס מבוקר. הרבה יותר שיעורי רכישת תמונה ניתן להשתמש אך הקצבה חייבת להתבצע על בעיות של הלבנת דור של חפצים בשל נזק תמונה לתאים (ראה דיון). מנת המשכל (ורוב האחרים פלטפורמות תוכנה רכישת) יאפשר בזמן אמת גרפים של הקרינה במהלך הניסוי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר תקופת השליטה של מניפולציה 3-5 דקות משך מרכיבים מלוחים (כגון [Ca 2 +] o) ויישום של תרופות מושגת על ידי החלפת מלוחים בכותרת זלוף. זמן של תוספת של גירוי כל כך ציין זמן ההגעה בחדר הדמיה ניתן לחשב, מתן דיוק מספיק הערכה של התגובות איטי המתואר כאן (שנדגמו ב 0.1 הרץ). לקבלת תגובות מהירות יותר דיוק רב יותר ניתן להשיג על ידי הוספת גירויים ישירות לזרם מלוחים דרך נמל יבוא second כאמור RC20 וורנר קאמרית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמונות מנותחים מחובר באמצעות IQ. אזורי עניין (ROIs) נמשכים סביב כל תא (או חלק של התא) וגם שטח התא חינם נבחרה (עבור אוטומטית רקע חיסור על ידי התוכנה. הסדרה תמונה מסומנת ואז להסיר תאים אשר מתו או עברו התגובה acrosome ( אשר מופיע עליה גדולה המהירה הקרינה ואחריו הפסד של צבע cytoplasmic) במהלך הניסוי ואלה הראו תנועה מספיק כדי לגרום חפצים כאשר ניתחו כסדרה זמן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סדרת זמן עוצמת הקרינה מתקבל אז ההחזר על ההשקעה עבור כל הנתונים הללו מנותחים מחובר ב-Excel. בתחילה הקרינה הוא מנורמל לערך אומר שהושגו במהלך תקופת הביקורת, באמצעות המשוואה R = [(מנוחה FF) / F שאר] x 100%, כאשר R הוא שינוי% ב הקרינה לעומת התקופה שליטה, F, היא עוצמת הקרינה בזמן t זמן לנוח F הוא ממוצע של לפחות 30 קביעות של F שהושגו במהלך תקופת הביקורת. </li></ol> נציג תוצאות איור 1 מציג סדרה של תמונות מתוך ניסוי שבו תאים היו מגורה עם פרוגסטרון 3 מיקרומטר. השורה העליונה הסרט 1 להראות את התמונות הקרינה בקנה מידה אפור ואת המגים אותו מוצגים להלן (וגם בסרט 2) ב pseudocolor (בדיקת &#39;16_colors שולחן &quot;ב תמונה J), שבו&quot; מגניב &quot;הצבעים מצביעים על עוצמת פלורסנט נמוך &quot;חמים&quot; הצבעים מצביעים עוצמת הקרינה גבוהה. תאים ניתן לראות pseudocolor במהלך הניסוי, באמצעות טבלאות בדיקת רמת משכל, אלא באמצעות סולם אפור בדרך כלל יותר אינפורמטיבי להערכת. אם התאים היטב בתווית. הראשון שתי תמונות נאספו 0 s ו 100 s לאחר תחילת ההקלטה. הקרינה צריכה להיות יציבה נוטה להיות החזק ביותר באזור acrosomal הודעה והצוואר הזרע. הפרוגסטרון נכנס לחדר הדמיה בכ 175 s ו rd 3 ו -4 תמונות ה (180 וה 220 ים) מראה גידול מהיר [Ca 2 +] i (הקרינה) שמקורם ראש האחוריים ובאזור הצוואר של התא. תמונות לאחר נמצאים 290, 360, 740, 990 ו - 1440 s, מראה את הדעיכה של הראשונית [Ca 2 +] אני חולף ופיתוח של העלאת מתמשכת משני. איור 2 מראה הניתוח של גליונות אלקטרוניים, המרת ערכי הקרינה גלם ROI לכל הקרינה מנורמל (שינוי% ב הקרינה לעומת התקופה שליטה) איור 3 מראה זמן מנורמל מגרשים הקרינה במשך 3 תאים מראה &quot;טיפוסי&quot; התגובות פרוגסטרון 3 מיקרומטר. <img src="/files/ftp_upload/1996/1996fig1.jpg" alt="איור 1" /> באיור 1. נתונים דוגמה מתא מגורה עם פרוגסטרון. סדרה של תמונות הקרינה בקנה מידה אפור (בשורה העליונה) ו pseudocolor (בשורה התחתונה) מוצגים. נקודות זמן הם 0, 180, 220, 290, 360 ו 990s. 3 פרוגסטרון מיקרומטר נכנס לחדר הדמיה ב 175 s. ROIs מוצגים בלוח הראשון. <img src="/files/ftp_upload/1996/1996fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2. ניתוח נתונים יחיד פלואורסצנטי תא ב-Excel. דמויות בשחור הם סדרה של נתונים בזמן הקרינה, מסודרים אנכית. דמויות אדום (להלן) הם נתונים מנורמל שהושגו באמצעות המשוואה נתון בטקסט. גרף מציג עלילה מנורמל הקרינה בזמן עבור 64 תא בניסוי הזה, אשר על גירוי, מראה עלייה של חולפות הקרינה ולאחריה עלייה סדרה איטית של תנודות קטנות. <img src="/files/ftp_upload/1996/1996fig3.jpg" alt="איור 3" /> איור 3. Fluorescence בזמן עקבות במשך 3 תאים בודדים, כפי שבאה לידי ביטוי השינוי% ביחס לשליטה ערך .. 3 פרוגסטרון מיקרומטר נוספה בזמן מסומן בחץ. מראה קו מקווקו אומר הקרינה שליטה.

