Name: Protein Sample Setup and Crystallization (Video) | JoVE
Uploaded: 2023-03-10T13:45:00
Duration: 1 min 42 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protein Sample Setup and Crystallization at JoVE.com

protein sample setup and crystallization

High-Throughput Screening to Obtain Crystal Hits for Protein Crystallography

Watch this Scientific Journal Video about Protein Sample Setup and Crystallization at JoVE.com

Protein Sample Setup and Crystallization (Video) | JoVE 

הגדרת דגימת חלבונים והתגבשותם

צנטריפוגה את הדגימה מופשרת פרוקה ב 10, 000 גרם במשך שתי דקות בטמפרטורת החדר. התבונן בדגימה כדי לזהות משקעים, צבע ומצב. מחממים את צלחת 1, 536 באר מוכן ל 23 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן צנטריפוגה אותו ב 150 גרם במשך חמש דקות.באמצעות מיקרוסקופ בהיר, צלמו את הצלחת המכילה את הקוקטייל רק כדי לשמש כבקרה שלילית. יש לחלק 200 ננוליטר של הדגימה לכל באר באמצעות רובוט לטיפול בנוזלים. לאחר צנטריפוגה של הצלחת ב 150 גרם, לדגור אותו בטמפרטורה הרצויה במשך שישה שבועות.צלם תמונות שדה בהיר של הלוחות עם דגימות במרווחי זמן שבועיים מהיום הראשון עד השבוע השישי. בצע הדמיה קולית עם SHG ו- UV-TPEF. הדמיית לוחות אוטומטית לאורך כל תקופת הניסוי אפשרה זיהוי בשדה בהיר של גבישים הגדלים במהירות ובאיטיות.הדמיית UV-TPEF הצביעה על האופי החלבוני, בעוד שהדמיית SHG אישרה את האופי הגבישי של הדגימה. הדמיה קולית אפשרה זיהוי של גבישים המוסתרים על ידי משקעים או סרט שאינם מייצרים אות SHG, או מיקרו-גבישים שעלולים להיחשב בטעות כמשקעים. זוהו גם גבישים לא חלבוניים חסרי אות UV-TPEF אך בעלי אותות חזקים של שדה בהיר ו-SHG.

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Analytical Chemistry

Biochemistry

Protein Sample Setup and Crystallization

Unit 1

Introduction to Separation Methods

SCIENTISTS IN ACTION

High-Throughput Screening for Protein Crystallization

High-Throughput Screening to Obtain Crystal Hits for Protein Crystallography (Video) | JoVE 

סינון בתפוקה גבוהה להשגת פגיעות קריסטליות לקריסטלוגרפיה של חלבונים

X-ray crystallography is the most commonly employed technique to discern macromolecular structures, but the crucial step of crystallizing a protein into ...