Processing the Single-Cell Shear Assay Imaging Data

DICソフトウェアを使用してデジタル画像相関(DIC)を実行するには、シアーアッセイ記録から得られた画像をDICソフトウェアに、できればTIFファイル形式でインポートします。最適化された相関関係を得るには、最後の画像に対する新しい画像の変形を追跡する差分の合計オプションを選択します。31 x 31 ピクセルのサブセット サイズと 20 ピクセルのステップ サイズを選択します。

選択した単一セルの対象領域をマップします。セルなどの不規則な形状の場合は、ポリゴン マスクを使用してセルのジオメトリをマップします。マップされたセル内の任意の点を選択して、変形を追跡します。

マッピング後、[ひずみゲージの追加] をクリックし、定義されたセル境界内のポイントで個々のひずみゲージを描画して、核や細胞質などの細胞上の特定のポイントを選択します。[開始]をクリックしてひずみ処理を開始し、ひずみ対時間データを取得します。この相関の結果として生成されたひずみ時間プロットは、MATLABでさらに分析するためにCSVファイルとしてエクスポートできます。

生成されたひずみ時間プロットをダブルクリックまたは右クリックして、データのエクスポートを選択します。シアーアッセイ記録から抽出した画像フレームのDICは、クリープ応力応答と互換性のあるひずみ時間データを生成することに成功しました。シアーアッセイ技術を用いた研究の結果は、癌細胞が一般に正常細胞よりも機械的に準拠し、粘性が低いことを示した。

細胞の硬さと粘度は、正常な細胞状態からわずかに転移性の状態へ、そして最終的に高度に転移性の状態への癌の進行の増加とともに減少することが観察されました。しかしながら、これらの細胞型の緩和時間は有意な変動を示さなかった。