<ol>
	<li>Haughland, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Handbook of Fluorescent Probes and Research Products. , (2002).</li><li>Nishigaki, T., Wood, C. D., Shiba, K., Baba, S. A., Darszon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroboscopic+illumination+using+light-emitting+diodes+reduces+phototoxicity+in+fluorescence+cell+imaging.">Stroboscopic illumination using light-emitting diodes reduces phototoxicity in fluorescence cell imaging.</a> Biotechniques. 41, 191-197 (2006).</li></ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

כאשר בוצעו בהצלחה, טכניקה זו מאפשרת הקלטה של ההפצה קינטיקה של ספונטניות המושרה Ca 2 + אותות זרע אנושי. תגובות ניתן לקבל מספר גדול של תאים (עד 200) וזה חשוב כי זרע האדם יכול להראות הרבה וריאציה ספונטנית מגורה Ca 2 + האותות שלהם. תיוג מוצלחת ואת ההישרדות של תאים במהלך ההקלטה הם תלויים במידה רבה על איכות המדגם. דגימות Poor לתת תיוג עניים, תגובות עניים תאים עלולים למות במהלך ההקלטה. זרע אדם רגישים מאוד נזק תמונה ולכן אנו משתמשים בתאורה מינימלית הכרחי (גם עוצמת וזמן חשיפה) על מנת למקסם את הישרדות התא ולמזער חפצים בשל מוות של תאים. מצלמה רגישות גבוהה (המתיר שימוש תאורה בעוצמה נמוכה) הוא היתרון הגדול מאז המצלמה יאסוף את הקרינה חלשה. חזור מואר, EM-CCD מצלמות במיוחד מתאים היטב, אם כי יקר מאוד. LED תאורה (במקום להשתמש קסנון או מנורת כספית עם מסנן עירור גם משפר הישרדות התא (Nishigaki et al, 2006). אנחנו לא משתמשים Fura-2, למרות היתרונות הברורים של הדמיה יחס מטרי, כי Fura מחייב עירור עם האור האולטרה סגול ובגלל זה הכרחי לקחת שתי תמונות עבור כל יחס. לקבלת נתונים המתקבלים עם אורך גל יחיד, צבעי האור הנראה, נורמליזציה של עוצמת הקרינה בעיקר מפצה על ההבדל בין טעינה לצבוע תאים, אך לא עבור הפצה לצבוע בתוך תא יחיד, ואת זה צריך לזכור. למרות צבעים אורך גל יחיד יכול, עקרונית, להיות מכויל, את הדיוק של הטכניקה היא עניים ואנחנו לא מנסים לעשות את זה. בעוד הנתונים המתקבלים עם יחס Fura-2 (או יחס פליטת לצבוע הודו), גם ללא כיול, לתת ייצוג נאמן מקובלת של שינויים יחסית [Ca 2 +] אני, את עוצמת הקרינה של צבעים אורך גל יחיד רחוק מלהיות ליניארי הקשורים [Ca 2 +] i. על החלק השימושי ביותר של עקומת הרוויה הקשר עבור צבעים אורך גל יחיד בדרך כלל קירוב ל לוגריתמי. בשלב זה אנו משתמשים אורגון גרין BAPTA-1 (איור 4) כי הוא רגיש שינויים קטנים [Ca 2 +] אני קרוב לרמה של מנוחה (5-10 ננומטר). כאשר [Ca 2 +] אני עולה מעל 1 תגובות מיקרומטר יהיו תחת ייצוג במונחים של שינוי הקרינה ואת צבע יכול להרוות. אפשרות לשיפור של הטכניקה בלי להזדקק עירור UV היא להכפיל תאים לטעון עם צבע כגון Fluo-3 ו Fura אדום. שניהם יכולים להיות נרגש ב 488 nM אבל התגובות סימולטני שלהם שונים מאוד. הקלטה של פליטה ב 540 ו 650 nM מספק יחס אשר יכול לספק שיטה טובה יותר עבור ניטור מדויק של [Ca 2 +] i (Haughland, 2002) עשויות לחול על זרע (Nisigaki et al, 2006). <img src="/files/ftp_upload/1996/1996fig4.jpg" alt="איור 4" /> איור 4. הקשר בין חינם [Ca 2 +] (ננומטר) ועל פליטת הקרינה בשיא גל (525 ננומטר כ) עבור אורגון גרין BAPTA-1 ו אורגון גרין BAPTA-2. OGB1 נותן הקרינה גבוה יותר נח [Ca 2 +] אבל מרווה ברמות נמוכות יותר, ולכן יש מגוון קטן יותר שמיש. נתונים עבור חלקות אלה נתקבלו בדיקות מולקולריות מדריך (Haughland, 2002).

