Analyzing the Images of Caenorhabditis elegans after Drug Treatment

对药物治疗的C.elegane进行成像后，使用共定位插件在图像J服务器中打开ND文件，然后在对话框中选择分割图像选项。每个ND文件都包含在三个波长和可见光下拍摄的图像平面。处理明场、绿色和红色图像。

通过单击图像并选择重复或使用键盘快捷键移位加 D，生成这些图像的副本以保持原始图像不变。然后通过生成另一个图像副本来减少背景，如前所述。减去滚动半径为 100 的背景，然后选择创建背景选项以生成具有给定图像背景的图像。现在转到处理，单击图像计算器并从第二个重复图像中减去第一个重复的图像。

使用生成的图像进行共定位分析。要使用共定位插件，请通过单击图像，选择类型，然后选择八位，将绿色和红色通道图像转换为八位。接下来，单击插件并选择共定位。

要测量线粒体和溶酶体信号的共定位，请将比率设置为 75%，阈值红色通道设置为 80.0，阈值绿色通道设置为 50.0。生成包含共定位点并将三个八位图像组合在RGB图像中的八位二进制图像作为输出。接下来，通过手动选择区域并通过单击编辑、选择和创建掩码来选择感兴趣的区域，从而专注于蠕虫头体壁肌肉中的点。

要选择感兴趣区域中的粒子，请使用图像计算器选择共定位的八位图像和遮罩图像。利用该操作并选择感兴趣区域中的点点，生成具有感兴趣区域中点的图像。最后，要分析共定位线粒体和溶酶体的面积，请选择分析，然后分析颗粒并测量点在0.1625平方微米和4平方微米之间的总和。

蠕虫头部体壁肌肉的共聚焦图像显示线粒体和溶酶体的共定位。VL-850在蠕虫的头部体壁肌肉中诱导了强大的线粒体自噬，表明这是一种有效的线粒体自噬诱导剂。VL-850的线粒体自噬效力与FCCP相似。