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Low light level Camera</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>QImaging</td>
<td>Rolera XR</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Oregon Green BAPTA-1</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>06807</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Imaging Software</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Andor</td>
<td>IQ</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Imaging Software</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>National Institues of Health</td>
<td>Image J</td>
<td>Public domain software</td>
</tr>
<tr>
<td>LED illumination system</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cairn Research</td>
<td>Opto LED</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pluronic F-127 (20% solution in DMSO)</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>P3000MP</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

techniques for imaging ca2+ signaling in human sperm

מיקרוסקופ פלואורסצנטי של תאים עמוסה ניאון, Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; רגיש צבעים משמש למדידת היבטים במרחב ובזמן של Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; איתות בתאים חיים. כאן אנו מתארים את שיטת במעבדות שלנו לטעינת השעיות של זרע אנושי עם Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; דיווח צבעים ומדידת אותות הקרינה במהלך גירוי פיזיולוגי. ניעתי תאים מבודדים על ידי ישיר לשחות כלפי מעלה מודגרות בתנאים capacitating עבור 0-24 שעות, תלוי בניסוי. התא permeant AM (acetoxy מתיל אסתר) אסתר צורה של Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; דיווח צבע נוסף ואז aliquot תא תקופה של 1 ש &#39;מותר לטעינה של צבע לתוך הציטופלסמה. אנו משתמשים בצבעים אורך הגל הנראה כדי למזער צילום נזק לתאים, אך זה אומר כי הקלטת ratiometric אינו אפשרי. יתרונות וחסרונות של גישה זו הם דנו. במהלך תקופת העמסה תאים מוכנסים לחדר הדמיה מותר לדבוק coverslip poly-D-ליזין מצופה. בסוף לצבוע טעינת תקופה עודף תאים רופף יוסרו על ידי חיבור של החדר למנגנון זלוף. תא הוא perfused ברציפות, גירויים salines שונה מתווספים אז לכותרת זלוף. ניסויים מתועדים על ידי רכישת זמן לשגות של תמונות פלואורסצנציה לנתח מחובר פרט, על ידי ציור ידני אזורים של עניין. הנתונים מנורמל מראש רמות גירוי כזה, עבור כל תא (או חלק של תא), גרף המראה את Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; בתגובה כשינוי% ב הקרינה מתקבל.

Watch this Scientific Journal Video about Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm at JoVE.com

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Stimulus-עורר [Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt;] אני אותות של זרע אנושי הפרט מוערכים. תאים ניעתי נטענים עם Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; רגיש צבע פלואורסצנטי (AM-אסתר שיטה) ו משותקת בתא perfusable. תאים הם צילמו באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי זמן לשגות ועורר דרך המדיום המרוססת. התגובות של תאים בודדים (או אזורים) מנותחים מחובר באמצעות Excel.

טכניקות הדמיה Ca 2 + איתות זרע אנושי

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Research

JoVE Journal

Biology

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee

In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee

בשנת vivo Ca 2 + - הדמיה של נוירונים גוף אינפקטד במהלך הלמידה חוש הריח של דבורת הדבש

The in vivo and semi-in vivo preparation for Calcium imaging has been developed in our lab by Joerges, K&uuml;ttner and Galizia over ten years ago, to ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

פלואורסצנציה באתרו הכלאה (FISH) פרוטוקול של זרע אדם

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

הצמד תיקון וטכניקות זלוף עבור לימוד תעלות יונים מתבטא Xenopus ביציות

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

ויזואליזציה של כלי דם Ca 2 + איתות מופעלות על ידי ROS נגזר אוטוקריני

Oxidative stress has been implicated in a number of pathologic conditions including ischemia/reperfusion damage and sepsis. The concept of oxidative ...

A High-content Imaging Workflow to Study Grb2 Signaling Complexes by Expression Cloning

הדמית עבודה גבוהה תוכן ללמוד Grb2 מכלולי איתות על ידי שיבוט ביטוי

Signal  transduction by growth factor receptors is essential for cells to maintain  proliferation and differentiation and requires tight control. Signal  ...

Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents

Isolation of Human Atrial Myocytes for Simultaneous Measurements of Ca2+ Transients and Membrane Currents

בידוד של myocytes פרוזדורי אדם למדידות בו זמנית של Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; ארעי וזרמים הממברנה

The study of  electrophysiological properties of cardiac ion channels with the patch-clamp  technique and the exploration of cardiac cellular Ca2+ ...

Measuring Intracellular Ca2+ Changes in Human Sperm using Four Techniques: Conventional Fluorometry, Stopped Flow Fluorometry, Flow Cytometry and Single Cell Imaging

Measuring Intracellular Ca2+ Changes in Human Sperm using Four Techniques: Conventional Fluorometry, Stopped Flow Fluorometry, Flow Cytometry and Single Cell Imaging

מדידת תאיים Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; שינויים בזרע אנושי באמצעות ארבע טכניקות: fluorometry הקונבנציונלי, הפסיק fluorometry זרימה, cytometry זרימה והדמיה תא יחיד

Spermatozoa  are male reproductive cells especially designed to reach, recognize and fuse  with the egg. To perform these tasks, sperm cells must be ...

Assessing Differences in Sperm Competitive Ability in Drosophila

Assessing Differences in Sperm Competitive Ability in Drosophila

הבדלי שומה ביכולת תחרותית בזרע<em&gt; דרוזופילה</em

Competition among conspecific males for fertilizing the ova is one of the mechanisms of sexual selection, i.e. selection that operates on maximizing the ...

Imaging Local Ca2+ Signals in Cultured Mammalian Cells

Imaging Local Ca2+ Signals in Cultured Mammalian Cells

ההדמיה המקומית Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; אותות בתאי יונקים בתרבית

Cytosolic Ca2+ ions regulate numerous aspects of cellular activity in almost all cell types, controlling processes as wide-ranging as gene transcription, ...

Two-photon Imaging of Intracellular Ca2+ Handling and Nitric Oxide Production in Endothelial and Smooth Muscle Cells of an Isolated Rat Aorta

Two-photon Imaging of Intracellular Ca2+ Handling and Nitric Oxide Production in Endothelial and Smooth Muscle Cells of an Isolated Rat Aorta

הדמיה שני פוטונים של תאיים Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; תאי טיפול ותחמוצת חנקן ייצור בהאנדותל ושריר חלק של עכברוש אב העורקים מבודדים

Calcium is a very important regulator of many physiological processes in vascular tissues. Most endothelial and smooth muscle functions highly depend on ...